16. Анализ рекомбинации в отсутствии мейоза

Это тетрадный анализ у аспергиллуса. Соматическая рекомбинация и митотическая рекомбинация.

17. Внутригенное картирование

Выяснение порядка нуклеотидов в гене.

делеционное картирование.

Mетод определения положения генных локусов в геноме с помощью небольших делеций с известной локализацией; положение гена определяется по его попаданию в область делеции, что сопровождается прекращением экспрессии гена. Его часто применяют при картировании Х-хромосомы, поскольку делеции в Х-хромосоме - частая причина заболеваний у мужчин и, кроме того, Х-хромосому можно картировать, не прибегая к получению гибридов соматических клеток.

Делеционное картирование помогает установить относительное расположение генетических маркеров, однако оно не дает точной информации о расстоянии между ними. Информацию о физическом расстоянии дает картирование длинных рестрикционных фрагментов

18. Доказательства генетической роли нуклеиновых кислот

Трансформация в генетике, внесение в клетку генетической информации при помощи изолированной ДНК. Явление трансформации было открыто в 1928 английским учёным Ф. Гриффитом, наблюдавшим наследуемое восстановление синтеза капсульного полисахарида у пневмококков при заражении мышей смесью убитых нагреванием капсулированных бактерий и клеток, лишённых капсулы. Организм мыши в этих экспериментах играл роль своеобразного детектора, так как приобретение капсульного полисахарида сообщало клеткам, лишённым капсулы, способность вызывать смертельный для животного инфекционный процесс. Помимо пневмококков, трансформация обнаружена и изучена на некоторых других бактериях. Трансформация у бактерий рассматривают как сложный процесс, включающий следующие стадии: фиксация молекул ДНК клеткой-реципиентом; проникновение ДНК внутрь клетки; включение фрагментов трансформирующей ДНК в хромосому клетки-хозяина; формирование «чистых» трансформированных вариантов. Фиксация ДНК происходит на рецепторах, число которых ограничено. Связанная с рецепторами ДНК сохраняет чувствительность к действию добавленного в среду фермента дезоксирибонуклеазы, вызывающего её распад. О. Т. Эйвери с сотрудниками обнаружил, что наследственные признаки одного штамма пневмококков могут быть переданы другому, генетически отличному штамму путём введения в его клетки ДНК, выделенной из первого штамма. Впоследствии подобная генетическая трансформация с помощью ДНК была осуществлена у других бактерий, а в последнее время — и у некоторых многоклеточных организмов (цветковые растения, насекомые). Было показано, что гены состоят из ДНК. Этот вывод был подтвержден опытами с ДНК-содержащими вирусами: для размножения вируса достаточно введения молекул вирусной ДНК в клетку восприимчивого хозяина; все др. компоненты вируса (белки, липиды) лишены инфекционных свойств и генетически инертны. Выяснение генетической роли ДНК и РНК послужило мощным стимулом для изучения нуклеиновых кислот биохимическими, физико-химическими и рентгеноструктурными методами. Выяснить структуру ДНК удалось в 1953 году английским ученым Д. Уотсону и Ф. Крику. Они создали модель трехмерной двухспиральной структуры молекулы ДНК. Эта модель отвечала всем основным требованиям, необходимым генетическому материалу для выполнения биологических функций. Химическая структура гена, связанная с линейным расположением нуклеотидов в цепи, позволяла сохранять закодированную с помощью генетического кода наследственную информацию. Благодаря комплементарному связыванию двух цепей молекула ДНК способна к репликации, что позволяет точно копировать генетическую информацию и поддерживать наследственное постоянство при делении клеток (митоз, мейоз). После доказательства генетической роли нуклеиновых кислот и расшифровки структуры молекулы ДНК С. Бензер в экспериментах на бактериофаге Т4 показал, что наименьшими мутирующими элементами гена являются отдельные пары нуклеотидов, и кроссинговер может происходить между двумя парами нуклеотидов. Было окончательно постулировано, что ген представляет собой определенный участок ДНК, состоящий из нескольких тысяч пар нуклеотидов.