24. Повышение содержания аммиака в крови

Повышение содержания аммиака вкрови называется гипераммониемией

25. Причины гипераммониемии: генетический дефект ферментов орнитинового цикла в печени, поражение печени в рез-те цирроза, гепатита и др. заболеваний. Гипераммониемия 1 типа – дефект карбамоилфосфатсинтетазы 1, гипераммониемия 2 типа – дефект орнитинкарбамоил трансферазы

26. Почему реактивы для определения активности ферментов готовят на буферных растворах?

В качестве буферных соединений в диагностических наборах используют растворы солей неорганических и органических кислот, амины (триоксиметиламинометан, диэтаноламин, триэтиламин, имидазол) и другие соединения. Природа буферного соединения влияет на скорость ферментативной реакции.

Некоторые примеси, например продукты окисления или распада органических соединений, могут инактивировать фермент, ингибировать его активность, или вызвать окрашивание в холостой пробе.

Концентрация буферного соединения влияет на конформацию фермента в растворе и должна быть оптимальной для каждого фермента.

Ферменты чрезвычайно чувствительны к изменениям рН среды. Для каждого фермента существует оптимальное значение рН раствора, при котором превращение субстрата происходит с максимальной скоростью. Например, для ЩФ оптимум рН лежит в области 9,9–10,3, для АСТ и АЛТ — в области 7,2–7,4 и т.д. Небольшие отклонения от оптимального значения рН могут вызвать уменьшение активности фермента в несколько раз.

27. Почему при определении активности ферментов реакционную смесь помещают в термостат.

Активность фермента меняется при различных условиях реакции и зависит от температуры, рН среды, от концентраций субстратов и кофакторов. Учитывая это, при определении активности фермента на разных стадиях необходимо строго соблюдать одни и те же условия. Термостат поддерживает определенную температуру. Ферменты термолабильны ( чувствительны к изменению t). температурный оптимум для большинства ферментов человека составляет 37-38 С. При увеличении температуры выше 40 градусов происходит денатурация фермента, сопровождающаяся изменением конформации белка. Снижение температуры замедляет броуновское движение молекул, взаимодействие фермента с субстратом => и образование продукта реакции идет с низкой скоростью. При 0 С ферменты сохраняют слабую активность но в процессе замораживания клеток бх-е реакции приостанавливаются. После оттаивания, если соблюдаются определенные условия, ферментативные процессы могут возобновиться.

28. Почему надо знать Км данного фермента для определения его активности.

Концентрация субстрата при которой скорость реакции составляет половину максимальной, называется константой Михаэлиса- Ментен. Величина Кm характеризует сродство фермента к субстрату: чем ниже значение Кm фермента тем выше его сродство к субстрату, и наоборот.

29. Что такое энзимодиагностика?

Энзимодиагностика – раздел учения о ферментах, в котором постановка диагноза заболевания (или синдрома) проводится на основе установления активности определенных ферментов в биологических жидкостях организма. Состав ферментов и их тканевое распределение у взрослого человека в основном постоянны и могут изменяться при заболеваниях. При патологических процессах повреждаются мембраны клеток, и содержащиеся в этих клетках ферменты выходят в кровь. Активность и содержание таких ферментов в крови изменяется и отличается от нормы в течение определенного времени после начала заболевания.

          б) Ферменты, активность которых определяют при энзимодиагностике, должны удовлетворять требованиям :

          • органоспецифичность;

          • в норме активность в крови должна быть невысокой;

          • при патологии ферменты должны поступать в кровь.

          Также важно, чтобы активность фермента была достаточна для его обнаружения.

30,31. У человека лактатдегидрогеназа (ЛДГ) присутствует в виде 5 изоферментов. Каждый из изоферментов ЛДГ является тетрамером, образованным субъединицами двух типов - Н и М. Изоферменты ЛДГ-1 (НННН) и ЛДГ-2 (НННМ) присутствуют в большой концентрации в мышце сердца, а также в эритроцитах и корковом веществе почек; изоферменты ЛДГ-4 (НМММ) и ЛДГ-5 (ММММ) - в скелетной мускулатуре и в печени. Изофермент ЛДГ-3 (ННММ) характерен для легочной ткани.  Основная цель определения ЛДГ-1 и ЛДГ-2 – диагностика острого инфаркта миокарда. Так повышение ЛДГ-1 и ЛДГ-2 при нормальном содержании ЛДГ с достаточной точностью подтверждает наличие инфаркта миокарда (при наличии патогномоничных клинических симптомов). Повышение активности ЛДГ-1 и ЛДГ-2 также наблюдается при мегалобластных анемиях.

Резкое увеличение ЛДГ5 и ЛДГ4, уменьшение ЛДГ-1 и ЛДГ-2 – острый гепатит

Увеличение ЛДГ5- цирроз

Незначительное Увеличение ЛДГ5- холецистит

Заболевания скелетной мускулатуры – ЛДГ5