4.2 Отгонка

К охлажденному содержимому колбы Къельдаля осторожно приливают 30 см³ дистиллированной воды, взбалтывают и подсоединяют колбу к отгонному аппарату. До начала процесса отгонки готовят приемную колбу, в которую наливают из бюретки точно 20 см³ 0,1 н серной кислоты и добавляют несколько капель индикатора, затем ставят эту колбу под холодильник так, чтобы конец холодильника был погружен в раствор. После этого в колбу Къельдаля через воронку осторожно приливают около 30 см³ 33 % раствора едкого натрия. При этом цвет содержимого колбы должен резко измениться от прозрачного до бурого или синего.

Далее через содержимое колбы Къельдаля пропускают из парообразователя пар. При этом происходит нагревание реакционной смеси и сернокислый аммоний разлагается с выделением свободного аммиака:

(ΝН₄)₂ SО₄ + 2ΝаОН → 2ΝН₃ + 2Н₂О +Νа₂ SО₄

Пар, проходящий через колбу Къельдаля, увлекает с собой аммиак и поступает в холодильник, где конденсируется, а раствор аммиака попадает в приемную колбу с 0,1 н раствором серной кислоты.

Отгонка продолжается 15-20 минут. Конец отгонки можно установить по реакции лакмусовой бумажки, поднесенной к концу холодильника. Если она не изменит цвет, значит отгонка закончена, если посинеет, то отгонку следует продолжить. После окончании отгонки проводится титрование раствора в приемной колбе.

4.3 Титрование

Остаток серной кислоты, не связанный аммиаком, титруют 0,1 н раствором едкого натрия до появления одной двух капель раствора ясного зеленого цвета. По разности между взятым количеством 0,1 н раствором серной кислоты и израсходованным на титрование количеством 0,1 н едкого натрия, определяют количество серной кислоты, связанной аммиаком.

Обработка результатов

Содержание общего азота Ν, %, рассчитывают по формуле

Ν = , (4.1)

где Ν – количество азота, % на сухое вещество;

а - количество 0,1 н раствора серной кислоты, налитой в приемник, см³;

к₁ - коэффициент поправки для пересчета на 0,1н растворН₂ SО₄;

титрование свободной кислоты, см³;

к₂ - коэффициент поправки для пересчета щелочи;

р - навеска вещества, г;

W - влажность продукта, %

0,0014 – коэффициент пересчета на азот, так как 1 см³ 0,1 н Н₂SО₄ соответствует 0,0014 г азота.

Полученное общее содержание азота пересчитывается на белок по формуле

Б =Ν∙К, (4.2)

где Б- содержание белка , %;

К – коэффициент пересчета или белковый коэффициент,

К = 6,0 для зерна гречихи, кукурузы,

К = 5,95 для зерна риса,

К = 5,5 для зерна хлопчатника, льна,

К = 5,7 для зерна пшеницы, овса, ячменя, ржи,

К = 6,25 для зерна подсолнечника, бобовых культур, пивоваренного ячменя, мяса и мясных продуктов;

К= 6,38 для молока и кисломолочных продуктов.

Белковый коэффициент рассчитывается, исходя из среднего содержания азота в составе белка, например, для молочных продуктов это 15,67 %, тогда:

К = = 6,38.

Вычисление проводят до тысячных долей процента с последующим округлением до сотых долей процента. За окончательный результат принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемое расхождение между результатами параллельных определений не должно превышать 0,3 %.