- •Лабораторна робота №4
- •Завдання
- •Теоретична основа
- •Підготувати мікропрепарат міцелію гриба роду Mucor та провести його мікроскопію Хід роботи
- •Підготувати мікропрепарати міцелію грибів роду Penicillіum і Aspergillus та провести їх мікроскопію Хід роботи
- •Морфологічні ознаки дріжджів Теоретична частина
- •Завдання
- •Теоретична основа
- •Хід роботи
- •Питання для самоконтролю
- •Лабораторна робота №5
- •Приготування м’ясопептонного бульйону (мпб) і м’ясопептонного агару (мпа) із м’яса та із сухого промислового мпа Хід роботи
- •Техніка приготування середовищ, із готових сухих, які випускає промисловість Хід роботи
- •Питання для самоконтролю
- •Лабораторна робота №6
- •Завдання
- •Теоретична основа
- •Термічна стерилізація
- •Хімічна стерилізація
- •Стерилізація ультрафіолетовими променями
- •Стерилізація фільтруванням
- •Підготувати посуд до стерилізації Хід роботи
- •Стерилізація живильних середовищ та розчинів Хід роботи
- •Питання для самоконтролю
Хімічна стерилізація
Хімічну стерилізацію використовують для дезінфекції приміщення, столів, знищення патогенних культур мікроорганізмів тощо.
Для стерилізації цим методом застосовують солі важких металів (найчастіше ртуті, міді, цинку), 50-60%-ий розчин етилового спирту, оксихіноліну, лізол, формалін (41%-ий розчин формальдегіду), хлорне вапно, хлорамін, пероксид водню, перманганат калію, пропіолактон, йод, йодоформ, детергенти та інші хімічні сполуки.
Обладнання, яке має дзеркальні, оптичні поверхні, радіодеталі, а також вироби з термолабільних пластмас (чашки Петрі, центрифужні пробірки тощо) стерилізують, застосовуючи газовий метод. Найчастіше використовують оксид етилену, метилбромід, формальдегід, пропіолактон, озон тощо. Газову стерилізацію здійснюють у спеціальних герметичних апаратах. При стерилізації строго контролюють концентрацію газу, тиск, вологість, температуру і тривалість обробки, у більшості випадків процес відбувається при температурі 45°С–70°С. Режим стерилізації різними газами неоднаковий. Предметами, простерилізованими газами, можна користуватися лише через 24 години (після десорбції газів).
Стерилізація ультрафіолетовими променями
Приміщення (стерильні бокси, операційні, реанімаційні), інколи вироби з термолабільних пластмас стерилізують за допомогою ультрафіолетових променів у діапазоні 260-280 нм. Час опромінення, який встановлюють експериментально, залежить від потужності бактерицидної лампи, від величини об’єкту стерилізації. При обробці УФ-променями дрібних предметів їх одразу після стерилізації кладуть у стерильний обгортковий матеріал або стерильний посуд, де і зберігають до використання.
Стерилізація фільтруванням
Метод часто застосовують для стерилізації субстратів, які не витримують нагрівання, зокрема, сироваток, рідких середовищ і розчинів, до яких входять термолабільні білки, вітаміни, вуглеводи, деякі антибіотики. Спосіб полягає в пропусканні рідин через спеціальні дрібнопористі фільтри, діаметр пор яких менший за розміри бактерій.
У лабораторіях як бактеріальні фільтри використовують:
1. Мембранні (колоїдні) фільтри, виготовлені на основі ефірів целюлози. Це диски різного діаметру товщиною 0,1-0,5 мм. Розміри пор вітчизняних мембранних фільтрів коливаються в межах від 0,35 до 3,5 мкм. Фірма “Міліпор” (Франція, США) продукує фільтри з розміром пор від 0,01 до 14 мкм, фірма “Синпор”(Чехія) – від 0,12 до 4 мкм.
На практиці придатність фільтрів для стерилізації встановлюють шляхом пробного фільтрування через них суспензії дрібних мікроорганізмів (наприклад, Serratia marcescens). Для перевірки на стерильність фільтрат у великих кількостях висівають на живильні середовища. Якщо протягом 5-ти діб тест-мікроорганізм не проросте, фільтри можуть бути використані для стерилізації.
2. Азбестові фільтри Зейца виготовляють з суміші азбесту і целюлози. Їх недоліком є те, що азбест адсорбує речовини рідини, а фільтрат забруднюється волокнами.
3
Рис.
1. Фільтр Зейтца
Для прискорення фільтрації на фільтрі, зазвичай, створюють перепад тисків, якого найчастіше досягають відкачуванням повітря з допомогою вакуумного насоса чи компресора.
Серйозним недоліком цього способу стерилізації є те, що фільтрування через будь-який фільтр, окрім видалення з розчину суспендованих у ньому частинок, може також призвести до різкої зміни властивостей фільтрату. Так, при фільтруванні може змінюватись рН не буферного розчину, у фільтрат можуть потрапляти різного роду іони, гліцерин тощо.
