- •Биотехнология – как наука. Задачи, методы и перспективы развития
- •1.Понятие «биотехнология». Этапы становления науки. Объекты биотехнологии
- •2. Задачи и методы биотехнологии.
- •3. Трудности и проблемы биотехнологии.
- •Генная инженерия. Получение трансгенных растений и животных
- •1. Генная инженерия как метод.
- •2. Механизм генной инженерии.
- •3. Методы получения трансгенных растений.
- •4. Направления в получении трансгенных растений.
- •5. Методы генной инженерии в животноводстве. Получение трансгенных животных.
- •6. Использование генной инженерии в медицине.
- •Основы клеточной инженерии. Клональное микроразмножение. Гибридомы.
- •2. Морфогенез в каллусных тканях. Тотипотентность.
- •3. Клональное микроразмножение растений и его преимущества.
- •4. Получение протопластов и соматическая гибридизация.
- •Биотехнология производства метаболитов. Инженерная энзимология. Биотехнология в пищевой промышленности.
- •Получение первичных метаболитов: незаменимых аминокислот, органических кислот, витаминов.
- •Получение вторичных метаболитов
- •3 Технология получения и использования ферментов. Иммобилизованные ферменты.
- •4. Культивирование микроорганизмов.
- •5. Биотехнология в пищевой промышленности.
- •Экологическая биотехнология. Защита окружающей среды
- •1.Биологические методы борьбы с вредителями.
- •2.Очистка сточных вод.
- •3. Переработка твердых отходов.
- •4 .Биотрансформация ксенобиотиков и загрязняющих веществ. Получение экологически чистой энергии.
4. Направления в получении трансгенных растений.
4.1 Усвоение азота.
Усвоение атмосферного азота – это свойство характерно для азотофиксирующих бактерий. Они могут вступать в симбиоз с бобовыми, рисом, некоторыми деревьями и травами. Азот фиксируется благодаря уникальному ферменту – нитрогеназе. Гены, ответственные за фиксацию азота называют nif-гены.
Конструирование плазмид, несущих nif-гены, позволяет передавать способность к фиксации азота организмам, не обладающим этим свойством, например злаковым растениям. Тогда таким генно-модифицированным растениям не нужны будут азотные удобрения, что позволит съэкономить ресурсы и время. Кроме этого, предполагается создание новых азотофиксирующих систем путем введения азотофиксирующих микроорганизмов в каллусные ткани растений с целью получения растений – регенерантов, способных усваивать азот.
Но введение nif-генов в растительную клетку не решает проблемы. Клетка может быть не приспособлена к синтезу и расходу большого количества энергии, требуемой для фиксации азота. Другой аспект: фермент нитрогеназа очень чувствителен к кислороду, последний ингибирует действие фермента. В самих азотофиксирующих бактериях есть ряд приспособлений, защищающих фермент, а в растительной клетке таких механизмов нет.
4.2 Устойчивость растений к фитопатогенам.
Наибольший урон растениям наносят грибковые, бактериальные и вирусные патогены. В самом растении есть защитные механизмы, которые в большей или в меньшей степени противодействуют фитопатогенам – выделение ферментов хитиназы и глюконазы, которые угнетают рост грибов и бактерий. Кроме того, в клетках создаются мембранные структурные барьеры, препятствующие попаданию внутрь клетки инфекций.
Генная инженерия использует эти свойства растений. Гены хитиназы и глюконазы кодируются одиночными генами. Были получены трансгенные растения табака и турнепса, в состав генома которых ввели ген хитиназы. Испытания показали устойчивость этих растений к заболеваниям.
Другой подход – это введение в геном растения оболочки вируса, что приводит к подавлению вирусных инфекций (трансгенный табак).
4.3 Устойчивость растений к гербицидам.
Гербициды - это химические соединения, которые применяют для уничтожения сорной растительности. Но они также угнетают рост культурных растений. Поэтому одно из направлений генной инженерии растений – это введение в растительную клетку генов гербицид-резистентности (устойчивости). Такие растения были получены, но в них наблюдается накопление гербицидов, поэтому их пока используют в технических целях.
4.4 Устойчивость растений к насекомым.
Инсектициды – это химические вещества, которые применяют для уничтожения насекомых-вредителей. Но инсектициды токсичны, к тому же, смываются водой. Поэтому ведутся работы по внедрению в растительную клетку генов, отвечающих за синтез инсектицидов бактериального происхождения (протоксинов). Такие гены вводят в клетки картофеля, томата (устойчивость к колорадскому жуку), хлопчатника, табака и др.
4.5 Устойчивость растений к абиотическим стрессам.
Адаптация растений к неблагоприятным факторам в природе осуществляется тремя способами:
Физиологические механизмы (период покоя).
Морфологические особенности (слой кутикулы, опушение, уменьшение листовой поверхности).
Изменение метаболизма (при недостатке влаги накапливаются определенные вещества).
Именно последний способ наиболее доступен для генно-инженерных исследований. Уже сейчас получены растения, которые могут укореняться, и расти в соленой воде, расти при отрицательных температурах.
Получение трансгенных растений имеет большие перспективы. Ведутся работы по получению масличных культур с повышенным содержанием масла; овощей и фруктов, содержащих больше витаминов. Недавнее достижение – «золотой рис»: ученым удалось ввести в геном риса гены, ответственные за синтез провитамина А и гены, способствующие увеличению содержание железа в зернах. Это особенно важно для обитателей азиатских стран, где рис – основная пища. Исследования также ведутся по следующим направлениям – получение растений-вакцин, растений-фабрик лекарств, растений-биореакторов для производства промышленных продуктов (пластика, красителей, масел и пр.) Результаты показывают, что их экономический эффект от их внедрения будет значительным.
