Подготовка одежды.

Для соблюдения правил асептики при работе с ИМБП в боксе используют стерильную одежду: медицинскую шапочку или косынку, хлопчатобумажные брюки, носки, халат, резиновые перчатки и ватно-марлевую повязку или респиратор типа "Лепесток". Четыре комплекта перечисленной одежды, кроме перчаток, помещают в бикс и стерилизуют в автоклаве при температуре (121±1)°С в течение 60 мин. Перчатки кипятят в дистиллированной воде в течение 30 мин. Дополнительно к одежде должны быть предусмотрены две пары сменных тапочек.

Стирку повседневной боксовой одежды проводят один раз в 5...6 дней с последующей ее стерилизацией.

Подготовка помещений и оборудования к работе.

Помещения и оборудование должны быть расположены, спроектированы, выполнены, дооснащены и содержаться в исправном состоянии так, чтобы они были пригодны для предусмотренных операций.

Помещения должны содержаться в исправном состоянии, работы по ремонту и техническому обслуживанию не должны представлять какой-либо опасности для качества ИМБП.

Уборка производственных, подсобных и бытовых помещений должна производиться подсобными рабочими, а уборка рабочих мест – рабочим персоналом.

Панели, стены, двери боксовых помещений необходимо ежедневно протирать влажными тряпками, смоченными 5%-ным раствором перекиси водорода и 0,5%-ным раствором моющих средств "Сульфанол", "Прогресс" или стирального порошка "Новость", "Кристалл", "Трилон". Полы тщательно моют 1 %-ным раствором жидкого мыла. После подсыхания поверхностей проводят дезинфекцию помещений путем орошения 5 % водным раствором перекиси водорода из расчета 0,2 дм³ на 1 м² обрабатываемой поверхности. Орошение проводят факелом аэрозоля с помощью пневматического прямоструйного распылителя эжекторного типа при давлении сжатого воздуха (0,18±0,02) МПа. Давление контролируют по манометрам, установленным на трубопроводе генератора сжатого воздуха. На пол для протирки обуви перед входом в боксовые и производственные помещения кладут коврики, пропитанные 3%-ным раствором хлорамина.

Наружную поверхность оборудования и электроосветительную арматуру протирают ветошью, смоченной дезинфицирующими растворами.

Обработка сливов с чистых комнат осуществляется в системе СТОС корпуса 1002 МНИЦКП.

Определение микробной обсемененности воздуха проводят не реже 1 раза в неделю во время производственного процесса, о чем производят соответствующую запись в «Журнале контроля обсемененности помещений».

3. Определение микробной обсемененности воздуха.

Для определения количества КОЕ в воздухе можно использовать метод Коха (осаждение клеток микроорганизмов на плотных питательных средах). Суть его сводится к следующему. Стерильные чашки Петри с питательной средой (МПА) открывают в исследуемом помещении на 5 минут. Частицы пыли с бактериями под действием силы тяжести оседают на поверхность плотной питательной среды. Через 48 ч инкубации при 28 – 30 ⁰С осевшие бактерии образуют на среде колонии, которые можно подсчитать. Поскольку некоторые микроорганизмы развиваются медленно, окончательно подсчитывают колонии на 5-е сут.

На площади в 100 см² за 5 мин осаждается примерно столько клеток, сколько их находится в 10 л воздуха (0,01 м³). Зная площадь чашки Петри, можно подсчитать количество клеток в 1 м³ воздуха. Для этого число колоний, выросших в чашке Петри, относят к общей площади чашки, затем пересчитывают, сколько таких колоний поместилось бы на 100 см² и далее – в 1 м³ воздуха.

Пример расчета. В чашке Петри диаметром 10 см выросло 45 колоний. Площадь чашки составит 3,14*5²=78,5 см². Далее подсчитывают число клеток на 100 см² (равнозначных 10 л или 0,01 м³ воздуха):

78,5 см² воздуха содержат 45 клеток

100,0 см² »»»»»»»»»»»»»»» Х

Х= 57 (клеток).

Таким образом, в 0,01 м³ воздуха находится 57 клеток, а в 1 м³ их будет в 100 раз больше – 5700.

В исследуемых помещениях чашки Петри с агаром лучше размещать по 2 – 3. После подсчета колоний в каждой чашке выводят их среднее арифметическое значение. Этот метод отличается простотой, но небольшой точностью.