Лабораторная диагностика Скрининговые тесты экспресс-диагностики

Наличие глюкозы в моче можно определить с помощью тест-полоски, предназначенной для качественного экспресс-анализа. Выявление и полуколичественное определение глюкозы основано на окислении D-глюкозы в присутствии глюкозооксидазы с образованием эквимолярного количества пероксида водорода. Под действием пероксидазы хрена перекись водорода окисляет краситель, что приводит к изменению бледно-розовой окраски аналитического элемента на ярко-красную.

Тест-полоску погружают в исследуемую мочу на 1-2 с и вынимают; каплю мочи, оставшуюся на полоске, удаляют, проведя гранью полоски по краю сосуда, и выдерживают на воздухе от 1 до 3 мин. Визуально оценивают цвет аналитического элемента. Переход светло-бежевого цвета в синий, светло-розового в красный, жёлтого в зелёный учитывают как положитель-ный результат. «Положительные» пробы мочи направляются на количественное исследование.

Чувствительность «Глюко-Уротеста» - 1,4-5,6 ммоль/л, или не более 0,1% массовой доли глюкозы в исследуемой моче.

Опреледение глюкозы ферментативным методом

Глюкозооксидазный метод определения глюкозы в крови хорошо зарекомендовал себя использованием наборов реагентов фирм «Берингер Маннгейм», «Мерк», «Хуман», «БиоМерье», «Лабсистемс», которые обладают высокой специфичностью и чувствительностью. Суть метода заключается в том, что этот моносахарид в присутствии фермента (глюкозооксидазы) окисляется кислородом воздуха с образованием пероксида водорода, при разрушении которого под влиянием пероксидазы происходит конденсация фенола и пара-аминоантипирина в окрашенное соединение 4-(n-бензохинономоноимино)-феназон. Количество последней прямо пропорционально содержанию присутствующей в пробе глюкозы. Цветной комплекс фотометрируется при λ=500 нм (490-520 нм).

Тест толерантности к углеводам

Перед выполнением исследования необходимо определить глюкозооксидазным методом уровень глюкозы крови натощак, при этом он не должен превышать 6,7 ммоль/л. Если концентрация равна или выше указанной цифры, то можно с уверенность диагностировать сахарный диабет, и в этом случае тест не проводится.

Проба с однократной нагрузкой глюкозой. До проведения нагрузки на протяжении 3-х суток пациент придерживается диеты, содержащей достаточное количество углеводов, но не слишком богатой белками и жирами. Пациенту дают нагрузку per os, содержащую 75 г глюкозы, растворённой в 200 мл теплой кипячёной воды. Кровь из пальца берут натощак и после нагрузки через каждые 30 мин в течение 2-х часов.

Первый подъём уровня глюкозы (30-я мин) отражает процессы всасывания. Дальнейшее увеличение концентрации этого моносахарида (30-я мин – 1 ч) обусловлено развитием алиментарной гипергликемии (у здорового человека цифры глюкозы через 1 час после нагрузки обычно на 50-75% превышают уровень её натощак). Гипогликемическая фаза - (1-2 ч) отражает продукцию инсулина, состояние печени и других важных органов.

Для интегральной оценки предложено вычислять различные коэффициенты. Гипергликемический коэффициент Бодуэна получают отношением показателей наибольшей концентрации глюкозы в крови к исходной, то есть к величинам глюкозы крови натощак:

К = В : А,

где В – максимальный уровень глюкозы;

А – исходный уровень глюкозы.

В норме К составляет 1,3-1,5.

Пример расчёта. Исходное содержание глюкозы в крови равно 5,55 ммоль/л, максимальное, после нагрузки, - 8,34 ммоль/л. Гипергликемический коэффициент составляет 8,34 : 5,55 = 1,5. Коэффициент Бодуэна, рассчитанный по формуле (В – А) : А · 100, в норме должен быть равен 50% (с максимальным отклонением до 75%).

Постгликемический коэффициент (Рафальского) представляет собой частное от деления показателя концентрации глюкозы, определённого через 2 часа после нагрузки, на исходное её значение, то есть содержание натощак:

К = С : А,

где С – уровень моносахарида, определенный через 2 ч после нагрузки;

А – исходные цифры глюкозы.

У практически здоровых взрослых людей гипогликемический коэффициент (Рафальского) составляет 0,9-1,04.

Пример расчёта. Первоначальное содержание глюкозы в крови пациента – 5,55 ммоль/л, через 2 ч после нагрузки – 5,77 ммоль/л. Постгликемический коэффициент равен 5,77 : 5,55 = 1,04.