Фиксация лягушки
В целом ряде работ используется спинальный препарат лягушки - лягушка, у которой разрушен головной и сохранен спинной мозг. При препаровке соответствующих нервов и мышц и проведении исследований спинальную лягушку необходимо закрепить на пластинке неподвижно. Лучше всего фиксировать ее на пробковой (или парафиновой) пластинке размером 20x10 см.
Фиксируя лягушку на пластинке, важно хорошо натянуть ее конечности, чтобы они были неподвижными и не мешали записи ответных реакций. Булавки необходимо вкалывать в направлении, противоположном движению конечности: иначе лапки скользят по булавке, и фиксация не обеспечивается
Глава 1. Физиология возбудимых тканей
Занятие № 1. Электрические явления в возбудимых тканях
Контрольные вопросы по теме занятия
Физиология как наука, её основные понятия и предмет изучения.
Методы физиологических исследований.
Раздражители: определение и классификация.
Возбудимые ткани. Общие свойства возбудимых тканей.
Электрические явления в возбудимых тканях. История их открытия.
Современные представления о механизмах возникновения биопотенциалов.
Биологические мембраны, их строение и функции.
Ионная асимметрия между наружной и внутренней средами клетки.
Ионные каналы, их классификация и роль.
Виды транспорта ионов через мембраны, их роль.
Состояние функционального покоя. Мембранный потенциал покоя (МПП), его происхождение. Регистрация МПП с помощью микроэлектродной техники.
Деятельное состояние тканей. Мембранный потенциал действия, его фазы и их происхождение.
Понятие о возбудимости. Мера возбудимости. Соотношение фаз возбудимости с фазами потенциала действия. Понятие о лабильности возбудимых тканей.
Практическая работа № 1 Приготовление нервно-мышечного препарата
Цель работы: овладеть методикой приготовления нервно-мышечного препарата.
Для работы необходимы: лягушка, марлевые салфетки, инструменты для препарирования, дощечка для препарирования, чашка Петри, 0,6% раствор хлорида натрия.
Ход работы:
Приготовление препарата задних лапок.
Взять лягушку, завернуть в марлевую салфетку так, чтобы передние конечности лягушки были прижаты к телу, а голова оставалась свободной (рис. 3). Обездвижить лягушку путем разрушения головного и спинного мозга. После разрушения спинного мозга вынуть иглу из спинномозгового канала и проверить наличие рефлексов. Взять лягушку за задние лапки так, чтобы брюшко ее отвисало, перерезать позвоночник поперек, сделать два разреза справа и слева позвоночника, подрезая кожу вместе с мышцей до симфиза (рис.3.1). Отрезать и удалить свисающие внутренности, а также кожу и мышцы брюшной стенки так, чтобы остались задние конечности с крестцом, кусочком позвоночника и выходящими из сохраненного остатка спинномозгового канала седалищными нервами. Держа одной рукой позвоночник, другой захватить край кожи салфеткой и снять ее. Получается препарат двух задних лапок лягушки (рис.3.2).
Рис. 3 Приготовление нервно-мышечного препарата (пояснения в тексте)
Приготовление реоскопической лапки.
Препарат задних лапок лягушки взять за позвоночник и перегнуть так, чтобы копчик выдавался вверх. Вырезать копчик ножницами. Положить препарат брюшной стороной вверх (рис. 3.3). Стараясь не задеть нервных стволиков крестцового сплетения, разрезать по средней линии позвоночник и отделить лапки друг от друга. Придерживая остаток позвоночника выделить седалищный нерв с использованием стеклянных крючков. Удалить тазовую кость, перерезав ее около позвоночника и тазобедренного сустава (рис. 3.4).
Приготовление нервно-мышечного препарата.
Следующим этапом работы является препарирование седалищного нерва и икроножной мышцы. Для препарирования нерва бедро располагают задней поверхностью вверх, мышцы разводят и препарируют лежащий в глубине седалищный нерв по всей его длине. Приподняв нерв за остаток позвоночника, нужно осторожно подрезать ножницами окружающие ткани. Перерезать лапку на полтора сантиметра выше коленного сустава (рис. 3.5). Удалить остатки мышц бедра. Подвести под ахиллово сухожилие браншу ножниц, отделить его по всей длине и подрезать ниже сесамовидной косточки. Захватив сухожилие пинцетом, оттянуть икроножную мышцу в сторону, разрывая фасции, связывающие ее с другими тканями. Перерезать лапку ниже коленного сустава. Получается нервно-мышечный препарат икроножной мышцы и седалищного нерва (рис. 3.6). Препарат поместить в чашку Петри содержащую раствор Рингера или 0,6% раствор натрия хлорид.
Результаты работы и их оформление. Зарисовать в протоколах приготовленные по этапам препараты.