- •Методические рекомендации для студентов
- •Бореллиозов (возвратный тиф), лептоспирозов»
- •Тема занятия. «Микробиология спирохетозов - трепонематозов (сифилис), бореллиозов (возвратный тиф), лептоспирозов».
- •Мотивация изучения темы.
- •Цели занятия.
- •3.2. Конкретные цели и задачи.
- •Методические указания по выполнению практической работы с полным регламентом протокола и его оформлением.
- •4. Задания для самостоятельной подготовки к практическому занятию:
- •Перечень контрольных вопросов для самоконтроля знаний.
- •Задания для срс во внеучебное время
- •Задания для самоконтроля подготовки к практическому занятию (тесты).
- •Этапы проведения практического занятия.
- •Ориентировочная основа действия (оод) по проведению практического занятия.
- •Задания для контроля уровня сформированности компетенций в учебное время.
- •Программное обеспечение и Интернет-ресурсы
- •Приложение № 1 Лабораторная диагностика сифилиса
- •1. Материал и его отбор
- •2. Микробиологическое исследование при сифилисе.
- •Микроскопическое исследование
- •Серодиагностика
- •Специфических - р.Иммобилизации бледных трепонем (рибт)
- •Приложение № 2 Иммунологическая диагностика сифилиса.
- •2. Схема основного опыта реакции Вассермана (при объеме 2.5 мл)
- •3. Для диагностики поздних и латентных форм сифилиса большое значение имеет реакция Вассермана со спинномозговой жидкостью
- •4. Реакция иммобилизации бледных трепонем (pибt):
- •5. Сведения о реакции иммунофлюоресценции, см. Общий курс. Приложение № 3
- •Приложение 4
- •Микробиологическое исследование.
- •Приложение№ 7 Лабораторная диагностика лептоспирозов
- •Микробиологическое исследование.
Серодиагностика
Для скрининга используется реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном, которую называют ЭДС – экспресс-диагностика сифилиса.
Материал :
Сыворотка крови, ликвор
С визуальной оценкой реакций: Оценка реакций при микроскопии
Специфических - р.Иммобилизации бледных трепонем (рибт)
р.Вассермана;
РПГА - непрямой иммунофлюоресценции (РНИФ)
- прямой иммунофлюоресцентный (РИФ)
Приложение № 2 Иммунологическая диагностика сифилиса.
1. В качестве антигенов для реакции Вассермана используют:
- спиртовый экстракт липидов из мышцы сердца быка с добавлением 0,25 – 0,3 % холестерина (близок по составу к трепангам);
- кардиолипиновый (высокоочищенный экстракт бычьего сердца, имеющий постоянный химический состав липидов и смешанный в постоянной пропорции с лецитином, холестерином (постоянство химического состава обеспечивает унификацию результатов);
- протеиновый специфический комплекс (ультрозвученный антиген) из культуры бледных трепонем.
Кардиолипиновый антиген лишен антикомплементарности и гемотоксичности (поэтому нет необходимости в контролях).
2. Схема основного опыта реакции Вассермана (при объеме 2.5 мл)
№ п/п |
Ингредиенты |
№ пробирок |
|||||||||
|
|
1 |
2 |
3 |
контроли |
||||||
|
|
|
|
|
Сыворотки |
Антигена на анти-комплементарность |
Гемотоксич-носгь |
||||
1. |
Испытуемая, инактивированная при + 56о С 30 минут сыворотка больного, мл |
0,1 |
0,1 |
0,1 |
0,1 |
- |
- |
- |
|
||
2. |
Физиологический раствор (0,85 % NaCl) |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
0,9 |
0,5 |
0,5 |
1,0 |
1,0 |
||
3. |
Антиген № 1 кар-диолипиновый антиген,разведенный по титру |
0,5 |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
|
||
4. |
Антиген № 2 спиртовый экстракт липоидов из мышцы сердца быка |
- |
0,5 |
- |
- |
0,5 |
- |
0,5 |
- |
||
5. |
Антиген № 3 ультраозвученный антиген из культуры бледных трепонем |
- |
- |
0,5 |
- |
- |
0,5 |
- |
0,5 |
||
6. |
Комплемент в рабочей дозе |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
- |
- |
||
В термостат на 45 минут, при + 37о С. |
|||||||||||
7. |
Гемолитическая система (сенсибилизированная) |
1,0 |
1,0 |
1,0 |
1,0 |
1,0 |
1,0 |
1,0 |
1,0 |
||
Результат у больного сифилисом |
Задержка гемолиза
|
Гемолиз |
Гемолиз |
Гемолиз |
Нет гемолиза |
Нет гемолиза |
|||||
