1. Проба нагрузок

Современные методы нагрузок основаны на следующих, экспериментально доказанных фактах:

• человек ежедневно выделяет с суточной порцией мочи 20-50 мг аскорбиновой кислоты;

• при полном или частичном выключении из пищи витамина С выделение его уменьшается или прекращается. Это происходит постепенно, что указывает на наличие в тканях известного количества (резерва) витамина С;

• при приеме человеком внутрь массивных доз аскорбиновой кислоты - 200-300 мг, количество ее, выводимое с мочой, резко повышается. Это явление наблюдается у людей, получивших с пищей достаточное количество аскорбиновой кислоты, т.е. когда тканевые резервы аскорбиновой кислоты в организме заполнены; явление не имеет места, если диета человека содержала мало витамина С.

Путем дачи человеку массивных доз витамина С количество последнего в его моче можно резко поднять. На этом и основано проведение пробы нагрузок.

Техника метода

Испытуемый принимает несколько дней подряд внутрь по 300 мг аскорбиновой кислоты, что сопровождается определением содержания ее в порции мочи, взятой через 4-7 часов после приема препарата. Если ткани заполнены витамином С в достаточном количестве, то его содержание в моче при нагрузке указанными дозами быстро и значительно повышается против нормы. Если же тканевые резервы витамина истощены, то принятая внутрь аскорбиновая кислота удерживается в организме и количество ее в моче не увеличивается до определенного времени.

Организм считается «насыщенным» витамином С с момента, когда в порции мочи, взятой через 4-7 часов после приема витамина, концентрация его достигает 15-20 мг. Последнее должно наступить не позднее 4 дней от начала нагрузки.

2. Внутрикожная проба

Проба основана на способности кожи обесцвечивать индофенол при его взаимодействии с витамином С, содержащимся в коже. В результате клинических и экспериментальных исследований установлено, что время, требующееся для обесцвечивания введенного индофенола, является показателем содержания в тканях организма витамина С. Установлен следующий критерий для оценки, подтвержденный рядом исследователей:

• обесцвечивание индофенола в течение времени менее 5 минут указывает на оптимальное обеспечение организма витамином С и соответствует его содержанию в крови 1-2 мг%;

• обесцвечивание краски в течение 5-10 мин указывает на нормальное содержание витамина С в организме;

• обесцвечивание реактива за время свыше 10 минут указывает на дефицит витамина С в организме.

Для инъекций употребляется реактив Тильманса (5% мг индофенола на 100 мл воды).

Краску вводят внутрикожно в область внутренней поверхности предплечья, в места, свободные от вен. Вводимая краска должна образовывать волдырь диаметром 2 мм (следует ввести 0,05 мл р-ра). Выводится среднее арифметическое из времени обесцвечивания двух волдырей.

Оценка витаминного статуса

Витаминный статус организма оценивают с помощью физиологических (резистентность кожных капилляров), биохимических (содержание витаминов и их метаболитов в крови и моче) и клинических методов.

Проба на резистентность капилляров является косвенным показателем полноценности питания, обеспеченности аскорбиновой кислотой, флаваноидами.

Этот тест также используется в диагностических целях при ряде заболеваний, сопровождающихся изменением состояния сосудистой стенки. Проба на резистентность капилляров к отрицательному давлению проводится при помощи ангиорезистомера, состоящего из ртутного манометра, наконечника для отсасывания воздуха и воронки.

Условия постановки пробы следующие: внутренний диаметр воронки -15,8 мм, отрицательное давление - 240 мм.рт.ст. (3,2 х 104 Па), экспозиция -3 мин., участок кожи передней области предплечья (отступя 1,5-2 см от локтевого сгиба). Оценку результатов этих исследований производят в соответствии с количеством петехий по таблице 1.

Таблица 1

Критерии оценки пробы на резистентность капилляров

Давление, мм, рт.ст. Время измерения Количество петехий Степень

С-витаминной

недостаточности

300 3 мин До 20 0-1

20-40 1

Множество 2

Сплошное (синяк) кровоизлияние 3 (авитаминоз)

200 6-15 0

175 Больше 6 Гиповитаминоз

75 6 Авитаминоз

Определение выведения аскорбиновой кислоты с мочой по методу Железняковой. Содержание аскорбиновой кислоты в моче, выделяемой натощак в течение часа, находится в прямой зависимости от ее содержания в плазме крови.

Утром обследуемый (или группа обследуемых) опорожняют мочевой пузырь и отмечают время, Второе мочеиспускание производится натощак, моча собирается в посуду и отмечается время. Количество собранной мочи измеряютмернымцилиндром,наливаютпо5млв2про6ирки,добавляютпо 0,5 мл 5% уксусной кислоты, перемешивают и титруют содержимое каждой пробирки 0,001н раствором 2,6-дихлорфенолиндофенола до слаборозового окрашивания, не исчезающего в течение 30 с. Из средней величины результатов титрования вычитают поправку на холостой опыт, равную 0,03-0,05 мл, и рассчитывают содержание аскорбиновой кислоты в часовой порции мочи по следующей формуле:

Х= П * К *0,088 / 5* У * Т мг/ч .

где: П - среднее количество 2,6 - дихлорфенолиндофенола для титрования мочи; К - поправочной коэффициент; Т - промежуток времени в часах между двумя мочеиспусканиями; У - объем мочи в мл, собранной за время Т; 0,088 - количество аскорбиновой кислоты, окисляемой 1 мл 0,001н раствора 2,6 - дихлорфенолиндофенола.

Насыщение организма аскорбиновой кислотой считается хорошим, если уринарная экскреция ее 0,8 мг/ч и более, умеренным - при 0,4-0,79 мг/ч и недостаточным - при 0,39 мг/ч и менее,