5. Хранение образцов

Средние образцы от партии семян продовольственной и зернофуражной продукции, в которой обнаружены карантинные объекты, обеззараживают и хранят на пограничном пункте или в лаборатории в течение трех месяцев.

По истечении срока хранения образцы обезличивают и уничтожают, а выявленные карантинные объекты используют как коллекционный материал.

Средние образцы от партии семян продовольственной и зернофуражной продукции, в которой не обнаружены карантинные объекты, хранят один месяц, после чего обезличивают и передают заготовительным или торгующим предприятиям.

Средние образцы скоропортящейся продукции (плоды, овощи, картофель), в которых обнаружены карантинные объекты, после проведения экспертизы уничтожают; наиболее характерные поврежденные экземпляры или их части вместе с карантинными объектами фиксируют и сохраняют в качестве образцов-документов в течение трех месяцев, после чего переводят в коллекционный материал.

Средние образцы скоропортящейся продукции, в которых не обнаружены карантинные объекты, после проведения экспертизы передают торгующей организации и предприятиям общественного питания.

Обнаруженные при досмотре и экспертизе карантинные объекты, отсутствующие в стране, и другие, представляющие интерес виды насекомых, карантинных нематод, семена и плоды сорных растений, микроорганизмы возбудителей болезней, а также поврежденные части растений с колониями щитовок и червецов с выраженными признаками нематод, болезней, а также зафиксированные образцы-документы с соответствующими этикетками используют как коллекционный материал.

Тема 5. Экспертиза. Требования и порядок

ПРОВЕДЕНИЯ ЭНТОМОЛОГИЧЕСКОЙ ЭКСПЕРТИЗЫ

Цель занятия. Освоить методики и приобрести практические навыки проведения энтомологической экспертизы.

План занятия. 1. Изучение основных правил и требований при проведении экспертизы. 2. Освоение методик проведения энтомологической экспертизы. 3. Оформление соответствующей документации при заключении экспертизы.

Карантинная экспертиза проводится в порядке, установленном Министерством сельского хозяйства и продовольствия Республики Беларусь, для окончательной идентификации карантинных объектов, выявленных при досмотре подкарантинной продукции, а также для выявления в подкарантинной продукции скрытой зараженности карантинными объектами.

По результатам карантинной экспертизы подкарантинной продукции на нее выдается свидетельство о проведении карантинной экспертизы, в котором определяются фитосанитарные мероприятия в отношении исследованной подкарантинной продукции.

Карантинная экспертиза подкарантинной продукции проводится юридическими лицами, аттестованными Министерством сельского хозяйства и продовольствия Республики Беларусь в установленном им порядке.

Экспертиза – это лабораторный анализ отобранных от партий подкарантинных материалов образцов на выявление и определение видов вредителей, болезней растений и сорняков. Лабораторная экспертиза включает проведение энтомологического, фитопатологического, фитогельминтологического анализов и методы на выявление сорняков. Проведение экспертизы образца начинают с энтомологического анализа, затем проводят фитопатологический анализ и в последнюю очередь на выявление семян сорняков, а при надобности в зависимости от вида продукции и гельминтологический анализ.

Задача энтомологической экспертизы – выяснение карантинного состояния импортируемых материалов в отношении насекомых и клещей, т.е. установление наличия или отсутствия зараженности этих материалов карантинными, а также некарантинными видами, наличие которых может привести к снижению качества импортируемых материалов или к созданию очагов заражения.

При проведении экспертизы следует соблюдать основные требования и правила, а также технические методы ее проведения с целью установления наличия или отсутствия заражения анализируемого материала вредными организмами, то есть определения его карантинного состояния.

При диагностике обнаруженных организмов используются определители по систематике этих организмов, а также коллекции карантинных объектов.

Заключение карантинных лабораторий о результатах экспертизы оформляется протоколом и свидетельством экспертизы (прил. 12, 13), на основании которых устанавливается карантинное (фитосанитарное) состояние всей партии груза. Свидетельство должно быть выдано в течение 2–3-х дней, а по живому растительному материалу (посевной и посадочный материал) – на следующий день после получения материала. Возможна задержка выдачи заключения при проведении сложных анализов до одного месяца. Свидетельство экспертизы заполняется в двух экземплярах. Первый экземпляр вручается отправителю, второй остается в лаборатории по карантину растений для составления отчетности о проделанной работе.

В зависимости от характера и объема проверяемого материала энтомологический анализ проводится различными методами: поштучный просмотр, просеивание, флотация, микроскопия, рентгенография, макролюминесцентный, биологический, ПЦР-анализ.

Метод поштучного просмотра наиболее часто и широко используется при анализе образцов плодов, посадочного материала, различных семян, зерна, крупы и других подобных материалов. Для разработки и перемещения семян пользуются шпателем или скальпелем.

Метод просеивания семян. Для выявления вредителей в образце этим методом семена просеивают через набор почвенных сит: в верхних фракциях остаются различные насекомые – более крупные, чем семена, в среднюю фракцию попадают мелкие насекомые, а в самую нижнюю – экскременты, отдельные части насекомых, а также клещи.

Метод флотации может быть применен для облегчения анализа образцов семян злаковых, зернобобовых культур, орехов, косточек плодовых и др. Метод основан на том, что в чистой воде или растворе соли всплывают неполноценные семена, поврежденные и зараженные вредителями. Флотация облегчает обнаружение вредителей, развивающихся скрытно, таких как: зерновки, долгоносики, ложнокороеды, толстоножки, семяеды, зерновая моль.

Метод рентгенографии хорошо выявляет скрытую зараженность семян вредителями. Рентгенографирование семян во многих пограничных карантинных лабораториях нашей страны проводится с помощью рентгеновских аппаратов, работающих в мягких диапазонах и не дающих гамма-излучений.

Макролюминесцентный метод применяется для быстрого выявления зараженности некоторыми вредителями семян, черенков и саженцев. Особенно эффективен этот метод при анализе больших образцов семян зернобобовых (нут, маш, соя, фасоль и др.), в которых возможна слабая зараженность карантинными и некоторыми другими видами зерновок, например, китайской (Callosobruchus chinensis L.), четырехпятнистой (C. maculatus F.) и другими видами этого рода. Приклеенные к поверхности семян яйца названных вредителей ярко люминесцируют в фильтрованных ультрафиолетовых лучах и вследствие этого легко обнаруживаются даже при слабой степени заражения.

Биологический метод. Часто при досмотрах грузов, лабораторной экспертизе и обследованиях находят вредителей в предимагинальных (невзрослых) стадиях развития, по внешним признакам которых невозможно точно установить их вид (имеющиеся определители насекомых большей частью позволяют установить виды лишь по взрослой стадии), поэтому, если найдены яйцекладки, живые личинки или куколки вредителя, их приходится доводить до стадии, поддающейся определению. Такая необходимость возникает, например, если обнаружены яйцекладка какого-либо мучнистого червеца, неизвестная специалисту гусеница в побеге, плоде или клубне, яйца, личинки или куколки какого-то вида зерновки, личинки или пупарии мухи в плоде или среди плодов.

Микроскопирование применяют при диагностике близких видов, для чего изготавливают микропрепараты (хетотаксия гусениц плодожорок, гениталии самцов, форма мандибул и т.д.).

ПЦР-анализ – анализ полицепной реакции исследования ДНК, применяют для быстрого и точного определения карантинных организмов (при определении близких видов, которые можно отличить лишь по ДНК: непарные шелкопряды европейской и азиатской расы, золотистая и бледная картофельные нематоды).

Правила и требования проведения энтомологической экспертизы.

1. Недопустима зараженность импортного семенного материала вредителями запасов, хотя бы и широко распространенными, а также зараженность посадочного материала и живых растений некарантинными видами вредителей, и в первую очередь, кокцидами, белокрылками и клещами.

2. Необходимо учитывать возможность нахождения карантинных видов насекомых не только на тех растительных материалах, где они обычно развиваются, но и среди им несвойственных. Необходимо также учитывать время года и климатические условия, отчего может зависеть фитосанитарное состояние импортируемых материалов.

3. На экспертизу в карантинные лаборатории поступает главным образом материал, нуждающийся в тщательном лабораторном анализе для установления его фитосанитарного состояния, а именно: саженцы, черенки, подземные части растений, образцы семян для обмена, селекционной и исследовательской работы.

4. Карантинный досмотр остальных материалов осуществляет карантинная инспекция в пунктах поступления на территорию страны-импортера; при обнаружении признаков заражения или подозрительных симптомов, пробы, взятые инспекторами, направляют для лабораторного анализа.

5. Образцы (посылки), поступающие в карантинную лабораторию на экспертизу, должны быть зарегистрированы в специальном журнале регистрации.

6. Предварительное ознакомление с сопровождающими материал карантинными документами позволяет предположить возможный состав вредных насекомых.

7. Вскрытие посылок и первичный досмотр их проводится инспектором-энтомологом при соблюдении всех мер предосторожности против возможного расползания и разлета вредителей, находящихся в активном состоянии.

8. В случае обнаружения большого количества насекомых в активном состоянии, материал посылки быстро накрывают стеклянным колпаком или завертывают в хлорвиниловую пленку. После этого материал подвергают 5–10-минутному действию замаривающих веществ, а затем продолжают экспертизу.

9. Помещение, где вскрывают отправления, должно быть снабжено приспособлениями против случайного расползания и разлета вредителей из него. Следует также соблюдать необходимые меры предосторожности против разноса насекомых на одежде работающих.

10. В лаборатории следует соблюдать следующие правила:

а) не оставлять без присмотра распакованный материал;

б) начатую экспертизу образца не следует прерывать или оставлять незаконченной;

в) не следует вскрывать одновременно несколько посылок.

11. После наружного осмотра и сбора обнаруженных при этом насекомых проводят детальную экспертизу, методы которой должны соответствовать характеру анализируемых материалов.

12. Поступивший в лабораторию растительный материал должен, по возможности, пройти экспертизу в день поступления и за короткий срок, но при соблюдении необходимой тщательности экспертизы.

13. Если необходимо отложить анализ на следующий день, невскрытый материал хранят в специальном шкафу, а тюки или ящики с живыми растениями – в прохладном и достаточно влажном месте.

14. При анализе недопустимо смешение отдельных экземпляров или частей растений из разных мешочков или пакетов даже одного отправления.

15. Экспертизу необходимо проводить при хорошем освещении, на достаточно широком рабочем столе, при наличии приспособлений для размещения инструментов, посуды и подсобных материалов.

16. Оптический инструментарий включает: ручные лупы (увеличение 6–20), налобные бинокулярные и часовые лупы, бинокуляры, биологические и стереоскопические микроскопы.

17. После окончания работы столы и полы очищают от всех растительных и упаковочных остатков и мусора, которые собирают и сжигают. Поверхность стола, клеенку или настольное стекло дезинфицируют 96%-ным спиртом.

18. Насекомых, собранных при анализе каждого отдельного образца, помещают в отдельную посуду (пробирку или чашку Петри) вместе с образцами поврежденного материала, отделив его от насекомых ватной пробкой. Ватные тампоны не должны выступать за края пробирок. Необходимо очень осторожно обращаться с мелкими и ломкими либо особо ценными особями. Не следует помещать бабочек вместе с гусеницами и куколками, так как определение последних могут затруднить осыпавшиеся с бабочек чешуйки. Гусениц и куколок лучше помещать в отдельную посуду или разделять их и бабочек ватным тампоном. Если живых личинок и куколок не оставляют для воспитания и вывода из них имаго, то перед помещением в посуду их предварительно фиксируют соответствующими веществами.

19. На каждый вид обнаруженных насекомых заполняют этикетку и немедленно вкладывают внутрь каждой пробирки. Заполнение этикетки проводят в следующем порядке:

а) номер протокола экспертизы и дата его проведения;

б) название страны происхождения данного материала;

в) место обнаружения (город, место нахождения пункта);

г) стадия обнаружения объекта и растительный подкарантинный материал;

д) фамилия инспектора, проводившего экспертизу.

При определении родового и видового названия обнаруженного объекта заполняется вторая этикетка (образец заполнения приводится ниже), которая вкладывается в ту же пробирку:

а) номер протокола экспертизы и под ним дата его проведения;

б) латинские родовое и видовое названия объекта, сокращенную фамилию автора вида, если объект не определен до вида, то после родового названия пишут «sp.» (вид не определен), а в некоторых случаях указывают количество найденных экземпляров;

в) латинское или русское название растения, в (или на) котором найден объект, или название поврежденного продукта;

г) указывают часть растения, где обнаружено повреждение вредителем или поражение болезнью;

д) название страны происхождения данного материала, как и когда он прибыл, кому адресован;

е) фамилия инспектора, проводившего досмотр, номер этикетки и дата досмотра, а также фамилия специалиста, проводившего экспертизу и определившего данный объект.

Все этикетки заполняются в двух экземплярах. Первый экземпляр находится в пробирках с обнаруженным объектом, второй хранится у старшего специалиста (карантинной лаборатории) и является рабочим документом для составления отчетных сводок и наведения справок.