Лабораторное занятие 1 – Знакомство с культуральной лабораторией и оборудованием

Задание 1 - Ознакомиться с лабораторией и оборудованием, применяемым для работы с культурой ткани

Пояснение к заданию:

Все операции по микроразмножению растений должны проводится в стерильных условиях. С учетом этого основного требования в лабораториях, где происходит изолирование, выращивание и пассирование культур тканей растений необходимо иметь:

1 Моечную для мытья, стерилизации посуды и оборудования, снабженную водопроводом и канализацией.

2 Место для приготовления, стерилизации питательных сред, ватных пробок.

3 Стерильную комнату (комнату-бокс), где изолируется, стерилизуется и пересаживается на питательную среду размножаемая ткань.

4 Культуральную комнату для выращивания культур.

5 Место и оборудование для биохимического анализа материала.

6 Набор химикатов для составления питательных сред, подсобное помещение для их хранения.

7 Автоклавы, сушильные шкафы, дистилляторы, холодильные камеры, термостаты, вытяжные шкафы, технические и аналитические весы, рН-метры, водяные бани, искусственное (дополнительное) освещение, климатические камеры, набор культуральной посуды и инструментов.

При работе с культурой тканей применяются:

1. Посуда для приготовления и хранения питательных сред

(рисунок 1.1)

• бутыли на 20, 10 и 5 л с нижним тубусом и без него;

• колбы Эрленмейера на 5,3,2,1, 0,5 л и 350 мл;

• колбы плоскодонные на 5,3,2 л;

• колбы мерные на 3,2,1, 0,5 л и 250, 100, 50, 25 мл;

• цилиндры мерные на 2,1, 0,5 л и 250, 100, 50, 25, 10 мл;

• мерные стаканы;

• лабораторные химические стаканы;

• воронки;

• пипетки Мора на 15,10,5,2,1 мл

Рисунок 1.1 - Посуда для приготовления и хранения питательных сред

Рисунок 1.2 - Посуда, используемая при пересадках тканей

2 Посуда, используемая при пересадках ткани (рисунок 1.2)

• чашки Петри низкие диаметром 10 см;

• стаканы с крышкой на 1 л;

• склянки на 1 и 0,5 л;

• пипетки и капельницы;

• предметные и покровные стекла

3 Посуда для выращивания изолированных тканей

• бутыли на 20 и 10 л для глубинного культивирования тканей и клеточных суспензий;

• колбы Эрленмейера широкогорлые на 3 и 1 л, 750, 500 и 150 мл;

• пробирки биологические размером 23х200 мм, 23х150, 40х150 мм;

• специальные сосуды с боковым тубусом для выращивания тканей и клеточных суспензий на роллере;

• чашки Петри высокие диаметром 10 см;

• бюксы;

• стекла предметные без ямки и с ямкой;

• стекла покровные тонкие 24х24 мм

4 Инструменты для вычленения и пересадки ткани (рисунок 1.3)

• ланцеты анатомические, брюшные, глазные;

• пинцеты анатомические, глазные, длинные пинцеты с тонкими концами;

• ножницы, бритвы, скальпели, пробкобуры разного диаметра;

• иглы анатомические (Бутенко, 1964).

Рисунок 1.3 - Инструменты для вычленения и пересадки тканей

Техника безопасности при работе с инструментами:

1. Для вычленения и пересадки тканей острые режущие предметы применять только для изготовления срезов;

2. Бритвы, скальпели, ножи необходимо своевременно точить и править;

3. Режущие инструменты не оставлять на столе в открытом виде;

4. Срезы с инструментов снимать так, чтобы не касаться твердым предметом лезвия;

5. После работы инструменты тщательно очищать, мыть и стерилизовать.

Порядок выполнения работы: