Определение коли-титра, перфрингенс-титра и титра термофильных бактерий почвы.

Различные разведения почвенной суспензии засевают по 1 мл в пробирки со средой Кесслера и инкубируют при 43°С в течение 48 ч. В дальнейшем анализ проводят по схеме, применяемой при определении коли-титра воды.

Для определения перфрингенс-титра различные разведения почвенной суспензии по 1 мл засевают в пробирки со стерильным обезжиренным молоком или железосульфитной средой Вильсона—Блера, приготовленный ex tempore. Посевы инкубируют при 43°С в течение 24-48 ч, после чего учитывают результата по свертыванию молока или по образованию черных колоний CL perfringens в агаровом столбике среды Вильсона—Блера. Из колоний делают мазки, окрашивают по Граму, микроскопируют и вычисляют перфрингенс-титр.

Состав сред. Среда Кесслера: 1% пептонная вода, 5% желчи, 0,25% лактозы, генциановый фиолетовый для подавления роста грамположительных бактерий. Железосульфитная среда Вильсона — Блера: 3% питательный агар, 1% глюкозы, 2% сульфита натрия, 0,08% хлорида железа.

Для определения титра термофильных бактерий разведения почвенной суспензии по 1 мл вносят в чашки Петри, заливают расплавленным и охлажденным питательным агаром. Посевы инкубируют в течение суток при 60°С, а затем подсчитывают количество выросших колоний и делают пересчет на 1 г почвы.

Санитарно-микробиологическую оценку почвы производят по комплексу показателей, из которых наиболее важным является установление степени фекального загрязнения.

Определение фекального загрязнения предметов обихода (инвентарь, оборудование, мебель, посуда, игрушки н др.) и рук персонала.

Стерильным ватным тампоном, увлажненным изотоническим раствором хлорида натрия, делают смыв с исследуемого предмета. Тампон помещают в среду Кесслера или втирают в поверхность среды Эндо. Посевы на плотных средах инкубируют при 37°С, на жидких средах — при 43°С. Для исследования гладких поверхностей и тканей используют также специальные трафареты, представляющие собой металлические формы в виде усеченного конуса, в которые наливают расплавленную и охлажденную до 45--48°С среду Эндо (двойной концентрации) или питательный агар. После застывания и затвердения агаровый гель стряхивают в стерильную чашку Петри и инкубируют при 37°С в течение суток. Выросшие колонии подсчитывают и идентифицируют по схеме. Зная площадь агарового геля, определяют число колоний на 1 СМ².

Санитарно-бактериологическое исследование молока и Молочных продуктов.

О санитарно-бактериологическом состоянии молока и молочных продуктов судят по микробному числу и коли-титру. Для определения микробного числа пастеризованное молоко разводят стерильным изотоническим раствором хлорида натрия (1:10, 1:100, 1:1000) и 1 мл каждого разведения выливают на дно стерильной чашки Петри, которую затем заливают расплавленным и остуженным агаром. Посевы инкубируют при 37°С в течение суток, после чего подсчитывают количество выросших колоний.

Для определения коли-титра цельное пастеризованное молоко засевают в шесть пробирок со средой Кесслера: в три пробирки вносят по 1 мл молока, а в остальные три—по 0,1 мл (1 мл молока, разведенного в 10 раз стерильной водой). Посевы инкубируют при 43°С в течение, суток, после чего из забродивших проб делают посевы на среду Эндо и инкубируют при 37°С. Из выросших колоний красного цвета готовят мазки, окрашивают по Граму, микроскопируют и делают посев на среду Козера, а также в пептонную воду с 1% глюкозы. Пробирки с посевами на среде Козера инкубируют при 37°С, а на среде с глюкозой —при 43° С в течение суток. При оценке результатов учитываются бактерии, вызывающие брожение глюкозы с образованием кислоты и газа, но не дающие роста на цитратной среде Козера.

Состав среды Козера: дистиллированная вода, 0,15% фосфата натрия-аммония, 0,1% фосфата калия однозамещенного, 0,0*2% сульфата магния, 0,25% цитрата натрия.

Аналогичным образом исследуют сливки, молочнокислые продукты, мороженое.

Для обнаружения в молоке патогенных бактерий делают посевы на соответствующие элективные и дифференциально-диагностические среды с последующим выделением чистых культур и их идентификацией.