- •Алгоритмы действий студентов при выполнении практических заданий пм 05: Проведение лабораторных гистологических исследований
- •Подготовка посуды и предметных стекол к работе
- •«Приготовление фиксаторов»
- •«Фиксация материала»
- •3 Этап – заливка в парафин (вариант ):
- •«Промывание материала для удаления фиксатора (формалина)»
- •«Обезвоживание, уплотнение и заливка материала в парафин»
- •1 Этап – обезвоживание:
- •2 Этап – уплотнение:
- •3 Этап – заливка в парафин (вариант 1):
- •6. «Приготовление спиртов различной концентрации» Приготовление абсолютного спирта
- •7. «Разведение спиртов»
- •8. «Приготовление гистологических срезов»
- •9. «Устранение артефактов приготовления гистологических срезов»
- •10. «Уход за микротомом и микротомными ножами»
- •11. «Монтировка срезов на стекло»
- •12. «Приготовление адгезивной среды»
- •13.«Депарафинирование гистологических срезов (подготовка срезов к окраске)»
- •14. «Приготовление красящих растворов» Приготовление раствора гематоксилина
- •Приготовление 1% раствора эозина
- •15. «Окраска гистологических препаратов»
- •16. «Обезвоживание и просветление препаратов »
- •17. «Заключение препаратов»
- •18. «Обработка материала при срочной операционной биопсии»
- •19. «Микроскопирование препаратов»
- •1 Этап – настройка освещения микроскопа
- •2 Этап – микроскопирование препаратов
12. «Приготовление адгезивной среды»
Вариант 1. Приготовление смеси белка с глицерином
Оснащение: химический стакан, бюкс с притертой крышкой, воронка, фильтровальная бумага
Реактивы: яичный белок, глицерин, тимол
Алгоритм действий:
Отделить яичный белок от желтка и поместить его в химический стакан
Взбить яичный белок
Профильтровать белок через крупнопористый фильтр, смоченный дистиллированной водой
Добавить равный объем глицерина и несколько кристаллов тимола
Перемешать
Хранить в холодильнике несколько месяцев
Вариант 2. Приготовление адгезивной смеси на основе сыворотки
Оснащение: бюкс с притертой крышкой, пипетки, мерный цилиндр
Реактивы: сыворотка крови, дистиллированная вода, 5% раствор формалина
Алгоритм действий:
В приготовленную емкость последовательно отмерить и добавить:
15 мл сыворотки
5 мл дистиллированной воды
6 мл 5% раствора формалина
Перемешать
Хранить в холодильнике
13.«Депарафинирование гистологических срезов (подготовка срезов к окраске)»
Оснащение: вытяжной шкаф, высокие бюксы спритертой крышкой, термостат, фильтровальная бумага, коробка для хранения стекол.
Реактивы: ксилол, спирты различной концентрации (70%-100%), дистиллированная вода
Алгоритм действий:
Поместить срезы в раствор КсилолаI на 3-5 мин можно в термостате при 37° С
Перенести срезы в раствор КсилолаПна 3-5 мин
Перенести срезы в раствор 100%Спирта
Перенести срезы в раствор 96% Спирта 1-2 по 1-2 мин в каждом растворе
Перенести срезы в раствор 70%Спирта
Промыть срезы в дистиллированной воде
Фильтровальной бумагой удалить остатки воды со стекол
Сложить стекла в коробку
14. «Приготовление красящих растворов» Приготовление раствора гематоксилина
Вариант 1. Приготовление гематоксилина Эрлиха
Оснащение: весы, шпатель, мерные колбы, стеклянная палочка
Реактивы: гематоксилин, калийные квасцы, глицерин, ледяная уксусная кислота, 96% спирт, дистиллированная вода
Алгоритм действий:
Приготовить навеску гематоксилина (2 г)
Приготовить навеску калийных квасцов (3 г)
Налить в колбу 100 мл 96% спирта и растворить в нем 2г гематоксилина
Налить в колбу 100 мл дистиллированной воды и растворить в ней3 г калийных квасцов
Смешать оба раствора
Добавить 100 мл глицерина
Влить 10 мл ледяной уксусной кислоты
Накрыть сосуд марлевой салфеткой и оставить на свету не менее чем на 15 дней для окисления гематоксилина в гематеин.
Вариант 2. Приготовление кислого гематоксилина Майера (водный раствор)
Оснащение: мерная колба на 1 л, весы, шпатель
Реактивы: гематоксилин кристаллический, алюмоаммонийные квасцы, дистиллированная вода, йодат натрия, хлоралгидрат, лимонная кислота
Алгоритм действий:
Налить в колбу 1000 мл дистиллированной воды
Приготовить навеску из 50 г алюмоаммиачных квасцов
Растворить квасцы в дистиллированной воде
Приготовить навески гематоксилина кристаллического (1 г), йодата натрия (200 мг), лимонной кислоты (1 г)
Последовательно добавить приготовленные навески к раствору квасцов
Приготовить навеску хлоралгидрата
Добавить хлоралгидрат к приготовленному раствору.
Перемешать
Профильтровать. Раствор готов к применению
