17. «Заключение препаратов»

Оснащение: планшет для стекол, препаровальная игла, покровные стекла, бумажные салфетки, стеклянная палочка

Реактивы: среда для заключения*

Алгоритм действий:

• Извлечь стекло со срезом из ксилола

• Удалить салфеткой остатки ксилола по краям стекла и с обратной стороны

• Положить стекло на планшет

Нанести каплю среды для заключения на край среза
Поставить у края капли покровное стекло под углом 45°, при этом заключающая среда должна растечься по краю покровного стекла Придерживая препаровальной иглой свободный край покровного стекла, медленно опустить его на срез
Оставить стекла в горизонтальном положении до полного высыхания заключающей среды

_____________________________________________________________________________

* В качестве монтирующих сред для заключения гистологических препаратов можно использовать готовые водорастворимые (а) и водонерастворимые (б, в) смеси акриловых смол или приготовить самостоятельно бальзам (пихтовый,канадский) и полистирол (см. тему «Приготовление оптически прозрачных сред для заключения препаратов»).

А Б В

«Приготовление оптически прозрачных сред для заключения препаратов»

Вариант 1 .Приготовление бальзама

Оснащение: банка с широким горлом и притертой крышкой, термостат, стеклянная палочка

Реактивы: сухой бальзам(пихтовый, канадский), ксилол

Алгоритм действий:

• Кусочки сухого бальзама поместить на дно банки

• Залить бальзам ксилолом

• Поставить банку в термостат при температуре 37-40°С.

• Слить в другую банку,растворившуюся до консистенции жидкого меда, часть ксилола.

• Долить в первую банку новую порцию ксилола

• Хранить приготовленный бальзам в плотно закрытой посуде.

Вариант 2 .Приготовление полистирола

Оснащение: банка с широким горлом, термостат, весы, мерная колба, мерная пипетка, стеклянная палочка

Реактивы: полистирол, ксилол, дибутилфталат

Алгоритм действий:

• Приготовить навеску из 100 г полистирола

• Поместить полистирол в банку с широким горлом

• Отмерить и налить в банку 100 мл ксилола

• Добавить 12 мл дибутилфталата

• Поместить в термостат при температуре 37°С на несколько часов, периодически помешивать

• Готовую смолу хранить в плотно закрытой посуде.

18. «Обработка материала при срочной операционной биопсии»

Оснащение: пробирка, спиртовка, замораживающий микротом (или криостат), препаровальная игла или кисточка, предметные стекла, емкости для окраски препаратов

Реактивы: 10% нейтральный формалин, 96% спирт, раствор гематоксилина, 1% водный раствор эозина, среда для заключения

Алгоритм действий:

• Кусочек материала поместить в пробирку и залить небольшим количеством 10% нейтрального формалина

• Пробирку 2-3 раза нагреть над спиртовкой до появления пара и пузырьков

• Промыть материал в течение 2 мин в проточной воде

• Сделать срезы на замораживающем микротоме (криостате)

• Монтировать срезы на стекло

• Перенести срезы на несколько секунд в 96% спирт

• Ополоснуть дистиллированной водой

• Окрасить гематоксилином и эозином

• Провести обезвоживание и заключение препарата