Билет №2

1. Спорообразование у бактерий. Стадии, функциональное значение.

Споры— особая форма покоящихся клеток со сведённой к нулю метаболической активностью. Они резистентны к нагреванию, радиации, высыханию и воздействию химических веществ. Благодаря этим свойствам, споры могут длительно сохраняться и обеспечивать сохранение вида в неблагоприятных условиях.

1. Подготовительная стадия споруляции сопровождается прекращением деления и увеличением количества липидных включений.

2. Стадия предспоры споруляции обычно начинается бурно. В клетке появляется эллиптическая оболочка, окружающая участок цитоплазмы с изменёнными плотностью и тинкториальными свойствами. Подобное образование обозначают терминами «предспора», или «примордиальная спора».

3. Третья стадия споруляции включает появление оболочки (обычно в течение 10 мин после образования предспоры) и ещё большее увеличение коэффициента светопреломления.

4. Стадия созревания споры сопровождается её уплотнением и снижением метаболической активности клетки.

Каждая бактерильная клетка может образовывать только одну спору. У бацилл диаметр споры не превышает диаметра клетки (возбудитель сибирской язвы), у клостридий диаметр споры превышает диаметр клетки, что придает им форму теннисной ракетки или барабанной палочки (возбудитель столбняка, газовой гангрены, ботулизма). Оболочка споры 2-ухслойная, пространство между слоями заполнено гликопептидными полимерами, сходными с пептидогликаном, образующими сетчатую структуру. Проявляет чувствительность к лизоциму. Внутренний слой образован пептидогликанами, а внешний слой образуют кератиноподобные белковые структуры с низкой проницаемостью. Окрашивается по методу Циля-Нильсена в красный цвет. Высокая резистентность спор связана с содержанием Са-соли дипиколиновой кислоты в их оболочке.

2. Окраска по Цилю-Нильсену и ее этапы.

1)На фиксированный мазок нанести карболовый раствор фуксина, нагреть 3-5 мин до появления паров

2)Промыть водой

3)Нанести 5%р-р серной кислоты на 1-2 мин для обесцвечивания

4)Промыть водой

5)Докрасить мазок водным раствором метиленового синего в течение 3-5 мин.

6)Промыть водой , высушить, микроскопировать

В основе метода лежит разрыхление клеточной стенки бактерий для усиления поглащения красителя и избирательное обесцвечивание под действием кислоты. Кислотоустойчивость бактерий обусловлена особым строением их клеточной стенки с повышенным содержанием липидов : разветвленные жирные кислоты (миколовые кислоты), глико- и фосфолипиды, воски. Кислотоустойчивые бактерии окрашиваются в красный цвет, а некислотоустойчивые обесцвечиваются и в дальнейшем окрашиваются метиленовым синим в синий.

3. Вирусы, вироиды, прионы, особенности структуры, отличительные свойства. Вызываемые заболевания.

Вирусы –относится к царству Virae. Мельчайшие микроорганизмы, не имеющие клеточного строения, содержащие только один тип нуклеиновый кислоты (ДНК или РНК). Облигатные внутриклеточные паразиты, репродуцирующиеся только в живых клетках организма хозяина. Способ размножения разобщенный (дизъюнктивная репродукция): отдельные структуры вируса синтезируются в разных частях клетки. Капсид – белковая оболочка, в которую упакована геномная нуклеиновая кислота. Капсид состоит из субъединиц – капсомеров, которые могут быть уложены по кубическому или спиральному типу. Капсид и нуклеиновая кислота образуют нуклеокапсид. Некоторые вирусы имеют дополнительную оболочку – суперкапсид (фрагмент клеточной мембраны - двойной слой липидов + специфичные вирусные белки). Вирусы, не имеющий суперкапсида, называются «голыми», имеющие суперкапсид – «одетыми». Вызывают различные заболевания: ДНК-содержащие(герпес, гепатит В, натуральную оспу, ветряную оспу, опоясывающий лишай и др.), РНК-содержащие(грипп, бешенство, ВИЧ, клещевой энцефалит, гепатит А, гепатит Е).

Вироиды – инфекционные молекулы кольцевой РНК, близкие внехромосомным генетическим элементам бактерий(плазмидам) , не содержащие белка, вызывающие заболевания растений. Прионы – белковые инфекционные агенты, вызывающие летальные неврологические заболевания (губчатые энцефалопатии) куру, болезнь Крейтцфельдта-Якоба, фатальная семейная бессонница. Прионы устойчивы к инактивации факторами, влияющими на нуклеиновые кислоты. Белок приона кодируется генами организма хозяина, которые содержатся в репрессированном состоянии в каждой клетке. Накапливаются прионы в клетках могут только после депрессии генов изоформами приона, попавшего в организм извне.

Задача.

При микроскопии мазков из зев, больного с тяжелой некротической ангиной, обнаружены палочки, располагающиеся под углом друг к другу, с утолщениями на концах. Какие это могут быть микроорганизмы? Какие дополнительные методы окраски нужно провести для уточнения морфологии данных бактерий?

Corynebacterium diphtheriae, возбудитель дифтерии(острая инфекция, характеризующаяся фиброзным воспалением в зеве, гортани, реже – в других органах) .

Необходима окраска по Нейссеру, позволяющая выявить зёрна волютина, характерные для данной бактерии.