Краска состоит из смеси:

азура, эозина, метиленового синего (перед окраской ее растворяют в дистиллированной воде 1:10.

1. Готовят мазок.

2. препарат фиксируют метиловым или этиловым спиртом.

3. Окрашивают препарат 30-40 минут.

4. Промыть водой, высушить и микроскопировать.

Ядра простейших в ярко-розовый.

С помощью данного вида окраски изучают морфологию спирохет . Борелии (возбудители возвратного тифа) окрашиваются в фиолетовый, трепонемы – в бледно розовый, лептоспиры – в розово-сиреневатый. Обнаруживают вирусы ( тельца Бабеша –Негри) и идентифицируют простейших.

3. Простейшие. Классификация. Морфологические особенности. Вызываемые заболевания.

Снаружи покрыты ригидной мембраной пелликулой, снаружи которой располагается эктоплазма. В эндоплазме содержатся все клеточны структуры, чаще содержат одно ядро (герардии содержат 2 ядра). Некоторые виды могут содержать опорные фибриллы и даже минеральный скелет. Некоторые простейшие в неблагоприятных условиях способны образовывать цисты ( жизненные процессы резко замедляются, теряют органеллы, покрываются толстой и прочной оболочкой). Классификация основана на способах движения. Царство Animalia, подцарство Protozoa. Виды, патогенные для человека относятся к 3-м типам Sarcomastigophora, Apicomplexa, Ciliophora. Тип Sarcomastigophora включает 2 подтипа Sarcodina( амебы, передвигающиеся за счет выростов цитоплазмы – ложноножек-псевдоподий, размножаются делением, способны образовывать цисты, патогенна Entamoeba histolytica(дизентерийная амеба), поражающая кишечник) и Mastigophora( характерно наличие одного или нескольких жгутиков, принципиальное отличие жгутиков простейших от жгутиков бактерий – наличие кинетопласта(особая органелла, расположенная у основания жгутика и вырабатывающая энергию для движения), у некоторых видов движение обеспечивается ундулирующей мембраной( тонкая перепонка, продольно соединяющая жгутик с телом); патогенны 4 рода: трихомонады, гиардии, лейшмании, трипаносомы.

Тип Ciliophora включает ресничные инфузории, имеющий реснички, с помощью которых они передвигаются, размножаются путем деления, но могут и с помощью конъюгации, способны образовывать цисты, патогенное значение имеет Balantidium coli. Тип Apicomplexa составляет лишь паразитические виды. Своим названием обязаны способности образовывать скопления клеток, защищенных общей плотной оболочкой. Включает классы: споровики, Coccidia, Piroplasma.

Споровики – малярийный плазмодий ( малярия), токсоплазма (токсоплазмоз)

Саркодовые – дизентерийная амеба(амебиаз) Жгутиковые – трихомонада(трихомоноз), гиардии ( гиардиоз(лямблиоз)), лейшмания(лейшманиоз), трипаносома (трипаносомоз).

Инфузории – балантидиоз.

Амебиаз - инфекционная болезнь, вызываемая Entamoeba histolytica, сопровождающаяся язвенным поражением толстой кишки; возможно образование абсцессов в различных органах; протекает хронически.

Возбудитель существует в двух стадиях развития: вегетативной и цистной. Вегетативная стадия имеет несколько форм (тканевая, большая вегетативная, просветная и предцистная). Циста (покоящаяся стадия) имеет овальную форму; образуется из вегетативных форм в кишечнике. Просветная форма малоподвижна, обитает в просвете толстой кишки как безвредный комменсал, но в определенных условиях становится патогенной и превращается в тканевую форму. Тканевая форма обладает подвижностью за счет формирования псевдоподий. Она может обнаруживаться в свежевыделенных фекалиях человека, проникает в стенку толстой кишки, вызывает язвенные процессы, способна фагоцитировать эритроциты.

Токсоплазмоз - зоонозная инфекция с фекально-оральным механизмом передачи возбудителя. Характеризуется полиморфной клинической картиной (поражением нервной системы, увеличением печени и селезенки, поражением скелетных мышц и миокарда) и хроническим течением. 

Возбудитель токсоплазмоза - Toxoplasma gondii - простейшее из класса Sporozoea, облигатный внутриклеточный паразит, морфологически напоминающий вытянутую дольку апельсина, длиной 4-7 мкм. Деление внутри пораженных клеток приводит к образованию псевдоцист (скопление токсоплазм), а после полового размножения (в организме кошачьих) возникают истинные цисты - ооцисты, окруженные плотной оболочкой.

Малярия - острая или хроническая эндемическая трансмиссивная болезнь, характеризующаяся приступами лихорадки, увеличением печени и селезенки, гемолитической анемией, рецидивирующим течением.

Заболевание у людей вызывают 4 вида малярийных плазмодиев:

1. Plasmodium vivax - возбудитель трехдневной формы малярии;

2. Plasmodium ovale - вызывает трехдневный овале-малярии;

3. Plasmodium malariae - возбудитель четырехдневной формы малярии;

4. Plasmodium falciparum - вызывает тропическую малярию.

В процессе своей жизнедеятельности плазмодии проходят сложный цикл развития со сменой хозяина. Он состоит из двух фаз: половой (спорогонии), которая проходит в теле самки комара, и бесполой (шизогонии), что происходит в организме человека. Сначала плазмодии проникают в клетки печени (тканевая шизогония), позже - в эритроциты (эритроцитарная шизогония).

Тело малярийного паразита состоит из цитоплазмы и ядра. Некоторые стадии паразитов содержат пигмент, который окраски не воспринимает, а имеет свой естественный цвет: темно-бурый, золотисто-желтый, коричневый, почти черный (разный у разных видов паразитов).

Задача.

В материале больного с подозрением на сифилис были обнаружены мелкие, извитые, подвижные формы бактерий, напоминающие спираль. Какие это могут быть бактерии? Как был приготовлен препарат для определения подвижности бактерий и с какой целью проводится изучение подвижности? При использовании какой системы светового микроскопа изучается подвижность микроорганизмов?

Ответ : Спирохеты. Подвижность определяют методом раздавленной капли или методом висячей капли. Подвижность – важный диагностический признак, позволяет дифференцировать возбудителей. С помощью темнопольной микроскопии и фазовоконтрастной.