Подсчет лейкоцитарной формулы.

Цель работы: Ознакомление с методикой подсчета лейкоцитарной формулы.

Методика: Приготовленный заранее, окрашенный по способу Романовского-Гимза мазок крови поместить на столик микроскопа, нанеся на него предварительно каплю иммерсионного масла. Иммерсионный объектив (90) опустить в каплю масла. Гранулоциты располагаются по краям мазка, лимфоциты - несколько дальше от края. Поэтому счет лейкоцитов производится по краям мазка, вдоль длинных ребер препарата, в начальной части мазка и ближе к концу. Установить вид каждого лейкоцита и записать в заранее заготовленную таблицу гемограммы (или нажать на клавишу счетной машинки с соответствующим названием вида лейкоцита). Сосчитать ровно 100 клеток из общего числа лейкоцитов, тогда найденное количество лейкоцитов каждого вида будет соответствовать их процентному содержанию в крови.

Лейкоцитарная формула крови человека в норме.

ГРАНУЛОЦИТЫ						АГРАНУЛОЦИТЫ
Базофильные	Эозинофильные	Нейтрофильные				Лимфоциты		Моноциты
		метамиелоциты	палочкоядерные	сегментоядерные
0-1%	0,5-5%	0-1	1-5%	47-72%	20-40%		2-10%

Оформить результаты работы и выводы.

Практическая работа №12.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОЛИЧЕСТВА ГЕМОГЛОБИНА В КРОВИ.

Цель работы: Знакомство с методикой определения количества гемоглобина.

Методика: Определение количества гемоглобина производится колориметрическим способом.

Гемометр Сали имеет 3 пробирки одинакового диаметра, из которых две крайние запаяны и содержат стандартные растворы хлорида гематина, а средняя - лабораторная. В лабораторную пробирку налить 0,1 № раствора соляной кислоты до первой нижней отметки, затем пипеткой от гемометра Сали набирать 0,02 мл приготовленной крови и внести в эту же пробирку . Гемоглобин крови под действием 0,1 N раствора соляной кислоты превращается в хлорид гематина бурого цвета. По истечении 5-6 минут к полученному раствору по каплям прибавлять дистиллированную воду до тех пор, пока цвет исследуемого раствора не сравняется с цветом стандартов. Каждый раз после добавления воды перемешивать содержимое пробирки стеклянной палочкой. Цвет жидкости стандартов сравнивают при дневном освещении в проходящем свете, держа в вытянутой руке на уровне глаз. Определяют, какому делению шкалы соответствует нижний мениск жидкости (цена деления шкалы равна 0,2 г%). Количество гемоглобина при оформлении в бланке анализа записывают в граммах на 1 л, для чего полученные данные умножают на 10.

Нормальные величины концентрации гемоглобина: у женщин 115 - 145 г/л, у мужчин 132 - 164 г/л.

13. Определение гематокрита

Гематокритом называют выраженное в процентах отношение объема форменных элементов к объему цельной крови.

Существует несколько методик определения гематокрита. Все они основаны на центрифугировании предотвращенной от свертывания крови, набранной в капилляр и измерении столбиков крови и осевших эритроцитов. Настоящий вариант метода определения гематокрита разработан на кафедре нормальной физиологии МГМИ.

Ц е л ь р а б о т ы: освоить методику определения гематокрита и определить его величину в исследуемой крови.

Д л я р а б о т ы н е о б х о д и м ы: гибкая полиэтиленовая трубочка, центрифуга, раствор гепарина в разведении 1:10 в 0,9 % NaCI, инъекционные иглы, шприц, вата, спирт, йод. Объект исследования - человек.

Х о д р а б о т ы Перед забором крови гибкую полиэтиленовую трубочку промыть раствором гепарина. При помощи шприца набрать в трубочку кровь без пузырьков на 2/3 ее длины. Перегнуть трубочку посередине и поместить в узкую пробирку открытыми концами вверх. Центрифугировать 20 минут при 3000 об/мин. После центрифугирования измерить линейкой столбик набранной крови в выпрямленной трубочке и измерить столбик эритроцитов в мм, вычислить процентное соотношение. За 100 % принять длину столбика всей набранной крови, за Х - длину столбика эритроцитов, тогда найденное значение Х % будет соответствовать показателю гематокрита крови. Для перевода гематокрита, выраженного в % в единицы системы СИ полученную величину умножить на 0,01.

В выводе сравнить полученный показатель гематокрита с нормой.