- •Перелік практичних навичок
- •9.Проведення посіву на поживні середовища петлею, шпателем, тампоном.
- •10. Проведення пересіву характерної колонії на косий агар і чистої культури в глибину поживного середовища.
- •16. Виготовлення дез. Розчинів, що застосовуються в мікробіологічній лабораторії.
- •11. Виготовлення бактеріологічної петлі. Вимоги до неї. Підготування посуду до стерилізації, стерилізація посуду.
- •12. Будова печі Пастера. Правила роботи з апаратурою
- •17.Дезінфекція рук і робочого місця, інструментів, піпеток, відпрацьованого матеріалу.
- •19. Виготовлення диференційно-діагностичних середовищ Ендо, Лєвіна.
- •13. Будова парового стерилізатора. Правила роботи з апаратурою. Тести для перевірки якості стерилізації.
- •14. Будова згортувача сироватки. Правила роботи з апаратурою. Техніка механічної стерилізації. Мембранні фільтри, фільтри Зейтца.
- •18. Виготовлення мпа, етапи. Визначення рН виготовленого середовища за допомогою індикаторного папірця.
12. Будова печі Пастера. Правила роботи з апаратурою
Сушильна шафа ( піч Пастера ) - це металева двостінна шафа , покрита зверху азбестом. У верхній стінці є отвори для термометра і вентиляції. Нагріте повітря піднімається знизу між стінками і через верхній отвір потрапляє всередину шафи , де на полицях розміщений матеріал, що стерилізується. Стерилізацію проводять сухим жаром при 150° С протягом 2 год , при 165-170 ° С - 45 хв , при 180 ° С - 15 хв . У печі Пастера стерилізують скляний посуд. Після стерилізації шафу відключають від джерела нагрівання і відкривають тільки після повного охолодження.
Правила роботи: чисто вимиті пробірки і флакони закупорюють ватяними пробками, піпетки, вату, марлю загортають у папір і поміщають на полиці шафи так, щоб предмети не доторкались гарячих стінок приладу і нагріте повітря вільно проходило між ними. Стерилізація в сушильній шафі триває 45 хвилин - 1 годину при t ° 160-170° С, При температурі вище 175 °С папір і вата згорають.
17.Дезінфекція рук і робочого місця, інструментів, піпеток, відпрацьованого матеріалу.
Обробка рук забезпечує видалення або знищення патогенної і умовно-патогенної мікрофлори з метою попередження розповсюдження її через руки персоналу на навколишні об'єкти і обслуговуваних хворих, а також після маніпуляцій, які можуть спричинити забруднення рук персоналу при огляді і лікуванні пацієнтів. Гігієнічну дезінфекцію рук зобов'язаний проводити весь персонал регулярно. Обробка включає звичайне миття рук і використання дезінфікуючих засобів.
19. Виготовлення диференційно-діагностичних середовищ Ендо, Лєвіна.
Ендо: 1 л дистильованої води, прокип'ятити до повного розплавлення агару 2-3 хв, профільтрувати і знову довести до кипіння, остудити до температури 45-50 ° С, розлити в стерильні чашки Петрі шаром 3-4 мм, після застигання підсушити при температурі (37 ± 1) ° С протягом 40-60 хвилин.
Готове поживне середовище необхідно використовувати в день приготування. Зберігати до посіву у темряві.
Лєвіна: Розмішати 37,5 г порошку в 1000 мл дистильованої води. Прокип'ятити для повного розчинення частинок. Стерилізувати автоклавуванням при 121°С протягом 15 хв. Не допускати перегрівання середовища. Охолодити до 50°С і струсити для окислення метиленового синього (щоб відновити його синій колір і розмішати пластівцевий преципітат). Якщо середовище використовується в той же день, його можна не автоклавувати. Попередження: середовище треба зберігати в темряві, щоб не допустити його окислення на світлі.
13. Будова парового стерилізатора. Правила роботи з апаратурою. Тести для перевірки якості стерилізації.
Стерилізація текучим паром проводиться в текучо-паровому стерилізаторі або в автоклаві з відкритим краном. Через 10-15 хв . після включення приладу вода прогрівається, і пар починає виходити з відкритого крана повним струменем. З цього моменту ведеться відлік часу стерилізації , яка триває 30-60 хвилин. Потім вимикають обігрів , відкривають кришку , дають приладу злегка охолодитися і виймають стерилізовані предмети ще гарячими щоб уникнути зайвого зволоження . Апарат звільняють від води і залишають в сухому вигляді. Текучою парою стерилізують такі матеріали, які псуються або розкладаються при стерилізації парою під тиском ( деякі поживні середовища , розчини вуглеводів).
У тих випадках , коли стерилізується об'єкт містить спори , але не може в силу своїх властивостей нагріватися вище t 100 °С, застосовують так звану дробову стерилізацію або тиндалізацію . Метод полягає в тому , що стерилізується об'єкт обробляють в текучепаровом стерилізаторі тричі: 3 дні поспіль по 30 хв . Стерилізуючий ефект при цьому методі досягається тим , що при t ° 100 ° протягом 30 хв . знищуються вегетативні форми бактерій ; залишилися спори проростають і утворилися з них вегетативні форми гинуть при повторному прогріванні. Повний стерилізуючий ефект досягається на третю добу , але лише в тому випадку , якщо середовище , в якій знаходяться спори , і температура , підтримувана в проміжках між прогріванням , забезпечують проростання спор у вегетативні форми. Метод не придатний для стерилізації рідин , які не є поживними субстратами , а також коли не відбувається проростання суперечка в аеробних умовах або коли температурний оптимум в одних видів бактерій значно вище , ніж у інших .
Стерилізація парою - найбільш надійний спосіб стерилізації, при одноразовій обробці матеріалу знищуються не тільки вегетативні форми бактерій , але і їх спори . Стерилізація парою під тиском проводять у спеціальних приладах – автоклавах під тиском до 1 атм. , що відповідає t 119-120 °С. Таким шляхом протягом 15-20 хв. проводять стерилізацію заразного матеріалу , посуду , приладів , особливо мають гумові частини , поживних середовищ , що не містять нативного білку і вуглеводів. Під тиском в 0,7 атм. , що відповідає t 115,5 °С , стерилізують протягом 20 хвилин деякі живильні середовища.
