Анаэробтардың таза дақылын бөлу (зерттеудің 3-4 күндері)

Шаг 1

Үшінші күн. Инкубациядан кейін қанды қантты агарда, пробиркадағы ұзын қантты агарда, темір-сульфитті агарда (Вильсон-Блер ортасы) өскен колонияларды талдау.

Шаг 2

Анаэробқа типті колонияларды Китта-Тароцци ортасына немесе тиогликоль ортасына қайтара себеді (таза дақыл алу).

Шаг 3

Таза дақыл бөлуге қоректік орталарды анаэробтық жағдайда термостатта 37⁰С температурада 24-48 сағат инкубациялау.

Шаг 4

Инкубациядан кейін таза дақылды биохимиялық белгілерін тест-жүйелерде арнайы бактериялық ферменттер немесе метаболиттерін анықтау бойынша немесе классикалық тәсілдермен анықтау.

Шаг 5

Дақылдардың вирулентті факторлар өнімдерін анықтау: бейтараптау реакциясында экзотоксиндердің серологиялық идентификациясы

Шаг 6

Қатал анаэробтық жағдайда микробтың антибиотиктерге сезімталдығын анықтау.

Шаг 7

Соңғы қорытындысы.

Шаг 1

Бактериялық ілмекті жалынның үстінде стерилдеу

Шаг 2

Стерилді бактериялық ілпекпен қанды қантты агарды ортасынан екіге бөледі

Шаг 3

Стерилді бактериалық ілпекпен Китта-Тарроци ортасынан анаэроб дақылын немесе зерттеу материалынан тамшы алынады, оны қоректік ортаның бір жартысына себеді.

Шаг 4

Бактериялық ілмекті жалынның үстінде стерилдеу, аэроб дақылын, мысалы ішек таяқшасын (Escherichia coli) алып және қоректік ортаның екінші жартысына себеді.

Шаг 5

Материалы бар Петри табақшаларын жауып, анаэробтық жағдайда инкубация жасайды: СО₂ инкубаторда, эксикаторда немесе анаэростатта температурасы 37⁰С - 24-48 сағатта.

Шаг 6

Екінші күні. Инкубациядан кейін себінділерді қарайды, анаэробты бактериялар өсу бөлігінде шыққан күдікті колонияларды белгілейді.

Шаг 7

Күдікті колониялардан жағынды-препарат дайындап Грам әдісімен бояйды, микроскоптан қарау

Шаг 8

Қорытынды. Микроскопта ірі спорасы бар грамоң таяқшалар көрінеді

Шаг 1

Пипеткамен немесе дозатормен қоректік орта бетіне микроорганизм қоспасын 0,5 мл көлемде тамызады. Қолданған пипетканы, дозатор наконечнигін дезинфекция ертіндісіне салады.

Шаг 2

Стерилді бактериологиялық шпательмен микроб тамшысын қоректік агар бетіне жайяды. Қолданған шпательді дезинфекция ертіндісіне салады

Шаг3

Сәл ашық Петри табақшаларын 10 мин кептіру.

Шаг 4

Стерилді пинцетпен антибиотик дискілерін микробы бар қоректік орта бетіне салу, егер Петри табақшасы диаметрі 100 мм болса, дискілер 6 аспау керек. Дискілер арасындағы ара-қашықтық 20 мм.

Шаг 5

Термостатта 37ºС температурада 18-24 сағат инкубация жасау

Шаг 6

Қорытындысы. Оң нәтижеде антибиотик дискі айналасында микроорганизмнің өсуі тоқтаған (лизис аймағы). Теріс нәтижеде антибиотик дискі айналасында микроорганизмнің өсуі байқалады (лизис аймағы жоқ).