Глава 1. Теоритическая часть §1.1. Основные методы, принципы и этапы бактериологического исследования кишечных инфекций

§1.1.1. Принципы бактериологического исследования кишечных инфекций

Принципы бактериологического исследования, реализация которых имеет важнейшее значение для его эффективности, следующие. 1. Обдуманный квалифицированный выбор материала, подлежащего исследованию; для клинических образцов - с учетом характера и локализации патологического процесса, патогенеза и его стадии; для объектов окружающей среды - с учетом возможного значения их в качестве путей и факторов передачи микроорганизмов - возбудителей инфекции, значений в патологии человека, возможных сроков сохранения этих микроорганизмов в тех или иных объектах. 2. Отбор проб материала для исследования в необходимом и достаточном объеме с исключением возможности его дополнительной контаминации. Обеспечение наиболее благоприятных условий и сроков доставки материала для сохранения жизнеспособности искомых бактерий и подавления конкурирующей микрофлоры, при наличии таковой в исследуемом материале. 3. Выбор оптимального набора соответствующих питательных сред для первичного посева и накопления возбудителя с учетом характера материала, свойств искомого микроорганизма и посевных доз. 4. Соблюдение классических принципов тщательного изучения посевов на пластинчатых средах и правил отбора необходимого числа колоний для выделения чистых культур и дальнейшего их изучения. 5. Изучение фенотипических характеристик выделенных чистых культур в первую очередь биохимических свойств с максимально возможной стандартизацией условий их определения (в частности, с использованием коммерческих питательных сред и соответствующих реактивов). При сомнении в чистоте культуры рассев на пластинчатые среды (неингибирующие или слабоингибирующие). 6. Определение согласно классификационным таблицам таксономического положения выделенной культуры в соответствии с задачами исследования (родовой, видовой, внутривидовой принадлежности).

Основанное на указанных принципах бактериологическое исследование проводят поэтапно, в определенной последовательности. 1. Посев доставленного материала на пластинчатые среды и среды обогащения. Для некоторых видов материалов осуществляют предварительную подготовку их для посева, а затем инкубацию посевов для всех видов при условиях, соответствующих свойствам искомых бактерий. 2. Изучение чашек с посевами на пластинчатых средах и высев со сред обогащения на соответствующие пластинчатые среды. Выделение чистых культур из намеченных колоний для дальнейшего изучения с использованием для этого комбинированных сред для первичной идентификации. 3. Учет результатов посева в комбинированные среды после 18-20 ч инкубации. Изучение морфологических и тинкториальных свойств.Посевы для воспроизведения текстов минимального дифференцирующего ряда. При предположении о выделении шигелл или сальмонелл и наличии соответствующих эпидемиологических данных возможно ориентировочное изучение культур в реакции агглютинации с поливалентными сыворотками и пробах с поливалентными бактериофагами. 4. Определение рода, а в ряде случаев и вида на основании учета результатов посевов в среды минимального дифференцирующего ряда. Серологическая идентификация видов (сероваров) для некоторых энтеробактерий. Посевы для определения дополнительных биохимических признаков (при необходимости). 5. Учет дополнительных биохимических тестов. Определение эпидемиологических маркеров.