2.1.Методики, используемые для оценки иммунного статуса.

Основой клинической иммунологии является оценка иммунного статуса человека, т. е. определение количественных показателей и функциональной активности иммунной системы как в норме, так и при патологии.

Основоположником иммунодиагностики является академик РАН, академик РАМН Рэм Викторович Петров разработавших вместе со своими сотрудниками поэтапный метод оценки иммунной системы человека. Все существующие в настоящее время лабораторные иммунологические тесты могут быть разделены на тесты I и II уровня.

Тесты первого уровня просты, немногочисленны, экономически доступны любому лечебному учреждению и включают следующие:

1. Общеклинический анализ крови с определением формулы ;

2. определение количества Т- и В-лимфоцитов в крови;

3. определение содержания иммуноглобулинов классов Ig M, Ig G и IgA в сыворотке крови;

4. Определение фагоцитарной активности нейтрофилов.

После анализа результатов тестов первого уровня определяют тактику дальнейшего исследования иммунного статуса. Тесты второго уровня в отличие от тестов первого уровня ставят избирательно в зависимости от того, какие цели преследует проводимое иммунологическое обследование. Тесты второго уровня не надо выполнять все по списку. Их можно и нужно использовать избирательно в зависимости от клинических симптомов у больного.

Тесты второго уровня – это более детальное и углубленное исследование различных параметров:

1. мембранных маркёров тех или иных субпопуляций лимфоцитов и лейкоцитов;

2. пролиферативных свойств лимфоцитов в культурах in vitro с митогенами или аллоантигенами;

3. продукции тех или иных цитокинов в культуре клеток из периферической крови, пунктата костного мозга или иного биологического материала;

4. активность катаболических ферментов (миелопероксидазы, NO-синтазы, каталазы и др.) или совокупной функции расщепления в фагоцитах поглощенного материала;

5. продукции биологически активных веществ эозинофилов (ECP-эозинофильного катионного протеина и др.), тучных клеток (триптаза, гистамин) в крови, мокроте или смывах со слизистых оболочек;

6. белков острой фазы – С-реактивного протеина и маннан-связывающего лектина;

7. белков системы комплемента;

8. в случаях аллергических болезней – анализ общего и аллерген-специфических IgE;

9. анализ на наличие тех или иных аутоантител;

10. кожные пробы с антигенами на гиперчувствительность немедленного типа при аллергодиагностике;

11. кожные пробы замедленного типа на широко распространённые или вакцинные микробные антигены (стрептококковый, столбнячный, дифтерийный, туберкулин и т. п.).

С. А. Кетлинский и Н. М. Калинина (1998) предлагают следующую классификацию методов оценки иммунного статуса. Методы иммунодиагностики можно разделить на скрининговые и уточняющие. Первые существуют для фиксирования нарушений в иммунной системе, вторые – для установления механизмов, задействованных в их реализации с целью дальнейшей иммунокоррекции.

Иммунологическое обследование проводится натощак. Одновременно необходимо сделать клинический анализ крови.

Таблица 18.

Дифференцировочные антигены (CD-маркёры) лимфоцитов человека.

CD-маркёр	Клеточная экспрессия	Функция
CD2	Т-лимфоциты периферической крови, тимоциты, NК-клетки.	Адгезивная молекула взаимодействия с CD58, активирует Т-клетки.
CD3	Тимоциты, зрелые Т-лимфоциты.	Молекула ассоциирована с Т-клеточным рецептором, необходима для экспрессии на клеточной поверхности.
CD4	Т-лимфоциты хелперы, моноциты, макрофаги.	Корецептор молекул МНС II. Рецептор для ВИЧ-1 и ВИЧ-2.
CD5	Тимоциты, Т-лимфоциты, субпопуляция В-лимфоцитов.	Костимуляция Т-клеток. Взаимодействие с CD72. Активация продукции ИЛ-2 и экспрессия ИЛ-2R.
CD8	Т-цитотоксические клетки, тимоциты, NК-клетки.	Корецептор молекулы МНС I.
CD16	Моноциты, макрофаги, NК-клетки, Т-лимфоциты.	Рецептор IgG. Опосредует антителзависимую клеточную цитотоксичность.
CD56	NК-клетки	Адгезивная молекула. Медиатор цитотоксичности.
CD38	ПреТ-лимфоциты, преВ-клетки, активированные Т-лимфоциты, плазмоциты.	Нет данных.
CD25	Т-, В-активированные лимфоциты, активированные моноциты/макрофаги.	Маркёр активации. а-цепь рецептора для ИЛ-2.
CD19	В-лимфоциты незрелые и зрелые.	Часть корецептора В—лимфоцита.
CD20	Зрелые В-лимфоциты.	Кальциевый канал. Регуляция активации В-клеток.
CD21	Зрелые В-лимфоциты, фолликулярные дендритные клетки.	Образует корецептор В-лимфоцита. Рецептор для компонента комплемента С3b, вируса Эпштейна-Барр, совместно с CD19 и CD81.
CD22	Зрелые В-клетки, В-клетки миндалин.	Адгезия В-клеток на Т-лимфоцитах и моноцитах.
CD23	70% процентов зрелых В-клеток крови, активированные макрофаги, эозинофилы, тромбоциты, фолликулярные дендритные клетки.	Низкоаффинный рецептор для IgE.
CD71	Активированные лейкоциты.	Рецептор для трансферина.
CD95	Активированные Т- и В-лимфоциты, NК-клетки, тимоциты, макрофаги, нейтрофилы и разные клетки организма.	Индукция апоптоза. Лиганд для FasL.

Иммунологическим анализами называют такие методы качественного и количественного определения растворимых веществ, в основе которых лежит взаимодействие антигена с антителом (т. е. иммунологическое распознавание), которое детектируется (визуализуется) с помощью специальной метки, заранее конъюгированной либо с антителом, либо с антигеном. В качестве меток используют вещества, которые при определенных условиях может видеть либо тот или иной прибор, либо глаз человека. Приборы могут не только увидеть, но и измерить количество метки.