Дифференциальные признаки стептококков
ПРИЗНАКИ
|
ВИДЫ СТРЕПТОКОККОВ
|
||
S. sanguis
|
S. mitis
|
S. salivarius
|
|
Рост при: t=10 C |
-
|
-
|
-
|
t=45 C |
+/- |
+/- |
+ |
Рост на среде с 40% желчью |
+
|
-
|
-
|
Гидролиз: желатина |
-
|
-
|
-
|
крахмала |
- |
- |
- |
эскулина |
+ |
- |
+ |
аргинина |
+ |
+/- |
- |
Образование кислоты из: маннита |
+
|
-
|
+
|
раффинозы |
- |
- |
+ |
салицина |
+ |
- |
+ |
инулина |
+ |
- |
+ |
Образование Н202
|
+ |
+ |
- |
СТАФИЛОКОККИ. Семейство Micrococcaceae, род Staphylococcus Грамположительные кокки, располагаются в мазках скоплениями. Колонии гладкие, блестящие, от белого до ярко-желтого цвета. При росте на 5% кровяном агаре большинство штаммов S. aureus и некоторые штаммы S. epidermidis образуют вокруг колоний зону гемолиза.
На следующих этапах выделяют чистую культуру и проводят видовую идентификацию выделенных стафилококков.
Для установления принадлежности культур к семейству Micrococcaceae используют тест на каталазу. Представители данного семейства имеют фермент каталазу и способны расщеплять 3% перекись водорода на воду и газообразный кислород.
Установление принадлежности культуры к роду Staphylococcus проводят по культуральным (колонии на ЖСА от белого до ярко-желтого цвета, на кровяном агаре зона гемолиза), морфологическим (грамположительные кокки, располагающиеся одиночно, парами, но чаще скоплениями в виде " гроздьев винограда"), биохимическим (ферментация глюкозы в анаэробных условиях) свойствам. На последнем этапе устанавливают видовую принадлежность стафилококков.
Штаммы S. aureus вырабатывают плазмокоагулазу, ДНК-азу, способны ферментировать маннит в анаэробных условиях. В большинстве случаев штаммы S. aureus обладают ферментом, лецитиназой, гемолизином.
Для штаммов S. epidermidis характерны: чувствительность к новобиоцину, наличие фосфатазы, неспособность окислять маннит. Некоторые штаммы обладают пигментом, лецитиназой, гемолизином.
Штаммы S. saprophyticus обладают противоположными свойствами: нечувствительны к новобиоцину, не имеют фосфатазы, способны окислять маннит.
Поскольку не все стафилококки по своим характеристикам укладываются в указанную схему, такие штаммы следует обозначать Staphylococcus spp.
МИКРОСКОПИЧЕСКИЕ ГРИБЫ. Колонии грибов рода Candida- белые, блестящие, выпуклые с гладкой или морщинистой поверхностью. Могут иметь розовый или кремовый цвет. Микроскопически обнаруживаются крупные овальные почкующиеся клетки, грамположительные. Для выявления филаментации грибов рода Candida производят посев чистой культуры на картофельный агар. Биохимическую идентификацию проводят на основании способности штаммов ферментировать глюкозу, мальтозу, сахарозу, лактозу.
Семейство Bacteriodaceae включает три рода: Bacterioides, Fusobacterium, Leptotrichia.
БАКТЕРИОИДЫ. К роду Bacterioides относятся полиморфные, мелкие, грамотрицательные палочки, чаще с биполярной окраской. Спор не образуют, строгие анаэробы. Внешне колонии бактероидов бывают различными: мелкие, плоские, непрозрачные, серовато-белые с ровными краями, светло-коричневые средних размеров, желтовато-белые, непрозрачные, выпуклые, с
зазубренными краями. Нередко обращает на себя внимание отвратительный запах при росте бактериоидов на питательных средах. На кровяном агаре образуют колонии черного цвета растут в 20% желчи. В сахарном бульоне образует помутнение,
Наиболее часто в полости рта встречается В. oralis. Штаммы В. oralis на среде с кровью образуют колонии полупрозрачные, гладкие, гемолиз отсутствует. Интенсивно сбраживает углеводы (глюкозу, сахарозу, мальтозу) с образованием янтарной кислоты. Не обладают уреазой, выделяют индол, не образуют сероводород.
ФУЗОБАКТЕРИИ. К роду Fusobacterium относятся грамотрицательные, тонкие, нитевидные палочки с заостренными концами, могут располагаться цепочками, облигатные анаэробы. Хемоорганотрофы. Растут на кровяном агаре. Колонии мелкие, желтые, окруженные зоной альфа-гемолиза. Ферментируют глюкозу, образуют сероводород, индол, обычно каталазоотрицательны. Типовой вид – F. nucleatum, обитатели ротовой полости.
ЛЕПТОТРИХИИ - род Leptotrichia. Прямые и слегка изогнутые палочки, располагающиеся цепочками, грамотрицательные. Неподвижны. Строгие анаэробы, гетеротрофы. Растут на средах с добавлением сыворотки, асцитической жидкости, крахмала, в атмосфере 55 СО2. Ферментируют глюкозу, фруктозу, мальтозу, сахарозу до кислоты. В полости рта наиболее часто встречается L. buccalis.
ВЕЙЛОНЕЛЛЫ - относятся к роду Veilonella. Мелкие грамотрицательные кокки, неподвижны, спор не образуют, располагаются в мазках парами или короткими цепочками. Строгие анаэробы. Хемоорганотрофы. Растут на средах содержащих лактат, рН 6,5-8,0. Колонии мелкие, гладкие, маслянистые, серовато-белого цвета. Углеводы не
ферментируют, желатин не разжижают, индол не образуют, гемолитическими свойствами не обладают, восстанавливают нитраты в нитриты.
НЕЙССЕРИИ - род Neisseria. Бобовидные кокки, грамотрицательные, располагаются парами или небольшими скоплениями. Неподвижны. Аэробы или факультативные анаэробы. Растут на МПА с добавлением крови или сыворотки. Колонии светлые, полупрозрачные. Биохимически малоактивны (расщепляют глюкозу и мальтозу). Обладают цитохромоксидазой и каталазой.
КОРИНЕБАКТЕРИИ - относятся к роду Corynebacterium. Прямые или слегка изогнутые, грамположительные палочки, располагаются в виде частокола. Спор не образуют, не подвижны. Факультативные анаэробы. На питательных средах с теллуритом калия образуют серовато-белые и колонии. Растут на кровяных и сывороточных средах. В полости рта встречается C. hofmani..
Семейство Spirochaetaceae - в полости рта обнаружены:
1.Treponema denticola - тонкие спиральные клетки, на концах изогнуты, подвижны. Растут на средах с пептоном, дрожжевым экстрактом, сывороткой - в анаэробных условиях 2 недели. Колонии белые, диффузные. Стимулирует рост добавление в среду кокарбоксилазы. Углеводы не ферментируют, сероводород, индол образуют. Гидролизируют крахмал, гликоген, эскулен, желатин. Обнаружены в полости рта людей и шимпанзе а также в местах соединения зубов с деснами.
2. Treponema orale- тонкие, спиральные клетки, образующие цепочки. Подвижны. Растут на средах с пептоном и дрожжевым экстрактом. Среда также должна содержать глюкозу, цистеин, кокарбоксилазу, кроличью
сыворотку. В жидкой среде вызывают равномерное помутнение. Углеводы не ферментируют, но ферментируют аминокислоты, образуют индол и сероводород. Обнаруживаются в десневых карманах людей.
3. Treponema macrodentinum - тонкие спиральные клетки с заостренными концами. Подвижны. Растут на средах, содержащих пептон, дрожжевой экстракт, 10% кокарбоксилазу, глюкозу, цистеин. Углеводы ферментируют и используют как источники энергии. Расщепляют глюкозу, фруктозу, мальтозу, сахарозу до кислоты. Не образуют индола, образуют сероводород. Обнаруживаются в десневых карманах людей.
Таблица №2
Микробная обремененность полости рта, КО-Е/ед.суб.
Биотоп полости рта |
МИКРООРГАНИЗМЫ |
Грибы рода Candida |
Общее микробное число |
||
Грампози-тивные |
Грамнега-тивные |
||||
Зубной налет |
8,50-104
|
4,69- 102
|
4,09- 102
|
8,59-104
|
|
Ротовая жидкость |
7,52-104
|
3,12- 10
|
3,17- 10
|
7,53-104
|
|
Поверхность языка |
7,58-104
|
1,68- 102
|
4,80- 102
|
7,64-104
|
|
Слизистая оболочка щеки |
1,14-104
|
1,38- 10
|
3,17-10
|
1,15-104
|
|
Десны |
2,70-1 03
|
0,73-10
|
2,24-10
|
2,72-1 03
|
|
Неба |
1,12-103
|
0,60-10
|
1,86-10
|
1,14-103
|
|
К дисбактериозам полости рта принято относить качественные и количественные изменения нормальной микрофлоры, возникающие в результате воздействия на организм различных факторов экзогенного и эндогенного характера или вследствие каких-либо патологических процессов в организме, влекущие за собой выраженные клинические проявления. Факторы, ведущие к нарушению состояния микрофлоры, весьма разнообразны: возрастные изменения, соматическая патология, неблагоприятные экологические условия, применение антибактериальных препаратов, гормонотерапии, химиотерапии и т.д.
Процесс начинается с незначительных нарушений микрофлоры, затем изменяется иммунный статус, отражаясь на течении основного заболевания. Нарушения микрофлоры, изменения иммунного статуса и проявления болезни следует рассматривать в единстве, где роль пускового механизма может принадлежать в каждом конкретном случае любому из этих компонентов.
Концентрация микрофлоры полости рта в норме имеет относительное постоянство и характеризуется следующими показателями:
стрептококки -106-7
лактобактерии -103
стафилококки - 103
грибы рода Candida - 102
Бактерии группы кишечной палочки отсутствуют.
Изменения состава микрофлоры при патологических состояниях условно делят на 4 категории: дисбиотический сдвиг, дисбактериоз I-II степени, дисбактериоз III степени и дисбактериоз IV степени.
Для дисбиотического сдвига обычно характерно незначительное количественное превышение одного вида условно-патогенных микроорганизмов при сохранении нормального видового состава микрофлоры полости рта. Эту форму сдвига можно назвать латентной или компенсированной, при ней могут отсутствовать выраженные клинические признаки заболевания.
Дисбактериоз I-II степени (субкомпенсированная форма) отличается более выраженными изменениями состава микрофлоры: выявляются 2-3 патогенных вида на фоне некоторого снижения титра лактобактерии. У больных с I-II степенью дисбактериоза, как правило, имеются и клинические симптомы заболевания.
Дисбактериоз III степени характеризуется выявлением патогенной монокультуры при резком снижении количества или полном отсутствии представителей нормальной (физиологической) микрофлоры (негемолитический стрептококк, лактобактерии).
Диагноз дисбактериоза IV степени ставят при наличии ассоциаций патогенных видов бактерий с дрожжеподобными грибами. Изменения слизистой оболочки полости рта не всегда соответствуют степени тяжести выявленных дисбиотических сдвигов. Для них характерен полиморфизм проявлений - от признаков катарального воспаления с элементами атрофии до выраженных гиперпластических налетов, типичных для псевдомембранозной формы кандидоза (фото 1-4).
|
||
|
|
|
Фото
1
Фото
2
Фото
3
Фото
4Для эффективного лечения больных с дисбактериозами полости рта необходимо воздействие как на микрофлору, так и на факторы местного иммунитета. Поэтому в комплексное лечение больных с дисбактериозами полости рта был включен иммуномодулятор нового поколения Имудон, приготовленный из смеси лизатов штаммов наиболее часто встречающихся бактерий и грибов полости рта: Lactobacillus acidophilus, Streptococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Corynebacterium pseudodiphtheriticura Candida albicans и др.
Терапевтический эффект Имудона объясняется его влиянием на иммунную систему, которое выражается в повышении фагоцитарной активности в основном за счет качественного улучшения фагоцитоза, в увеличении содержания лизоцима в слюне и числа иммуно-компетентных клеток, ответственных за выработку антител, а также в росте титра местных антител (slgA). Противомикробная и противовоспалительная активность препарата является основанием для его применения как с целью лечения соответствующих заболеваний полости рта, так и для профилактики рецидивов.
В отделении патологии слизистой оболочки полости рта ЦНИИ стоматологии МЗ РФ было обследовано и проведено лечение 73 пациентов в возрасте от 25 до 70 лет (19 мужчин и 54 женщины), у которых был диагностирован дисбактериоз полости рта различной степени тяжести. Все больные при первичном обращении были лабораторно обследованы на состояние микрофлоры. При выявленных соматических нарушениях больных консультировали соответствующие специалисты: стоматоневролог, гастроэнтеролог, эндокринолог и др. Больные были разделены на две группы - основная (в комплекс лечения был включен препарат Имудон) и контрольная (больные получали лечение по обычной методике с учетом выявленных изменений.
Схемы лечения дисбактериозов полости рта
Дисбиотический сдвиг
обследование гастроэнтеролога
санация полости рта
полоскания антисептическими средствами - корсодилом 0,1% или тантум-верде - в течение 3-4 дней
применение эубиотика местного действия - ацелакта - ротовые ванночки 2 раза в день в течение 3 недель
назначение бифидумбактерина (производство Института эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского).
Дисбактериоз I-II степени
обследование гасгроэнтеролога
санация полости рта
полоскания антисептическими средствами - корсодилом или тангум-верде - в течение 14 дней
витаминотерапия
назначение противомикробных или противогрибковых средств в зависимости от преобладающей микрофлоры после определения чувствительности
применение пребиотиков местного действия (Лактулоза, Аюфалак), а также общего действия (хелак-форте, лакюбактерин, бактисубтил, бифидумбактерин и др.)
курс местной иммунокоррекции Имудоном - по 8 таблеток в день в течение 20 дней
Дисбактериоз III-IV степени
обследование гастроэнгеролога
санация полости рта
полоскания антисептическими средствами - корсодилом или тантум-верде
витаминотерапия
назначение противомикробных или противогрибковых средств в зависимости от преобладающей микрофлоры после определения чувствительности, а также грихопола - по 250 мг 3 раза в день в течение 10-14 дней
применение пребиотиков местного и общего действия
использование иммунокорректора общего действия ликопида - по 1 мг 1 раз в день в течение 14 дней, а также иммунокорректора местного действия Имудона - по 8 таблеток в день в течение 20-25 дней. Таблетки Имудона держат во рту до полного рассасывания
Результаты оценивали клинически и лабораторно спустя 7-10 дней по окончании курса лечения. Положительным итогом считали переход более тяжелой степени дисбактериоза в менее тяжелую либо полную нормализацию состояния микрофлоры. Клинический эффект выражался в уменьшении острых воспалительных явлений и болезненности в местах поражения слизистой оболочки рта, а также в ослаблении чувства жжения и дискомфорта.
Результаты оценки эффективности включения препарата Имудон в комплексную терапию дисбактериозов приведены в таблице.
Таблица. Результаты лечения больных с дисбактериозом полости рта
|
П
олученные
данные в целом подтверждают эффективность
включения в терапию больных с
дисбактериозами полости рта препарата
Имудон, Однако она зависит от степени
тяжести заболевания, наличия соматической
патологии, длительности заболевания и
возраста. Наилучшие результаты получены
у больных с дисбиотическим сдвигом
микрофлоры полости рта. В то же время
дисбактериоз III-IV степени тяжести
требовал повторных курсов применения
Имудона (2-3 раза в год) для достижения
лечебно-профилактического эффекта.
Переносимость препарата была хорошей, лишь в 1 случае отмечалось диспептическое расстройство, в 1 случае - головокружение и в 2 случаях выявлена аллергическая реакция. Сроки наблюдения за больными с дисбактериозами полости рта, в схему лечения которых был включен Имудон, составляют более одного года.
Таким образом, наш опыт клинического использования препарата Имудон в комплексной терапии дисбактериозов полости рта позволяет сделать заключение, что применение данного препарата патогенетически обосновано и он является
В настоящее время определенное внимание уделяется изучению нормальной микрофлоры полости рта человека, а также изменениям, которые возникают при различных хронических заболеваниях слизистой оболочки рта. Доказано участие микрофлоры в процессах пищеварения, обмене веществ, синтезе витаминов, формировании иммунного статуса и общей неспецифической резистентности организма. В то же время проблеме микроэкологии полости рта, составной частью которой является симбиотическая микрофлора, уделяется недостаточное внимание. От микроэкологического благополучия могут зависеть течение, исход и прогноз хронических заболеваний слизистой оболочки рта (Хазанова В.В., Рабинович И.М., Земская Е.А. и соавт., 1996). Микробы, обитающие в полости рта, так же, как и в других отделах организма, находятся в сложных экологических взаимоотношениях. Под влиянием разнообразных факторов состав аутофлоры может изменяться, что иногда приводит к развитию дисбактериоза. Необходим экологический подход к изучению микробных ассоциаций, так как в естественных условиях в биосубстратах больного обнаруживается не чистая культура возбудителя, а сочетание разных микробов, в том числе условно-патогенных и сапрофитов.
Дисбактериоз (дисбиоз) - это бактериологическое понятие, которое характеризуется изменением соотношения представителей нормальной микрофлоры, снижением числа или исчезновением некоторых видов микроорганизмов за счет увеличения количества других и появлением микробов, которые обычно встречаются в незначительном количестве или совсем не определяются (Кондрашева З.Н. и др., 1996). Однако, учитывая тот важный факт, что микробиоценоз как в норме, так и тем более при патологии представлен не только бактериями, но и вирусами, грибами, бактероидами, споровыми формами микроорганизмов и пр., решено в клиническую практику ввести другой термин, наиболее адекватно отражающий патофизиологическую сущность нарушений экологии ротовой полости - дисбиоз (Блохина И.Н., Дорофейчук В.Г., 1979; Игнатова Г.Н. и соавт., 1988; Красноголовец В.Н., 1989 и др.).
Микрофлора полости рта представляет собой высокочувствительную индикаторную систему, реагирующую качественными и количественными сдвигами на изменения состояния различных органов и систем и человеческого организма в целом. Являясь вторичной патологией, дисбиоз полости рта усугубляет тяжесть и ухудшает прогноз течения основного процесса, а успешное устранение дисбиотических нарушений улучшает результаты лечения первичного заболевания.
Влияние нарушения нормального микробиоценоза на клиническое течение заболеваний слизистой оболочки рта диктует необходимость разработки и внедрения в стоматологическую практику средств и методов, нормализующих биоценоз при хронических заболеваниях слизистой оболочки рта.
Показания и противопоказания к применению метода
Показанием к применению метода коррекции дисбиотических изменений при заболеваниях слизистой оболочки рта являются дисбактериозы различной степени тяжести при патологии слизистой оболочки рта.
Противопоказанием к использованию метода являются аллергические реакции на препараты, применяемые для лечения дисбактериозов полости рта.