Лабораторная диагностика синдрома гемолиза

Различают тесты скриннирующие, т. е. выявляющие гемолитическое состояние и тесты дифференцирующие, т. е. уточняющие характер гемолитического процесса. Таким образом, общими признаками гемолиза являются;

1)   нормохромная анемия;

2)    ретикулоцитоз   (он  отсутствует только при  гемолитической анемии, сопутствующей гемобластозам, гипо-, апластическим состояниям);

3)        желтушность  или  субиктеричность  кожных  покровов, с увеличением непрямого билирубина в крови;

4)        насыщенный   (темный) цвет мочи при отсутствии желтушного окрашивания пены;

5)        увеличение селезенки,  в меньшей степени увеличение печени.

Вслед за установлением гемолитического характера проводятся дифференцирующие пробы.

1)  Изучение  морфологических особенностей  эритроцитов (микросфероциты,   овалоциты,   мишеневидные,   серповидные, дрепаноциты).

2)   Определение осмотической резистентности   (ее снижение считается специфичным для микросфероцитоза).

3)  Для микросфероцитоза ― спонтанный лизис эритроцитоз после 2-суточной инкубации.

Если в норме разрушается 0,4―0,5% эритроцитов через 48 час., то при микросфероцитозе ― 30―40%. Прибавление глюкозы к эритроцитам препятствует гемолизу. В норме аутогемолиз под влиянием глюкозы падает до 0,03―0,04%, а при микросфероцитозе степень аутогемолиза с 50% снижается до 10%. Но следует помнить, что 2,3 признаки не строго специфичны для микросфероцитоза. Они могут выявляться и при некоторых формах аутоиммунной гемолитической анемии, при наследственных анемиях, связанных с дефицитом ферментов.

4)   Определение свободного гемоглобина плазмы, желчных пигментов и гемосидерина мочи.

В норме в плазме содержится менее 40 мг/л свободного гемоглобина. При гемолитической анемии, протекающей хронически с внутриклеточным гемолизом, свободный гемоглобин плазмы не повышается. А во время гемолитического криза или при гемолитической анемии, протекающей с внутрисосудистым гемолизом, свободный гемоглобин плазмы возрастает иногда до 1―2 г/л. При значительной гемоглобинемии, иногда полностью насыщена способность связывать гемоглобин гаптоглобином плазмы, свободный гемоглобин появляется в моче («черная» моча). При длительной гемоглобинемии и гемоглобинурии в осадке мочи появляются характерные зерна гемосидерина. В плазме уровень свободного билирубина повышен, уровень гипербилирубинемии при хорошей функции печени невысокий, а при легкой степени гемолиза ― нормальный. При повышении свободного билирубина более 70 мг/л существует вероятность повреждения печени.

5)  Пробы  на  сензитивность эритроцитов  к  комплементу (кислотная проба, сахарозная проба).

     6)  Определение   нестабильного      гемоглобина   ―   тельца Гейнца-Эрлиха.

В случаях острого медикаментозного провоцируемого гемолиза возможно присутствие аномального (нестабильного) гемоглобина, при этом необходимо исследование в специализированной лаборатории ферментов эритроцитов (Г-6-ФД).

Поиски  возможных  аномальных  гемоглобинов      (бисульфитная проба на серповидообразование эритроцитов при гемоглобинозе, электрофорез  гемолизата,   щелочная  денатурация гемоглобина).

    7)  При внутрисосудистом гемолизе с развитием ДВС определяется  тромбоцитопения,   иногда  аутоиммунная   гемолитическая  анемия сочетается  с тромбоцитопенией     (синдром Фишера-Ивенса).

    8)  Исследование пунктата костного    мозга ― гиперплазия красного ростка с резко выраженной эритробластно-нормоцитарной реакцией.  При апластическом кризе может быть эритробластопения.

   9)   Проба Кумбса (итрямая и непрямая).

Эту пробу следует проводить одновременно с определением группы крови (по системам АВ (0) и резус). Проба Кумбса, особенно прямая, имеет важнейшее диагностическое значение, в большинстве случаев эта проба свидетельствует об аутоиммунной гемолитической болезни («идиопатической» или симптоматической), обусловленной присутствием неполных тепловых аутоантител. В разгар аутоиммунного гемолитического криза и непосредственно после него прямая проба Кумбса может оказаться отрицательной вследствие того, что популяция эритроцитов с фиксированными на них антителами (обусловливающими прямую пробу) полностью распалась, а содержащиеся в плазме антитела (обусловливающие непрямую пробу) еще не успели зафиксироваться на. сохранившейся генерации молодых эритроцитов. Непрямая проба Кумбса не имеет строгого диагностического значения, особенно, если больной был иммунизирован предшествующей гемотерапией.

Подразделение гемолитических тестов на выявляющие и дифференцирующие носит условный характер. Ряд признаков, выявляемых при первом же морфологическом исследовании крови, позволяет составить точный диагноз (обнаружение серповидных эритроцитов, малярийных - плазмодий и других кровепаразитов) либо суживает круг дифференциально-диагностических исследований (обнаружение микросфероцитов, овалоцитов, мишеневидных эритроцитов в большом количестве). При специальных показаниях желательно определение локализации наибольшей деструкции эритроцитов с помощью Сr 51.

В некоторых случаях решающее значение в дифференциальном диагнозе гемолитических заболеваний играют медикогенетические исследования. Необходима и определенная эпидемиологическая осведомленность в отношении паразитарных заболеваний ― глистных инвазий ― и протозойных инфекций, а также гемоглобинопатии и эритроцитоэнзимопатий.