2.2.6. Методика оценки колонизации арбускулярной микоризы растения

Окрашенные корни помещали в чашку Петри и рассматривали корни под микроскопом.

Оценку колонизации микоризы и распространенности арбускул проводили согласно [Trouvelot, Kough, Gianinazzi-Pearson, 1986, с. 220].

1. Из образца корней на 2 предметных стекла вырезали по 15 фрагментов корней в 1 см. длиной.

2. Эти фрагменты рассматривали под микроскопом, и оценивали колонизацию микоризы по рис. 1

3. Результаты записывались в «Шахматку» расчета (рис. 2):

4. Далее вычисляли при помощи компьютерной программы "Mycocalc" следующие параметры: F%, M%, m%, A%, a% , согласно Trouvelot. 1986 год.

F% - Частота микоризы в корневой системе

F% = (NB фрагментов мико / общая NB)  100

M% - Интенсивность колонизации микоризы в корневой системе

M% = (95n5 70 N4 30 n3 5 n2 + n1) / (NB общее)

где N5 = число фрагментов оценили 5; N4 = число фрагментов 4 т.д.

m% - Интенсивность колонизации микоризы в корневом фрагменте

m% = M  (NB общее) / (NB мико)

а% - Изобилие арбускул в микоризованной части корневого фрагмента

а% = (100mA3 50 mA2 10 mA1) / 100

где mA3, mA2, которые mA1% м, номинальная A3, A2, A1, соответственно, с mA3 = ((95n5A3 70 n4A3 30 n3A3 5 n2A3 + n1A3) / NB мико)  100 / м и тот же для А2 и A1.

А% - Изобилие арбускул в корневой системе

А% = а  (M/100)

V% - Изобилие везикул в корневой системе

V% = а  (M/100)

V% - Изобилие везикул в микоризованной части корневого фрагмента

V% = (100mA3 50 mA2 10 mA1) / 100

Рис. 2.1. Оценка колонизации микоризы и распространенности арбускул согласно [Trouvelot, Kough, Gianinazzi-Pearson,1986, с. 217-221].

Рис.2.2 Шахматка расчета по методике [Там же. С. 220].

2.3. Статистическая обработка результатов

Эксперимент проводили три раза, в трех биологических повторностях. Статистическую обработку результатов проводили стандартными методами с использованием Microsoft Excel. Для определения зависимости биологических показателей между собой и от влияния почвенной засухи и бактерий использовали многофакторный дисперсионный анализ. В таблицах приведены средние значения и их стандартные отклонения.

Глава 3. Результаты и обсуждение влияние почвенной засухи и бактерий bacillus subtilis на рост и микоризацию корней растений

3.1. Влияние засухи и бактерий Bacillus subtilis на морфометрические показатели растений

В проведенных исследований были получены следующие результаты. Длина побегов у необработанных растений гороха (растущих при влажности почвы 70%) составляла 40,81 см. У растений гороха, предварительно обработанных бактериями Bacillus subtilis шт. 26Д и 11 ВМ длина побегов уменьшалась на 6% по сравнению с контролем не обработанными бактериями и растущими при влажности почвы 70% (табл.1), (рис 3.1.1.).

Рис 3.1.1. Длина побегов растений гороха при разной влагоемкости почвы

Длина побегов гороха (выросшей в условиях почвенной засухи) уменьшалась на 50%. У растений гороха, предварительно обработанных бактериями Bacillus subtilis шт. 26Д и выросших в условиях засухи длина уменьшалась …… по отношению к собственному контролю , но увеличивалась примерно на 27%, а при обработки бактериями Bacillus subtilis шт. 11 ВМ – 8% по сравнению с необработанными растениями, выросшими при засухе (рис 3.1.1.).

Таблица 1.

Морфометрические показатели растений

Вариант	Pisum sativum L			Zea mays L.
	70%	30%		70%	30%
Длина побегов, см
Контроль	40,81±0,9		20,11±1,14	44,26±2,07	26,16±1,25
B. subtilis 26Д	38,35±1,22		25,53±0,9	45,08±1,15	26,02±1,2
B. subtilis 11 ВМ	38,39±1,35		21,79±0,78	43±0,78	28,48±1,79
Масса побегов* , г
Контроль	0,95±0,06		0,55±0,03	1,4±0,1	0,70±0,03
B. subtilis 26Д	0,83±0,05		0,64±0,02	1,38±0,05	0,69±0,02
B. subtilis 11 ВМ	0,92±0,09		0,54±0,03	1,28±0,07	0,79±0,09
Масса корней* , г
Контроль	0,38±0,03		0,31±0,01	0,91±0,03	0,98±0,02
B. subtilis 26Д	0,35±0,04		0,36±0,03	0,98±0,02	1,40±0,09
B. subtilis 11 ВМ	0,37±0,01		0,36±0,02	0,94±0,04	1,46±0,07

*Примечание – данные суммы 100 растений.

Различия показателей при разной степени влажности почвы достоверны при p  0,05

У необработанных растений кукурузы длина побегов (растущих при влажности почвы 70%) составляла 20,14 см. У растений кукурузы, предварительно обработанных бактериями Bacillus subtilis шт. 26Д

на 2%, а при обработки бактериями Bacillus subtilis шт. 11 ВМ уменьшалась на 3% по сравнению с контрольными растениями, необработанными бактериями и растущими при влажности почвы 70% (табл.1), (рис 3.1.2.).

Рис 3.1.2. Длина побегов растений кукурузы при разной влагоемкости почвы

Длина побегов кукурузы (выросшей в условиях почвенной засухи) уменьшалась на 41%. У растений кукурузы, предварительно обработанных бактериями Bacillus subtilis шт. 26Д длина побегов уменьшалась примерно на 1%, а при обработки бактериями Bacillus subtilis шт. 11 ВМ увеличивалось – 9% по отношению к собственному контролю (рис 3.1.2.).

Биомасса побегов у необработанных растений гороха (растущих при влажности почвы 70%) составляла 0,95г. У растений гороха, предварительно обработанных бактериями Bacillus subtilis шт. 26Д биомасса уменьшалась на 13%, а при обработки бактериями Bacillus subtilis шт. 11 ВМ – 3% (рис 3.1.3).

Рис 3.1.3. Биомасса побегов растений гороха при разной влагоемкости почвы

Биомасса побегов гороха выросшей в условиях почвенной засухи уменьшалась на 42.1%. У растений гороха, предварительно обработанных бактериями Bacillus subtilis шт. 26Д масса побегов увеличивалась примерно на 16%, а при обработки бактериями Bacillus subtilis шт. 11 ВМ уменьшалась – 2% по отношению к собственному контролю (табл. 1) (рис 3.1.3).

У необработанных растений кукурузы биомасса побегов (растущих при влажности почвы 70%) составляла 1.4г. У растений кукурузы, предварительно обработанных бактериями Bacillus subtilis шт. 26Д биомасса уменьшалась на 1,5%, а при обработки бактериями Bacillus subtilis шт. 11 ВМ – 9% (рис 3.1.4.).

Рис 3.1.4. Биомасса побегов растений кукурузы при разной влагоемкости почвы

Биомасса побегов кукурузы выросшей в условиях почвенной засухи уменьшалась на 50%. У растений кукурузы, предварительно обработанных бактериями Bacillus subtilis шт. 26Д масса побегов уменьшалась примерно на 1,5%, а при обработки бактериями Bacillus subtilis шт. 11 ВМ увеличивалась – 13% по отношению к собственному контролю (табл. 1), (рис 3.1.4.).

Биомасса корней у необработанных растений гороха (растущих при влажности почвы 70%) составляла 0,38г. У растений гороха, предварительно обработанных бактериями Bacillus subtilis шт. 26Д биомасса уменьшалась 8%, а при обработки бактериями Bacillus subtilis шт. 11 ВМ – 3% (рис 3.1.5.).

Рис 3.1.5. Биомасса корней растений гороха при разной влагоемкости почвы

Биомасса корней гороха выросшей в условиях почвенной засухи уменьшалась на 19%. При обработке бактериями Bacillus subtilis шт. 26Д и 11ВМ биомасса побегов гороха увеличивалась на 16,1%, (Табл. 1), (рис 3.1.5.).

У необработанных растений кукурузы биомасса корней (растущих при влажности почвы 70%) составляла 0,91г. У растений кукурузы, предварительно обработанных бактериями Bacillus subtilis шт. 26Д биомасса увеличивалась 7,7%, а при обработки бактериями Bacillus subtilis шт. 11 ВМ – 3,2% (рис 3.1.6.).

Рис 3.1.6. Биомасса костра растений кукурузы при разной влагоемкости почвы

Биомасса корней кукурузы выросшей в условиях почвенной засухи увеличивалась на 7,7%. При обработке бактериями Bacillus subtilis шт. 26Д биомасса побегов кукурузы увеличивалась на 43%, а при обработки бактериями Bacillus subtilis шт. 11ВМ – на 49% по отношению к собственному контролю (Табл. 1); однако эти показатели были выше чем у необработанных бактериями растений, растущих при влажности почвы 70% (рис 3.1.6.).