Методика определения резус-фактора на плоскости без подогрева

На белой пластинке со смачиваемой поверхнос­тью пишут фамилию и инициалы лица, кровь кото­рого исследуется. На левом краю пластинки дела­ется надпись «сыворотка-антирезус», на правом -«контрольная сыворотка». Контрольной сывороткой служит сыворотка группы АВ (IV), разведенная аль­бумином, не содержащая антител. В соответствии с надписями на пластинке помещают по 1 - 2 капли (0,05 - 0,1 мл) реактива и резус-контрольной сыво­ротки. К обеим каплям добавляют исследуемые эритроциты. Кровь размешивают с реактивом су­хой стеклянной палочкой, размазывая ее на плас­тинке до образования капли диаметром 1,5 см. Пластинку слегка покачивают. Через 3-4 минуты для снятия возможной неспецифической агглюти­нации в каждую каплю добавляют 5-6 капель фи­зиологического раствора. После этого пластинку покачивают в течение 5 минут.

Наличие хорошо выраженной агглютинации в капле свидетельствует о резус-положительной принадлежности крови, отсутствие агглютинации (гомогенная окраска) - о резус-отрицательной.

Оценка совместимости крови донора и реципиента

Для выявления совместимости крови по системе АВО Оттенберг ввел правило, согласно которому аг­глютинируются эритроциты переливаемой крови, а не крови больного. В соответствии с этим прави­лом возможно переливание разногруппной крови, а представители группы АВ (IV) являются универ­сальными реципиентами,

Но современными исследованиями установлено, что правило Оттенберга применимо лишь при пере­ливании до 0,5 литра донорской крови.

Что касается резус-совместимости, то, как уже было сказано, резус-положительным пациентам принципиально можно переливать резус-отрицатель­ную кровь. Но в связи с современными достижени­ями иммунологии и клинической практики в со­временной хирургии действует правило, согласно которому можно переливать только одногруппную и однорезусную кровь, за исключением экстренных случаев. Переливание иногруппной крови у детей запрещено вообще.

Пробы на индивидуальную совместимость

Пробы на индивидуальную совместимость про­водятся в процессе подготовки к гемотрансфузии. Ставят две реакции: пробу на индивидуальную со­вместимость по системе АВО и по резус-фактору. Предварительно для постановки реакций у реци­пиента из вены берут кровь, которую разделяют сгусток и сыворотку (отстаиванием или центрифу­гированием).

а) Проба на индивидуальную совместимость по системе АВО

На белую поверхность (тарелку, пластинку) на­носят крупную каплю {0,1 мл) сыворотки крови реципиента и маленькую капельку (0,01 мл) крови донора из флакона и смешивают их между собой, периодически покачивая тарелку (пластинку). Ре­акция проводится при температуре 15 - 25°С, ре­зультаты оценивают через 5 минут: отсутствие агг­лютинации эритроцитов донора свидетельствует о совместимости крови донора и реципиента по сис­теме АВО. Появление агглютинации указывает на их несовместимость — такую кровь данному боль­ному переливать нельзя.

б) Проба на индивидуальную совместимость по резус-фактору

После того как установлена совместимость кро­ви донора и реципиента по системе АВО, необходи­мо установить совместимость в отношении резус-фактора. Проба на совместимость по резус-фактору может быть проведена в одном из двух вариантов:

- проба с использованием 33% полиглюкина;

- проба с использованием 10% желатина.

В клинической практике наибольшее распрост­ранение получила проба с полиглюкином. Проба с использованием 33% полиглюкина Реакция проводится в центрифужной пробирке без подогрева в течение 5 минут. На дно пробирки вносят 2 капли сыворотки реципиента, 1 каплю до­норской крови и 1 каплю 33% раствора полиглю­кина. После этого содержимое перемешивают, наклоняя пробирку и вращая ее вокруг оси, рас­пределяя содержимое по стенкам ровным слоем.

Пробирку вращают в течение 5 минут, после чего добавляют 3-4 мл физиологического раствора и аккуратно перемешивают, 2-3 раза наклоняя про­бирку до горизонтальной плоскости (не взбалтывая!). После этого оценивают результат: наличие агглю­тинации эритроцитов свидетельствует о несовмес­тимости крови донора и реципиента по резус-фак­тору, такую кровь переливать нельзя. Равномерное окрашивание содержимого в пробирке, отсутствие реакции агглютинации указывает на совместимость крови донора и реципиента по резус-фактору.

Проба с использованием 10% желатина

На дно пробирки помещают 1 каплю эритроци­тов донора, предварительно отмытых десятикратным объемом физиологического раствора, затем добав­ляют 2 капли подогретого до разжижения 10% ра­створа желатина и 2 капли сыворотки реципиента.

Содержимое пробирки перемешивают и помеща­ют в водяную баню при температуре 46 - 48° С на 10 минут. После этого в пробирку добавляют б - 8 мл физиологического раствора, перемешивают содержи­мое, переворачивая пробирку 1-2 раза, и оценивают результат: наличие агглютинации эритроцитов сви­детельствует о несовместимости крови донора и ре­ципиента, ее переливание недопустимо.

Если содержимое пробирки остается равномерно окрашенным и в ней не наблюдается реакция агг­лютинации, кровь донора совместима с кровью реципиента по резус-фактору.