Микробиологическая диагностика хламидиозов
Экспресс-тесты. В основе экспресс-тестов (рис.2) диагностики лежит метод иммунной хроматографии. Чувствительность данных тестов варьирует в пределах 20-50%.
Рис. 2 Экспресс-тест для диагностики хламидиоза
Бактериоскопический метод. Чувствительность данного метода применительно к обнаружению хламидий невысока, и составляет лишь 15-30%.
Серологические методы - РСК, ИФА, РИФ.
Молекулярно-биологические методы – полимеразная цепная реакция (ПЦР), лигазная цепная реакция (ЛЦР), метод ДНК-зондов и транскрипционной амплификации (ТА).
Систематическое положение микоплазм согласно классификации Берджи, 2001 |
Микоплазмы |
||
Домен |
BACTERIA |
||
Тип |
TENERICUTES |
||
Класс |
MOLLICUTES |
||
Порядок |
MYCOPLASMATALES |
||
Семейство |
Mycoplasmataceae |
||
Род |
Mycoplasma |
Ureaplasma |
|
Вид |
M. gallisepticum, M. hominis, M. genitalium, M.haemofelis, M. hyopneumoniae, M. laboratorium, M. ovipneumoniae, M. pneumoniae |
U. canigenitalium, U. cati, U. diversum, U. felinum, U. gallorale, U. loridis, U. parvum, U. urealyticum |
|
Микоплазма (Mycoplasma) -- род мелких аспорогенных, не имеющих ригидной клеточной стенки грам- хемоорганотрофных аэробных или анаэробных организмов из семейства Mycoplasmataceae.
Отличительные черты микоплазм:
Отсутствует клеточная стенка, микоплазмы не способны синтезировать её компоненты. Функции клеточной стенки у микоплазм выполняет трёхслойная цитоплазматическая мембрана, богатая холестерином, который сообщает ей некоторую ригидность, поэтому микоплазмы устойчивы к осмотическому лизису, что отличает их от дефектных по клеточной стенке форм – сферопластов и протопластов.
Из-за отсутствия формообразующего каркаса – клеточной стенки, микоплазмы плеоморфны и могут образовывать кокковидные, нитевидные, шаровидные, ветвящиеся формы, что обусловило их название от греч. mykes, гриб, + plasma, нечто имеющее форму.
Микоплазмы не способны к образованию холестерина и получают его из животных тканей или питательных сред. Для культивирования микоплазм нужны питательные среды, содержащие холестерин (желточные среды).
Отсутствие клеточной стенки отражено в систематике этих микроорганизмов. Микоплазмы относят к типу Tenericuies (буквально «нежнокожие»), классу Mollicutes (буквально «мягкокожие»). Семейство микоплазм объединяет: микоплазмы, и уреаплазмы, включающих патогенные и сапрофитические виды.
M.genitalium— это самая мелкая из известных на сегодняшний день бактерий; ее геном составляет 580 т.п.о.
Микоплазмы считаются поверхностными паразитами клеток слизистых оболочек. Их часто рассматривают как оптимальных паразитов, так как вызываемые ими инфекции редко приводят к летальному исходу.
Микоплазмы размножаются бинарным делением, способны к почкованию и сегментации. По Граму окрашиваются отрицательно, но лучшие результаты даёт окраска по Романовскому-Гимзе.
Биологические свойства.
Микоплазмы растут на питательных средах богатых стеролами, жирными кислотами, являются факультативными анаэробами, не способны к синтезу пептидогликана, в связи с чем устойчивы к бета-лактамным препаратам, в т.ч. к пенициллину.
Микоплазмы относятся к привередливым микроорганизмам, они растут на средах с добавлением нативной сыворотки, холестерина, нуклеиновых кислот, углеводов, витаминов и различных солей. На плотных средах образуют характерные мелкие полупрозрачные колонии с приподнятым зернистым центром, придающим им вид «яичницы-глазуньи». На средах с кровью некоторые виды микоплазм дают а- и бета-гемолиз.
В организме человека они прикрепляются к мембране клетки, выделяя продукты метаболизма и токсические субстанции, они нарушают функции клетки, приводят к развитию воспаления (мембранные паразиты). Рост микоплазм подавляют тетрациклины, макролиды; не действуют антибиотики, подавляющие синтез клеточной стенки (бета-лактамы), а также рифампицин, налидиксовая кислота.
Микоплазмы имеют адгезины, ответственные за прикрепление к клеткам хозяина. Некоторые компоненты микоплазменной клетки могут действовать как суперантигены, и в литературе описано несколько случаев аутоиммунных реакций. Микоплазмы имеют факторы ускользания от действия иммунной системы. Микоплазмы способны проникать в клетки хозяина и вызывать слияние клеток, апоптоз.