- •Содержание
- •Список сокращений
- •Иммунодиагностические реакции
- •Реакция агглютинации (ра) или прямая ра
- •Определение нормальных антител к брюшнотифозному антигену в ра
- •Ра Видаля для серодиагностики брюшного тифа и паратифов
- •Ориентировочная ра на стекле
- •Реакция пассивной агглютинации (рпа)
- •Реакция преципитации
- •Реакции с участием комплемента Реакции лизиса: бактериолиза и лизиса
- •Реакция гемолиза
- •Реакция связывания комплемента (рск)
- •Рск Борде –Жангу
- •Рск Вассермана
- •Реакция радиального гемолиза
- •Реакция иммунного прилипания
- •Меченые серологические реакции
- •Реакция иммунофлюоресценции (риф)
- •Радиоиммунологический анализ (риа)
- •Иммуноферментный анализ (ифа)
- •Реакция иммуноблотинга (ри)
- •Проточная цитометрия (пц)
- •Иммунная электронная микроскопия (иэм)
- •Реакции нейтрализации (рн) Реакции нейтрализации токсина антитоксической сывороткой
- •Реакция нейтрализации токсина антитоксической сывороткой in vivo
- •Реакция нейтрализации вирусов
- •Опсоно – фагоцитарная реакция
- •Иммунный статус
- •Оценка неспецифической резистентности
- •Методы оценки клеточного иммунитета
- •Методы оценки гуморального иммунитета
- •Кожные аллергические пробы
- •Ситуационные задачи
- •Тестовые задания
- •Ответы к ситуационным задачам
- •Ответы к тестовым заданиям
- •Рисунки
- •Список рекомендуемой литературы
Рск Вассермана
Ставится для диагностики сифилиса с целью обнаружения антител, а также для определения эффективности специфической терапии. Она основана на принципе реакции связывания комплемента Борде-Жангу. Существенным отличием реакции Вассермана является неспецифичность антигена: в качестве антигена употребляют липоидные экстраты из нормальных органов животных.
Для постановки реакции Вассермана необходимо иметь сыворотку больного, диагностикумы перекрестнореагирующие антигены № 1 и № 2, комплемент, гемолитическую сыворотку, эритроциты барана, физиологический раствор.
Диагностикум № 1 - специфический, трепонемный.
Диагностикум №2 - неспецифический, кардиолипиновый антиген, который представляют собой высокоочищенный экстракт бычьего сердца, имеющий постоянный химический состав липоидов. Липоиды, экстрагированные из сердца, по химическому составу близки к липоидам бледной трепонемы, поэтому хотя и не являются специфическими, но фиксируют антитела против спирохеты. Указанные антигены выпускаются централизованно и в реакцию употребляются, разведёнными согласно к титру, указанному на этикетке.
Одновременно с основным опытом ставят 2 контроля: с заведомо отрицательной и заведено положительной сыворотками.
Постановка основного опыта.
В начале в 3 пробирки разливается инактивированная и разведённая 1:5 испытуемая сыворотка. Затем в 2 пробирки разливаются антигены (№ 1, № 2), в 3-ю пробирку физиологический раствор. После этого во все пробирки добавляется рабочая доза комплемента. После смешивания ингредиентов штатив с пробирками помещается в термостат при 370 С на 30 минут. После выдерживания в термостате во все пробирки добавляется гемолитическая система. Пробирки снова помещают в термостат на 2 часа, а затем оставляют при комнатной температуре. На следующий день отмечают результат. Степень интенсивности реакции оценивается в плюсах. Полная задержка гемолиза - четыре плюса (++++), три (+++), два (++) и один (+) - в зависимости от интенсивности окраски жидкости и величины осадка эритроцитов на дне. Полный гемолиз обозначаются (-) минусом. При резком расхождении результатов с различными антигенами опыт повторяют с новой порцией крови.
Реакция радиального гемолиза
Реакция радиального гемолиза применяется для определения антител против вирусов гриппа, краснухи, клещевого энцефалита, активности комплемента, гемолитической сыворотки.
Компоненты реакции:
1) исследуемая сыворотка крови с неизвестными противовирусными антителами;
2) антигены вирусов, адсорбированные на поверхности эритроцитов барана;
3) комплемент (сыворотка морской свинки в рабочей дозе);
4) агарозный гель.
Реакцию ставят в лунках геля из агара, содержащего вирусных антигенов , адсорбированных на поверхности эритроцитов и комплемента. После внесения в лунки геля исследуемой сыворотки с антителами (лизинами, связывающих комплемент) вокруг них, в результате радиальной диффузии АТ, образуется зона гемолиза, т.к. АТ взаимодействует с антигенами, адсорбированными на эритроцитах, после чего к этому комплексу присоединяются компоненты комплемента, что заканчивается активацией системы комплемента и гемолизом эритроцитов. Размеры зоны гемолиза прямо пропорциональны титру сыворотки.