20. Возбудитель геликобактериоза и его биологические свойства. Лабораторная диагностика геликобактериозов.

 

Возбудителем геликобактериоза — хронической инфекции же­лудка и 12-перстной кишки — является Helicobacter pylori.

Материалом для исследования являются биоптаты слизистой оболочки из очагов поражения, желудочный сок, секционный и резекционный материал (слизистая оболочка тела, антрального и пилорического отделов желудка, луковицы 12-перстной кишки), реже материал из полости рта (зубной налет, материал у воспа­ленных десен). Исследование необходимо проводится сразу ввиду нестойкости геликобактера во внешней среде; допускается непродолжительное хранение материала (до 4 ч) в транспортных средах  для кампилобактеров при 4⁰ С.

Бактериоскопический метод  - исследование гистологических срезов, окрашенных  гематоксилин-эозином, из биоптата слизистой оболочки желудка и 12-перстной кишки, полученного при фиброгастродуоденоскопии. При микроскопии геликобактеры имеют харак­терную спиралевидную морфологию. 

Бактериологический метод является основным в лабораторной диагностике геликобактериоза.  Для выделения чистых куль­тур материал засевают на селективные плотные среды с кровью и антибиотиками (ванкомицин, амфотерицин В - по 10 мкг/мл и цефсулодин или триметоприм - 5 мкг/мл) , в которые для инактивации образующихся при культивировании  ингибиторов можно добавить активированный уголь или крахмал, а также на неселективные питательные среды (бруцеллезный агар с 5 — 7 % лошадиной крови).  Посевы инкубируют в анаэробных контейнерах с газогенера­торными пакетами до 7 сут при 37 °С в атмосфере, содержащей 5 % кислорода и 10 % углекислого газа.

Колонии геликобактеров на питательных средах мел­кие или достаточно крупные, серые прозрачные. В мазках из колоний обнаруживают слегка изогнутые или прямые, реже, типичные грамотрицательные спирально изогнутые бакте­рии. При темнопольной или фазово-контрастной микроскопии выявляют характерную подвиж­ность клеток возбудителя. Для идентификации возбудите­ля проводят также биохимические и другие тесты (табл.  11 ).

Для этого чистую культуру геликобактера засевают на одну из сред с мочевиной и инкубируют ее в течение от 15 мин до 24 ч. В случае наличия уреазы происходит разложение мочевины с образованием щелочного продукта – аммиака, сопровождающееся  изменением цвета индикатора среды.

Серодиагностика. Применяют РП, РНГА, РСК, ИФА для определения антител в крови больных хеликобактериозом. С помощью ИФА определяют  специфические антитела класса IgG, которые выявляются у больных с высокой частотой, более длительно персистируют и отражают ак­тивность патологического процесса.

Экспресс-диагностика – прямая РИФ  (специфическое све­чение хеликобактеров в препаратах слизистой оболочки)

Генодиагностика. Применя­ют ПЦР как экспресс-метод для обнаружения специфических фрагментов ДНК Helicobacter pylori в материале от больного. 

 

21. Возбудители йерсиниозов. Таксономия, характеристика. Микробиологическая диагностика.

Кишечный иерсиниоз — острая инфекционная болезнь, характе­ризующаяся поражением ЖКТ, тенденцией к генерализации с различ­ных органов и систем.

Возбудитель кишечного иерсиниоза Yersinia enterocolitica.

Таксономия. Y.enterocolitica относится к отделу Gracilicutes, семейству Enterobacteriaceae, роду  Yersinia.

Морфологические и тинкториальные свойства. Возбудитель полиморфен: он может иметь форму либо палочки с закругленными концами, либо овоидную с биполярным окра­шиванием. Спор не имеет, иногда образует капсулу. Перитрих есть. Некоторые штаммы имеют пили. Грамотрицателен.

Культуральные свойства. Y.enterocolitica — факульта­тивный анаэроб. Наиб. благоприятная темп. 25С. Возбудитель неприхотлив и растет на про­стых питательных средах.

Биохимическая активность. Биохимическая активность возбудителя высокая. Внутри вида по спектру б/х активности: индолообразованию, утилизации эскулина, реакции Фогеса – Проскауэра подразделяются на 5 хемоваров. 

Основные б/х признаки: расщепление мочевины, ферментация сахарозы, отсутствие ферментации рамнозы, продукция орнитиндекарбоксилазы.

Антигенная структура. О- и Н-антигены, у некоторых штаммов обнаружен К-антиген. По 0-антигену различают более 30 серогрупп, из которых от больных чаще всего выделяют представителей серогрупп 03, 09, 05.

Факторы патогенности. Образует термостабильный эндо­токсин. Не­которые штаммы выделяют вещество, соответствующее экзо­токсину и обладающее энтеро- и цитотоксическим действием. У иерсиний обнаружены также инвазивный белок и белки, препятствующие фагоцитозу. Адгезивная активность иерсиний связана с пилями и белками наружной мембраны.

Резистентность. Чувствителен к высокой температуре, солнечным лучам, дезинфицирующим ве­ществам, но очень устойчив к действию низких температур: хо­рошо переносит температуру -20 °С.

Эпидемиология. Источники болезни для человека - крысы, мыши, животные и птицы,. Механизм заражения иерсиниозом фекально-оральный, основным путем передачи является алиментарный: болезнь может возникнуть при употреблении фруктов, овощей, молока, мяса. Но возможны также контактный (при контакте людей с больными животны­ми) и водный пути передачи.

Патогенез. Возбудитель попадает в организм через рот, в нижних отделах тонкой кишки при­крепляется к эпителию слизистой оболочки, внедряется в клет­ки эпителия, вызывая воспаление. Под действием токсинов усиливается перистальтика кишечника и возникает диарея. Иногда в патологический процесс вовлекается аппендикс, развивается аппендицит. Незавершенный фагоцитоз способствует генерализации процесса. У людей со сниженным иммунитетом могут раз­виться сепсис с образованием вторичных гной­ных очагов в мозге, печени и селезенке.

Клиника. Различают гастроэнтероколитическую, аппендикулярную и септическую формы. Инкубационный пери­од составляет от 1 до 4 дней. Болезнь начинается остро с по­вышения температуры тела до 39С, общей интоксикации, рвоты, болей в животе, поноса. Течение продолжительное.

Микробиологическая диагностика. Используют бактериологический и серологический методы исследования. Цель бактериологического  метода являются идентификация возбудителя, определение антибиотикограммы, внутривидовая идентификация (установление серовара, биохимического варианта, фаговара).Материалом для бактериологи­ческого метода исследования служат испражне­ния, ликвор, кровь, моча, иногда червеобразный отросток. Материал для исследования помешают в фосфатный буфер и подвергают холодовому обогащению. Серологическая диагностика про­водится постановкой РНГА, с диагностическим титром 1:160. Важное диагностическое значе­ние имеет наблюдение за нарастанием титра антител в динамике.

Лечение. Этиотропная антибиотикотерапия.