Лабораторная работа №2
КАЧЕСТВЕННОЕ И КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОБНАРУЖЕНИЕ ЛЕТУЧИХ ОРГАНИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ, ИЗОЛИРУЕМЫХ ДИСТИЛЛЯЦИЕЙ С ВОДЯНЫМ ПАРОМ
Цель работы: Изучить и провести реакции качественного и
количественного обнаружения ядовитых и
сильнодействующих веществ, которые были
выделены из биоматериала методом дистилляции
водяным паром.
Методика эксперимента
1. Количественное определение
Для количественного определения изолирование синильной кислоты проводят из отдельной навески биоматериала.
В полноте отгонки синильной кислоты убеждаются по отрицательному результату реакции образования берлинской лазури в последней порции дистиллята.
Объемный метод
Для анализа берут 20-25 мл фильтрата, помещают в коническую колбу, добавляют 5 мл 6н азотной кислоты, 1 мл индикатора (насыщенный раствор железоаммонийных квасцов в воде (~40%)) и избыток нитрата серебра оттитровывают 0,1н (или 0,01н) раствором роданида аммония. После первого заметного изменения цвета (переход в оранжево-красный) титрование ведут очень осторожно, при сильном перемешивании жидкости, до появления коричневого оттенка, не исчезающего при сильном перемешивании жидкости в течение 5 минут.
Поправка на индикатор равна 0,01 мл 0,1н раствора AgNO3.
Расчет ведут по формуле:
где Х – количество HCN в мг;
а – количетво (мл)0,1н раствора AgNO3, взятого для осаждения;
в – количество (мл) 0,1н раствора роданида аммония, израсходованного для титрования;
К1 и К2 – коэффициенты поправок для 0,1н раствора AgNO3 и NH4CNS;
0,027 –количество (мг) HCN, соответствующее 1 мл 0,1н раствора AgNO3;
V – первоначальный объем раствора;
V1- объем раствора AgNO3, взятый для титрования;
n – навеска исследуемого материала (г).
Метод применим при исследовании свежего биологического материала.
Весовой метод
Производят отгонку синильной кислоты из объекта. Полученный после отгонки раствор подкисляют азотной кислотой до ясно кислой реакции по лакмусу, дают осадку отстояться и осадок количественно переносят на небольшой гладкий фильтр.
Если осадок серого или темного цвета, его прямо на фильтре обрабатывают 5-6мл 6н раствора аммиака (для растворения AgCN). Фильтрат подкисляют избыточным количеством 6н HNO3 и выделившийся осадок цианида серебра вновь отфильтровывают.
Осадок AgCN промывают дистиллированной водой и высушивают вместе с фильтратом; фильтр затем сжигают и осадок прокаливают во взвешенном фарфоровом тигле до постоянного веса. Остаток металлического серебра взвешивают и пересчитывают на HCN.
Формула расчета:
где Х – количество исследуемого вещества в мг;
а – вес весовой формы в мг;
F – коэффициент пересчета, равный для HCN (по Ag) 0,2505;
n – навеска исследуемого вещества.
Метод применим к исследованию как свежего, так и загнившего биологического материала животного происхождения.
2. Качественное определение
Произвести наружный осмотр дистиллятов (внешний вид, запах, наличие капель, маслянистой пленки на поверхности).
Исследовать первый дистиллят на наличие синильной кислоты. 1 мл исследуемого раствора подщелачивают 5% раствором гидроксида натрия и туда же добавляют 1-3 капли 40% раствора сульфата железа (II), содержащего следы сульфата железа (III). Смесь взбалтывают, нагревают почти до кипения, а затем охлаждают до комнатной температуры и по каплям добавляют 10% раствор соляной кислоты до слабокислой реакции (рН 3-4). Появление синего осадка или синей окраски указывают на наличие синильной кислоты.