3.2 Результаты исследований сывороток крови на наличие вгс методом ифа

Все образцы, подвергшиеся исследованию ПЦР «в режиме реального времени», изначально были протестированы методом ИФА на филиале «Станция переливания крови» УЗ «Пинская центральная поликлиника». Результат у всех образцов был положительным.

3.3 Сравнительный анализ ифа и пцр «в режиме реального времени» при выявлении вируса гепатита с

Основными методами исследования вирусного гепатита С являются имунно-ферментный анализ и полимеразная цепная реакция «в режиме реального времени». При сравнении результатов, полученных в ИФА и ПЦР, несовпадения могут быть следующими: положительный результат ИФА и отрицательный результат ПЦР. Результаты сравнительного анализа методов диагностики вирусного гепатита С представлены в таблице 2.

Таблица 2. – Сравнительный анализ методов ИФА и ПЦР «в режиме реального времени» при выявлении вирусного гепатита С

№ п/п образца	Результат ИФА	Результат ПЦР в «режиме реального времени»
		качественный	количественный
	положительный	положительный	88 200 МЕ/мл
	положительный	положительный	1 390 МЕ/мл
	положительный	положительный
	положительный	отрицательный
	положительный	отрицательный
	положительный	положительный	24 МЕ/мл
	положительный	отрицательный
	положительный	положительный	1 120 МЕ/мл
	положительный	положительный	149 470 МЕ/мл
	положительный	положительный	31 864 МЕ/мл
	положительный	отрицательный
	положительный	положительный	2 932 МЕ/мл
	положительный	положительный	10 939 МЕ/мл
	положительный	положительный	6 699 МЕ/мл
	положительный	положительный	7 536 МЕ/мл
	положительный	положительный	2 082 МЕ/мл
	положительный	отрицательный
	положительный	положительный	2 740 МЕ/мл
	положительный	положительный	33 217 МЕ/мл
	положительный	отрицательный
	положительный	положительный	23 816 МЕ/мл
	положительный	положительный	32 943 МЕ/мл
	положительный	положительный	16 494 МЕ/мл
	положительный	отрицательный
	положительный	положительный	331 МЕ/мл
	положительный	положительный
	положительный	положительный
	положительный	отрицательный
	положительный	положительный	8 346 МЕ/мл

В 27,6% исследований ИФА установлен «ложноположительный» результат. Такие расхождения результатов ИФА и ПЦР-анализа могут быть обусловлены:

1. генетически обусловленной серонегативностю ряда заболеваний, что делает их недоступными для стандартного ИФА, а при исследовании методом ПЦР обеспечивается положительный результат;

2. выявлением «иммунологического следа» – остаточного уровня IgG после ранее перенесенной инфекции;

3. видом используемого материала для исследования [54].

Применение ИФА в индикации гепатита С является косвенным методом диагностики, выявляющим опосредованную реакцию иммунной системы человека на данный вирус. Лабораторная диагностика гепатит С, в первую очередь, основывается на обнаружении в образцах сывороток или плазмы крови человека специфических антител к антигенам ВГС, относящихся к иммуноглобулинам классов G и M (анти-ВГС IgG и анти-ВГС IgM). При этом антитела IgM к оболочечным белкам (чаще к Е2) и ядерному антигену вируса начинают определяться в крови больных лишь через 2-10 недель, а иногда через несколько месяцев от начала заболевания. Поэтому положительный результат ИФА на антитела, полученный при первичном тестировании, подлежит обязательной перепроверке в дополнительных более специфичных исследованиях, чтобы исключить ненужные медицинские исследования и лишние психологические травмы. При выявлении у обследуемого человека антител к вирусу, которые могут присутствовать в крови, как при текущей инфекции, так и после выздоровления, далее наиболее важно, в клиническом плане, подтвердить или исключить текущую инфекцию.

Что касается антигенов вируса, если они и попадают в кровь, то в количествах, которые практически не улавливаются и могут быть обнаружены только в ткани печени при использовании иммунно-гистохимических методов исследования [14, 40, 41]. Это существенно ограничивает возможность обнаружения, оценки течения и активности инфекционного процесса. В такой ситуации на первое место выходит совершенствование лабораторных методов для выявления ГС-инфекции с целью ранней диагностики заболевания и предотвращения путей дальнейшей передачи этой инфекции, а в частности – максимально полное обнаружения ее скрыто протекающего компонента.

Внедрение в лабораторную практику ПЦР «в режиме реального времени» предоставило возможность использовать прямой лабораторный метод для непосредственного обнаружения генома возбудителя из небольшого количества легкодоступного биологического материала, позволяя определять РНК вируса гепатита С в детектируемых количествах через 1-3 недели после инфицирования. [54].

Таким образом, для точного определения вируса гепатита С наиболее приемлем высокочувствительный метод исследования – ПЦР в «режиме реального времени», направленный на непосредственное выявление РНК вируса гепатита С в организме человека [54].