Занятие 3

Тема: Кооперация клеток иммунной системы и формирование приобретенного гуморального иммунитета. Идиотиповые и антиидиотиповые антитела. Моноклональные антитела. Реакции антиген-антитело (Аг-Ат), их практическое применение. Реакция агглютинации.

Вопросы для обсуждения:

1. Рецепторная и медиаторная кооперация антигенпредставляющих клеток (АПК), Т- и В- лимфоцитов при развитии гуморального иммунного ответа. Генетическая регуляция синтеза антител.

2. Первичный и вторичный иммунный ответ. Иммунологическая память.

3. Т-зависимый иммунный ответ

4. Т-независимый иммунный ответ

5. Идиотиповые и антиидиотиповые антитела.

6. Моноклональные антитела, их получение.

7. Техника постановки РА на стекле и ее учет.

8. Техника постановки развернутой РА и ее учет.

9. Варианты РА: реакция непрямой агглютинации (РНГА), реакция обратной непрямой агглютинации (РОНГА), реакция коаглютинации.

Практические задания:

1. Нарисовать схему межклеточной кооперации при развитии гуморального иммунного ответа.

2. Нарисовать схему иммунного ответа на Т-независимые антигены.

3. Нарисовать схему идиотиповых и антиидиотиповых антител.

4. Дополнить схему получения моноклональных антител.

5. Поставить реакцию агглютинации (РА) на стекле исследуемой чистой культуры с диагностическими сальмонеллезными монорецепторными сыворотками, учесть и зарисовать полученные результаты. Определить вид исследуемой культуры с помощью табл.

Антитела к антигенам сальмонелл	О - 9	О - 12	Vi	Hd	Hgm	0,85% NaCl (контроль)

Рис. 2. Результаты постановки РА на стекле

Таблица 1.

Классификация сальмонелл по антигенной структуре

(сокращенный вариант)

Серогруппа, вид или серовар	О-антиген	Н-антиген
		фаза -1	фаза-2
Серогруппа А S. paratyphi A	1,2,12	a	(1,5)
Серогруппа B S. schottmuеlleri S. typhimurium	1,4,(5),12 1,4,(5),12	b i	1,2 1,2
Серогруппа C S. cholerаesuis	6,7	c	1,5
Серогруппа D S. typhi S. enteritidis S. dublin S. moscow	9,12,Vi 1,9,12 1,9,12 9,12	d g,m g,p b,g	- (1,7) - -

Выводы: на основании полученных результатов постановки РА на стекле чистой культуры диагностическими сальмонеллезными монорецепторными сыворотками установлено, что исследуемая культура бактерий относится к ______________________________________________________________________

(дописать видовое название)

3. Произвести учет результатов развернутой реакции агглютинации для определения титра антител в сыворотке крови больного с подозрением на брюшной тиф. Используя схему постановки реакции, зарисовать полученные результаты.

Таблица 2.

Схема постановки реакции агглютинации для выявления антител в сыворотке крови больного и определения их титра

Ингредиенты	Номер пробирки
	1	2	3	4	5	Контроль сыворотки	Контроль диагностикума
0,85% р-р NaСl, мл	1,0	1,0	1,0	1,0	1,0	-	1,0
Сыворотка крови больного в разведении 1:50, мл	1,0 →	1,0 →	1,0 →	1,0 →	‎ 1,0 →	→ 1,0	→ → -
Полученное разведение сыворотки крови больного	1:100	1:200	1:400	1:800	1:1600
Диагностикум, в каплях	1	1	1	1	1	1:100	1

Инкубация при 37º С в течение 2 часов, затем при комнатной температуре 18-20 часов.

Выводы: титр антител к О-антигену Salmonella typhi в сыворотке крови больного составляет 1: ____________.

Полученный результат позволяет/не позволяет подтвердить диагноз болезни (нужное подчеркнуть). Объяснить почему: __________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Подпись преподавателя __________________

Дата _____________