- •Основные характеристики возбудителя туберкулеза
- •Клеточная стенка МБТ
- •24 марта 1882 г. - доклад Роберта Коха о выделении микроорганизма, являющегося причиной
- •Современные научные знания
- •Микобактерии, вызывающие туберкулез, объединены в
- •В настоящее время возбудителями туберкулеза у человека в мире являются:
- •Нетуберкулезные микобактерии (НТМБ)
- •Основные характеристики возбудителя туберкулеза
- •Основные характеристики возбудителя туберкулеза
- •Микрокапсула МБТ
- •Цитоплазматическая мембрана МБТ
- •N.B! Жизнедеятельность МБТ обусловлена активностью различных ферментов
- •Цитоплазма МБТ
- •Размножение МБТ
- •Размножение МБТ
- •Устойчивость МБТ к неблагоприятным воздействиям внешних физических и химических факторов
- •Одно из характерных свойств МБТ - способность изменяться под воздействием внешних факторов
- •Полиморфизм МБТ
- •L-формы МБТ
- •L-формы МБТ
- •Геном МБТ
- ••4000 генов кодируют белки, которые определяют специфические особенности МБТ
- ••МБТ синтезируют все необходимые для жизнедеятельности компоненты: незаменимые аминокислоты, витамины, ферменты липидного обмена
- •Особенности генома МБТ, которые обеспечивают ДНК-полиморфизм
- ••Различия в количестве копий и локализации на хромосоме этих генетических элементов используют для
- ••В различных регионах мира распространены генетические семейства М. tuberculosis, получившие наименования Haarlem, Africa
- •Механизмы, обусловливающие лекарственную устойчивость МБТ
- •За каждым случаем возникновения лекарственной устойчивости у МБТ стоит какая-либо мутация в геноме
- •Механизмы действия противотуберкулезных препаратов
- •Механизмы действия новых противотуберкулезных препаратов
- ••Мутации в генах, отвечающих за синтез определенных белков, встречаются и у природных, «диких»
- ••При проведении правильной химиотерапии «дикие» мутанты практического значения не имеют
- ••В результате неадекватного лечения изменяется соотношение между лекарственно-устойчивыми и чувствительными МБТ – происходит
- •Клиническое значение лекарственной устойчивости микобактерий туберкулеза
- •Современная стратегия борьбы с туберкулезом направлена на излечение не менее 85% больных
- •Внастоящее время доказано:
- •Лекарственно чувствительные МБТ –
- •МБТ, устойчивые к наиболее эффективным противотуберкулезным препаратам первого ряда – рифампицину и изониазиду
- •МБТ, устойчивые к наиболее эффективным
- •Распространенность МЛУ-ТБ в мире
- ••Расчеты, проведенные экспертами ВОЗ, показывают, что на три страны мира - Китай,
- •Методы диагностики туберкулеза
- •Правильно организованный диагностический процесс и использование современных методов диагностики позволяет верифицировать диагноз в
- •Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 29.12.2014 г. № 951
- •Пути выявления больных туберкулезом
- •Симптомы туберкулеза легких Симптомы общей интоксикации
- •Симптомы туберкулеза легких Симптомы общей интоксикации
- •Симптомы туберкулеза легких Симптомы поражения органов дыхания
- •Группы лиц, подлежащих обследованию на туберкулез
- •Материал для исследования на туберкулез
- •Наиболее специфичным для туберкулеза являются обнаружение:
- •Задачи лабораторной диагностики туберкулеза
- •Прямая (простая) микроскопия мазка мокроты на наличие кислотоустойчивых микобактерий (КУМ)
- ••Отличительное свойство МБТ - кислотоустойчивость, которая проявляется в способности сохранять окраску, даже при
- •Микобактерии туберкулеза (окраска по методу Циль-Нильсена)
- •Результаты исследования мазков мокроты на КУМ, окрашенных по Цилю-Нильсену
- •Бактериоскопия с окраской мазков люминисцентными красителями (LED-микроскопия)
- •Люминисцентная бактериоскопия (LED-микроскопия)
- •Молекулярно-генетические методы диагностики туберкулеза
- •ПЦР-диагностика
- •ПЦР- Real Teim
- •Молекулярно-диагностический тест GeneXpert
- •Видовая идентификация микобактерий
- •Идентификация комплекса микобактерий туберкулеза –
- •НТМБ: возбудители микобактериозов
- •Маркеры лекарственной устойчивости МБТ
- •Определение лекарственной чувствительности МБТ
- •Определение лекарственной чувствительности МБТ
- •Определение лекарственной чувствительности МБТ
- •Бактериологические (культуральные) методы диагностики туберкулеза
- •Выделение культуры МБТ на жидких питательных средах
- •BACTEC MGIT -960
- •Технология MGIT
- •Выделение микобактерий на плотных питательных средах
- •Выделение культуры МБТ на плотных питательных средах
- •Алгоритм исследования лекарственной чувствительности МБТ
- •Определение лекарственной чувствительности микобактерий
- •Благодарю за внимание!
Наиболее специфичным для туберкулеза являются обнаружение:
МБТ
или генетических маркеров МБТ
и/ или морфологических признаков туберкулезной гранулемы
Основной метод подтверждения диагноза туберкулеза (этиологической диагностики) -
лабораторный
Задачи лабораторной диагностики туберкулеза
1.Детекция (обнаружение) микобактерий в диагностическом материале
2.Видовая идентификация микобактерий (МБТ или НТМБ)
3.Определение лекарственной чувствительности МБТ
4.Изучение молекулярной эпидемиологии (определение источника инфекции, выявление причин рецидива заболевания)
Прямая (простая) микроскопия мазка мокроты на наличие кислотоустойчивых микобактерий (КУМ)
Цель:
выявление пациентов, представляющих эпидемиологическую опасность для окружающих
Особенности:
быстрый, простой, экономически эффективный методможет быть выполнен в клинико-диагностических лабораториях
медицинских организаций всех уровнейпозволяет обнаружить КУМ при содержании более 5 000-10 000
микробных тел в 1 мл материала
позволяет визуализировать возбудителя, но не дифференцировать МБТ от НТМБ
•Отличительное свойство МБТ - кислотоустойчивость, которая проявляется в способности сохранять окраску, даже при
интенсивном обесцвечивании кислотами, щелочами и спиртом
(обусловлено высоким содержанием в клеточных стенках миколевой кислоты, липидов и восков)
•Свойство кислотоустойчивости у МБТ было установлено
П.Эрлихом в 1882 г. , подтверждено Цилем и Нильсеном в 1883 г.
•Авторы разработали специальный контрастный метод окраски, основанный на свойстве кислотоустойчивости (окраска по методу Циля-Нильсена)
•В отличие от некислотоустойчивых микобактерий МБТ
приобретают красный цвет, не обесцвечиваются при действии раствора кислоты и хорошо видны на синем фоне
Микобактерии туберкулеза (окраска по методу Циль-Нильсена)
Результаты исследования мазков мокроты на КУМ, окрашенных по Цилю-Нильсену
• Отрицательный
КУМ не обнаружены в 300 полях зрения
•Результат не оценивается 1-2 КУМ в 300 полях зрения
• Положительный
1-9 КУМ в 100 полях зрения
• Положительный (+)
0-99 КУМ в 100 полях зрения
• Положительный (++)
1-10 КУМ в 1 поле зрения
•Положительный (+++)
более 10 КУМ в 1 поле зрения
Бактериоскопия с окраской мазков люминисцентными красителями (LED-микроскопия)
Цель:
выявление пациентов, представляющих эпидемиологическую опасность для окружающих
Особенности:
чувствительность метода на 10% выше, чем бактериоскопии с окраской по ЦНпозволяет обнаружить КУМ при содержании более 1 000 микробных тел в 1
мл материала
применяется окраска мазков диагностического материала аурамином или аурамином с родамином
требуется более дорогостоящее оборудование (светодиодный (LED) излучатель
рекомендовано проводить в медицинских организациях с большим количеством исследований
