Ответы на экзамен по микробиологии 2022 года

57. Вакцинопрофилактика. Вакцины из живых бактерий и вирусов. Принципы получения вакцинных штаммов. Способы аттенуации. Примеры вакцин из живых бактерий и вирусов. Преимущества и недостатки аттенуированных вакцин.

Вакцинопрофилактика – способ предупреждения инфекционных заболеваний путём создания искусственного специфического активного иммунитета в ответ на введение в

организм вакцины.

Вакцины из живых бактерий и вирусов = живые вакцины. Относятся к первому поколению вакцин. Бывают:

Дивергентные – содержат непатогенные для человека микроорганизмы, находящиеся в близком родстве с возбудителями инфекционных заболеваний и обладающие перекрёстной иммуногенностью. Например, БЦЖ, ротавирусная, оспенная вакцина.

Аттенуированные (ослабленные) – готовят из бактерий или вирусов, утративших вирулентность, но сохранивших иммуногенные свойства. Например, чумная, туляремийная, сибиреязвенная, бруцеллёзная, БЦЖ, краснушная, коревая, паротитная, аденовирусная, полиомиелитная Сэбина…

Принципы получения вакцинных штаммов (разработаны Луи Пастером):

селекция спонтанных мутантов с пониженной вирулентностью и сохранённой иммуногенностью путём культивирования в определённых условиях;

пассирование через организм животных, устойчивых к данной инфекции.

Способы аттенуации:

длительное воздействие на штамм химических (мутагены) и физических (температура) факторов;

многочисленные пассажи через невосприимчивый организм.

Преимущества живых вакцин:

По механизму действия они напоминают дикие штаммы и вытесняют последние из организма.

Формируют прочный и длительный гуморальный и клеточный иммунитет, так как размножаются и персистируют в организме.

Легко проводить вакцинацию, так как необходимы небольшие дозы и требуется только однократная вакцинация.

Не содержат консервантов (фенол, мертиолят).

Возможность выбора разных путей введения в организм.

Недостатки живых вакцин:

Содержат до 99% балласта – реактогенны (много побочных действий).

Способны вызывать мутации клеток организма.

Трудно дозируются, требуют особых условий хранения.

Есть возможность возвращения в вирулентную форму.

Относительно нестабильны в процессе производства, транспортировки и хранения.

Живые вакцины не ставят людям с ИММУНОДЕФИЦИТАМИ!!!

91

58. Вакцинопрофилактика. Вакцины из убитых бактерий и вирусов. Приготовление. Примеры убитых вакцин. Ассоциированные вакцины. Преимущества и недостатки убитых вакцин.

Вакцинопрофилактика – способ предупреждения инфекционных заболеваний путём создания искусственного специфического активного иммунитета в ответ на введение в

организм вакцины.

Вакцины из убитых бактерий и вирусов = убитые (инактивированные) вакцины. Убитые вакцины получают из микроорганизмов, убитых физическим (нагревание, облучение, ультразвук) или химическим (фенол, формалин, ацетон) методами. Например, вакцина против клещевого энцефалита, антирабическая вакцина (против бешенства), лептоспирозная, брюшнотифозная…

Требуется проведения курса иммунизации (вакцинации), состоящего из нескольких прививок.

Преимущества убитых вакцин:

Относительная простота их получения.

Стабильны и безопасны.

Хорошо комбинируются и дозируются, не требуют особых условий хранения.

Не вызывают вакциноассоциированных заболеваний.

Применяются у людей с иммунодефицитами.

Большая устойчивость при хранении.

Недостатки убитых вакцин:

Реактогенны.

Содержат фенол.

Иммунитет непродолжительный – требуется ревакцинация.

Возможны реакции гиперчувствительности в результате повторных введений чужеродного белка.

Ассоциированные вакцины – Это комбинированные вакцины, в результате действия которых иммунитет формируется одновременно к нескольким инфекциям.

Примеры:

АКДС – из убитых коклюшных бактерий и инактивированных экзотоксинов дифтерии и столбняка.

Тривакцина – из ослабленных вирусов кори, краснухи и паротита.

Тетракокк – из анатоксинов дифтерии и столбняка, убитых коклюшных бактерий и убитых вирусов полиомиелита.

59.Молекулярные вакцины: анатоксины. Получение. Использование анатоксинов для профилактики инфекционных заболеваний. Примеры вакцин.

Анатоксины – препараты, содержащие модифицированные химическим путём экзотоксины, лишённые токсических свойств, но сохранившие высокую антигенность и иммуногенность.

Примеры:

АС-анатоксин – обезвреженный формалином экзотоксин столбняка.

92

АДС, АДС-м – дифтерийный и столбнячный анатоксины.

Трианатоксин – обезвреженные формалином экзотоксины ботулизма А, В, Е.

Тетраанатоксин – обезвреженные формалином экзотоксины ботулизма и столбняка.

Пентаанатоксин – обезвреженные формалином экзотоксины ботулизма и анатоксины газовой гангрены А и Е.

Секстаанатоксин – обезвреженные формалином экзотоксины ботулизма, газовой гангрены и столбняка.

Преимущества анатоксинов:

Стабильны.

Менее реактогенны, так как содержат только изолированные протективные антигены бактерий.

Недостатки анатоксинов:

Небольшие размеры вводимых комплексов, что приводит к быстрому выведению их из организма.

Слабые иммуногены; поэтому к ним для повышения эффективности добавляют адъюванты (например, гидроксид алюминия).

Индуцируют только антитоксический иммунитет, что не позволяет предотвратить бактерионосительство.

60.Генно-инженерные вакцины. Получение. Применение. Преимущества и недостатки.

Генно-инженерные вакцины (вакцины 3 поколения) бывают:

1.Биосинтетические – искусственно созданные антигены микробов. Для их получения используют дрожжевую клетку, в которую встраивают ген патогенного микроорганизма, отвечающий за синтез данного антигена. Например, вакцина Энджерикс против гепатита В.

2.Векторные (рекомбинантные) вакцины получают встраиванием генов различных возбудителей в геном ослабленного вируса или бактерии (вектор). Например, Спутник V (Гам-КОВИД-Вак) для профилактики COVID-19 сделан на основе аденовирусного вектора.

3.Рибосомальные вакцины – получают путём выделения микробных рибосом с матрицей иРНК. Например, Бронхомунал, Рибомунил.

Преимущества:

Меньше побочных эффектов, так как не содержат микроорганизмов.

Вызывают узкоспецифический иммунитет.

Возможно комплектование по иммуногенным свойствам.

Недостатки:

Менее эффективны, так как вирусы вариабельны.

Вопрос об идентичности естественному антигену.

Сложны и дороги.

61.Вакцинотерапия. Понятие о лечебных вакцинах. Получение. Применение. Механизм действия.

Вакцинотерапия – лечение хронических заболеваний при помощи лечебных вакцин.

93

Лечебные вакцины – вакцины, применяемые для перевода хронической стадии заболевания в острую при неэффективности антибиотикотерапии вследствие лекарственной устойчивости.

Действие лечебных вакцин основано на стимуляции иммунной системы, усилении специфических и неспецифических факторов иммунитета, способных подавлять размножение микроорганизмов, нейтрализовать и элиминировать токсические продукты.

Классификация лечебных вакцин по способу приготовления:

Убитые: бруцеллёзная, гонококковая, стафилококковая (жидкая), дизентерийная, герпетическая.

Химические: антифагин стафилококковый, протейная…

Также лечебные вакцины применяют для лечения опухолей. Такие лечебные вакцины представляют из себя набор антигенов, чаще всего полученный из опухолевых клеток пациента, которые вводятся в организм с надеждой на развитие специфической иммунной реакции, выработки специализированных антител против клеток опухоли.

62. Диагностические антигенные препараты: диагностикумы, аллергены, токсины. Получение. Применение.

Диагностические препараты с действующим началом – антиген:

диагностикумы,

аллергены,

токсины.

Аллергены – это антигены, вызывающие у чувствительных к ним людей аллергические реакции.

В зависимости от происхождения аллергены можно разделить на инфекционные и неинфекционные.

Инфекционные аллергены – препараты, содержащие взвесь убитых микробных клеток или растворимых антигенов возбудителей, используемые для выявления сенсибилизированных Т- лимфоцитов.

Цель применения:

1.Специфическая диагностика инфекционных заболеваний, сопровождающихся аллергической перестройкой организма.

2.Ретроспективная диагностика перенесённых инфекционных заболеваний.

3.Определение наличия прививочного иммунитета; отбор лиц, подлежащих вакцинации.

Способ применения: инфекционные аллергены используют для постановки кожноаллергической пробы по типу гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ).

Примеры: туберкулин, бруцеллин, тулярин, антраксин, токсоплазмин, орнитин и др.

Неинфекционные аллергены: пыльцевые, бытовые, пищевые, промышленные, сывороточные и др.

Цель применения: определение чувствительности макроорганизма к чужеродному белку.

94

Способ применения: сывороточные аллергены используют для постановки кожноаллергической пробы по типу гиперчувствительности немедленного типа (ГНТ).

Примеры: нормальная сыворотка 1:100, глобулин 1:100.

Токсины – препараты, содержащие бактериальные экзотоксины в малых безвредных дозах.

Применение: для определения напряжённости антитоксического иммунитета к соответствующему возбудителю. Вводят внутрикожно и наблюдают за реакцией.

Примеры: токсин Шика (из экзотоксина дифтерийной палочки) ставится для выявления антитоксического противодифтерийного иммунитета; токсин Дика (из экзотоксина стрептококка).

Примечание: эти пробы в настоящее время не применяются и представляют только исторический интерес.

Диагностикумы – взвесь убитых микробов или их отдельные антигены.

Цель применения: в иммунных реакциях для обнаружения антител к данному виду микроба в сыворотке крови больного или определения титра антител в парных сыворотках больного (серодиагностика).

Классификация диагностикумов:

Корпускулярные – из целых микробных клеток или вирусных частиц. Например, бруцеллёзный, коклюшный, дизентерийный…

Монодиагностикумы – из отдельных антигенов микробной клетки. Например, сальмонеллёзный Н-диагностикум, холерный О-диагностикум.

Эритроцитарный – препараты, содержащие антигены, адсорбированные на эритроцитах, обработанных танином. Используют в реакции непрямой или пассивной гемагглютинации (РНГА/РПГА). Например, эритроцитарный дифтерийный диагностикум.

63.Иммунные сыворотки. Современная классификация сывороток. Получение, очистка, применение. Требования, предъявляемые к сывороточным препаратам.

Сыворотки – иммунобиологические препараты, содержащие антитела, обеспечивающие пассивный иммунитет к возбудителям инфекционных болезней.

Сыворотки используют для лечения и для профилактики.

Иммунитет, создаваемый сывороточными препаратами, проявляется сразу после введения препарата, продолжительность его 2-4 недели.

Классификация лечебных сывороток:По способу очистки:

oНативные сыворотки – гипериммунные сыворотки, освобождённые от форменных элементов крови и фибрина. Наряду с антителами содержат не выполняющие

иммунных функций альбумины, обусловливающие сенсибилизацию организма.

oОчищенные сыворотки – гипериммунные сыворотки, освобождённые от балластных веществ, не являющихся носителями антител, обладают сниженными сенсибилизирующими свойствами.

95

oГамма-глобулины (чистые антитела, иммуноглобулины) – очищенные и концентрированные препараты гамма-глобулиновой фракции сывороточных белков, содержащие высокие титры антител. Очищены методом фракционирования этиловым спиртом при t ниже 0oC от альбуминов, альфа-, бета-

глобулинов. Например, иммуноглобулин донорский против клещевого энцефалита.

По способу получения:

oГетерологические – получают из сыворотки крови гипериммунизированных животных, при использовании могут приводить к сенсибилизации организма. Для

её предупреждения используют способ дробного введения (специфическая десенсибилизации по А.М. Безредка). Циркулируют в организме 2-3 недели.

Например, противогангренозная лошадиная сыворотка 5000 МЕ.

oГомологические – получают из сыворотки крови иммунизированных доноров. Они не обладают сенсибилизирующим действием на организм. Циркулируют в организме 4-5 недель. Например, иммуноглобулин донорский против гепатита В.

По механизму действия:

oАнтибактериальные – содержат комплекс антител: агглютинины, опсонины, преципитины, способствующие потере подвижности бактерий и их лизису.

Примеры: противотифозная, противодизентерийная, противочумная, противосибиреязвенная и др.

oАнтивирусные – содержат специфические антитела, нейтрализующие вирусы.

Примеры: противогриппозная, антирабическая, против клещевого энцефалита

и др.

oАнтитоксические – содержат антитела, нейтрализующие токсины (антитоксины). Приобрели наибольшее распространение, т.к. дают быстрый терапевтический эффект благодаря нейтрализации микробного токсина в организме больного. Активность иммунных сывороток выражают в международных антитоксических единицах (МЕ). Сила действия антитоксина ≥ 3000 МЕ. Примеры:

противостолбнячная 5000 МЕ, противоботулиническая 3000 МЕ, противодифтерийная 10000 МЕ, противогангренозная 5000 МЕ и др.

Цель применения сывороток и иммуноглобулинов – экстренная профилактика и лечение инфекционных заболеваний, создание искусственного пассивного иммунитета.

Требования к сывороткам:

Не должны вызывать аллергических реакций.

Не должны содержать консервантов, возбудителей ВИЧ и гепатитов.

Должны вызывать стойкий пассивный иммунитет.

64.Антитоксические сыворотки, применяемые для лечения и профилактики инфекционных заболеваний. Способы получения. Осложнения при использовании и их предупреждение.

Антитоксические – содержат антитела, нейтрализующие токсины (антитоксины). Приобрели наибольшее распространение, т.к. дают быстрый терапевтический эффект благодаря нейтрализации микробного токсина в организме больного. Активность иммунных сывороток

96

выражают в международных антитоксических единицах (МЕ). Сила действия антитоксина ≥ 3000 МЕ. Примеры: противостолбнячная 5000 МЕ, противоботулиническая 3000 МЕ, противодифтерийная 10000 МЕ, противогангренозная 5000 МЕ и др.

Для получения антитоксических сывороток проводят гипериммунизацию (многократное введение) лошадей токсинами. Антитоксические сыворотки используют для создания антитоксического иммунитета, т.е. для лечения и профилактики токсинемических инфекций (ботулизма, столбняка, газовой гангрены, дифтерии).

После введения антитоксических сывороток возможны осложнения в виде анафилактического шока и сывороточной болезни, поэтому перед введением препаратов ставят аллергическую пробу на чувствительность к ним пациента, а вводят их дробно по Безредке.

65. Антительные препараты – сыворотки, применяемые для диагностики инфекционных заболеваний. Способы получения. Применение.

Диагностические сыворотки – препараты, содержащие антитела, полученные из сыворотки крови гипериммунизированных животных (лошадей, кроликов, морских свинок) и применяемые для диагностики инфекционных заболеваний.

Классификация диагностических сывороток:

По составу:

oПоливалентные – содержат антитела к комплексу антигенов, общих для родственных микроорганизмов, используются для определения рода возбудителя (сероиндикация).

oМоновалентные – содержат антитела к одному виду возбудителя, используются для определения вида возбудителя (сероидентификация).

oМонорецепторные – содержат антитела к одному специфическому антигену, используются для определения специфического антигена возбудителя (сероидентификация).

По типу серологических реакций, в которых они используются:

oАгглютинирующие сыворотки – содержат антитела-агглютинины, под влиянием которых происходит склеивание (агглютинация) микробов, что сопровождается выпадением осадка в виде хлопьев или зёрен. Применяются для определения

рода, вида, типа возбудителя в реакции агглютинации (РА). Пример:

агглютинирующая лептоспирозная сыворотка.

oПреципитирующие сыворотки – содержат антитела-преципитины, под действием которых происходит осаждение растворимых мелкодисперсных антигенов с образованием кольца или полос преципитации. Применяются для постановки

реакции преципитации (РП). Пример: преципитирующая противосибиреязвенная сыворотка.

oГемолитические сыворотки – содержат антитела-гемолизины, полученные при иммунизации животных эритроцитами другого вида животного. Применяются для постановки реакции связывания комплемента (РСК).

oЛюминесцирующие сыворотки – содержат антитела, меченные по Fc-фрагменту флюорохромом. Применяются для постановки прямой и непрямой реакции

97

иммунофлюоресценции (РИФ). Примеры: люминесцирующая дизентерийная сыворотка (для прямой РИФ), антиглобулиновая сыворотка, меченная ФИТЦ (для непрямой РИФ).

oСыворотки, меченные ферментом – содержат антитела, меченные по Fc-

фрагменту пероксидазой хрена, щелочной фосфатазой, β-галактозидазой. Применяются для постановки прямого и непрямого иммуноферментного анализа

(ИФА). Примеры: сыворотка против гепатита В, меченная пероксидазой (для прямого ИФА), антиглобулиновая сыворотка, меченная пероксидазой (для

непрямого ИФА).

oАнтиглобулиновые сыворотки – содержат антитела, специфичные иммуноглобулинам человека (или животных) определённого класса, например, анти-Ig G или анти-IgM антитела. Как правило, эти сыворотки мечены флюорохромами или ферментом, поэтому используются в непрямой РИФ или непрямом ИФА. Примеры: антиглобулиновая сыворотка, меченная ФИТЦ (для непрямой РИФ), антиглобулиновая сыворотка, меченная пероксидазой (для

непрямого ИФА).

oАнтитоксические (нейтрализующие) сыворотки – содержат антитоксические антитела-антитоксины. Сила действия антитоксина < 3000 МЕ. Применяются для постановки реакции нейтрализации (РН). Примеры: противоботулиническая сыворотка тип А 400 МЕ, противогангренозная сыворотка 500 МЕ.

oАнтивирусные, антириккетсиозные, антигрибковые, антипротозойные сыворотки используются в РТГА, РСК, РН и др. реакциях.

Цель использования – обнаружение и идентификация специфических антигенов возбудителей (определение рода, вида, варианта возбудителя).

Способ применения: используются только in vitro, в иммунных серологических реакциях.

66. Химиотерапевтические препараты. Понятие о химиотерапевтическом индексе. Основные группы химиотерапевтических препаратов, механизм их антибактериального действия.

Химиотерапия – это этиотропное лечение инфекционных заболеваний или злокачественных опухолей, которое заключается в избирательном (селективном) подавлении жизнеспособности возбудителей инфекции или опухолевых клеток химиотерапевтическими средствами.

Химиотерапевтические препараты – это лекарственные средства, которые применяют для избирательного подавления роста и размножения микробов, являющихся причиной инфекционного заболевания.

Кантимикробным химиотерапевтическим средствам относят следующие:

антибиотики (способны воздействовать только на клеточные формы микроорганизмов);

синтетические антимикробные химиотерапевтические препараты разного химического строения (среди них есть препараты, которые действуют только на клеточные формы микробов или только на вирусы).

98

Лечебная ценность препаратов измеряется химиотерапевтическим индексом (ХТИ), предложенным П. Эрлихом.

ХТИ – это соотношение максимально переносимой (толерантной) дозы химиопрепарата к его минимальной лечебной или ингибирующей дозе. Эта величина должна быть более 3. Чем выше ХТИ, тем эффективнее препарат.

ХТИ = Dosis tolerantia (максимальная переносимая доза) / Dosis curative (минимальная терапевтическая доза) = > 3

Химиотерапевтические препараты

67. Антибиотики. Классификация по способу получения, механизму и спектру действия.

Антибиотики – химиотерапевтические вещества, продуцируемые микроорганизмами, животными клетками, растениями, а также их производные и синтетические продукты, которые обладают избирательной способностью угнетать и задерживать рост микроорганизмов, а также подавлять злокачественные образования.

99

Первый природный антибиотик был открыт в 1929 году английским бактериологом А. Флемингом при изучении плесневого гриба Penicillium notatum. Он обнаружил вещество, препятствующее росту бактериальной культуры, и назвал его пенициллином.

Влияние антибиотиков на микроорганизмы:

Бактериостатическое действие (задержка роста и размножения): макролиды, тетрациклины, хлорамфеникол.

Бактерицидное действие (разрушающее действие – гибель бактерий): аминогликозиды, пенициллины, цефалоспорины, карбапенемы.

Классификация антибиотиков по способу получения:

Природные: бензилпенициллин (из грибов), цефалоспорин С (из грибов), стрептомицин (из актиномицет), канамицин (из актиномицет)…

Синтетические: левомицетин, меропенем.

Полусинтетические: ампициллин, карбенициллин, рифампицин.

Классификация антибиотиков по спектру действия:

Широкий спектр действия в отношении Гр+ и Грмикроорганизмов (тетрациклины, стрептомицин).

Узкий спектр действия в отношении Гр+ или Грмикроорганизмов (например, противотуберкулёзные средства).

Классификация антибиотиков по механизму действия на микроорганизм:

Ингибиторы синтеза клеточной стенки: пенициллины (бензилпенициллин, метициллин, оксациллин, ампициллин, амоксициллин, карбенициллин), монобактамы (азтреонам), цефалоспорины (цефазолин, цефотаксим, цефтриаксон), карбапенемы, гликопептиды (ванкомицин), бацитрацин, циклосерин.

Ингибиторы синтеза белка:

oДействующие на 30S субъединицу рибосом: тетрациклины, аминогликозиды (стрептомицин, канамицин, гентамицин).

oДействующие на 50S субъединицу рибосом: макролиды (эритромицин), хлорамфеникол (левомицетин), линкомицин.

Ингибиторы синтеза нуклеиновых кислот: рифампицин.

Ингибиторы функций ЦПМ: полимиксины.

68.Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам.

Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам делятся на 2 группы: диффузионные и методы разведения.

Определение чувствительности бактерий к антибиотикам:диффузионные методы:

oс использованием дисков с антибиотиками (диско-диффузионный метод, метод бумажных дисков),

oс помощью Е-тестов,

методы разведения:

oразведение в жидкой питательной среде (бульоне),

100