- •Вопросы для самоподготовки
- •Литература
- •Материал для исследований
- •Среды для выделения микробов семейства кишечных
- •Среды для идентификации микробов семейства кишечных
- •Среды для холерного вибриона
- •Лабораторная диагностика кишечных инфекций
- •Этапы бактериологического исследования
- •Шигеллезы
- •Брюшной тиф и пара тифы
- •Сальмонеллезы
- •Серологическая диагностика Эшерихиозы
- •Биологический метод
- •Ускоренные методы диагностики
- •Лабораторная диагностика холеры
- •4 Этап.
- •Серологический метод
- •Ускоренные методы обнаружения холерных вибрионов
- •Препараты для диагностики кишечных инфекций
- •Терапия кишечных инфекций
- •Препараты для специфического лечения и профилактики кишечных инфекций
- •Задания к лабораторному занятию
Серологическая диагностика Эшерихиозы
С помощью реакции агглютинации на стекле при использовании набора ОК-диагностических сывороток (1:10) против патогенных сероваров кишечной палочки ориентировочно относят выделенную культуру к определенному серовару. Далее осуществляют развернутую реакцию агглютинации, с помощью которой выявляют О- и К-антигены бактерий. Диагностическую сыворотку разводят в рядах пробирок до титра, который указан на этикетке ампулы для О- и К- агглютининов. Для выявления К- антигенов в один ряд пробирок вносят смытую со скошенного агара нагретую культуру, для выявления О-антигена используют кипяченую в течение 1-2 часов взвесь бактерий. Кипячение вызывает разрушение К-антигена, который расположен поверхностнее О-антигена и угнетает последний. Пробирки помещают на сутки в термостат при температуре 37Сº. Гомологичные сыворотке штаммы агглютинируются до титра или до половины титра.
Шигеллезы
Применяется реакция агглютинации с дизентерийными диагностикумами. На 5-8 й день болезни используется РНГА с эритроцитарными диагностикумами Флекснера и Зонне, титр которых 1:160 и выше. РНГА проводят повторно с интервалом не менее 7 дней. Диагностическое значение имеет нарастание титра антител в 4 раза, которое выявляется с 10-12 дня болезни. Диагностическим титром при дизентерии, вызванной шигеллами Флекснера, считают разведение 1:200, а шигеллами Зонне-1:100.
Брюшной тиф и пара тифы
Широко применяется реакция агглютинации Видаля, основанная на обнаружении в сыворотке крови людей агглютининов, которые появляются в конце 1 й – начале 2 й недели заболевания и на изучении динамики нарастания и длительности сохранения антител. Сыворотку последовательно разводят в трех параллельных рядах пробирок от 1:100 до 1:1600 и вносят О-диагностикумы (обычные или эритроцитарные): в пробирки первого ряда – брюшно-тифозный, второго – паратифозный А и третьего – паратифозный В. Применение О-диагностикумов позволяет выявить О-антитела, которые появляются в крови на второй неделе заболевания и исчезают к его концу. Диагностический титр антител в реакции Видаля у неиммунизированных 1:200 и выше. Выявление Н-антител не представляет диагностической ценности, так как они обнаруживаются у больных в конце заболевания, а также у переболевших (анамнестическая реакция Видаля) и вакцинированных (прививочная реакция Видаля).
Более чувствительной и чаще дающей положительные результаты является РНГА с эритроцитарными монорецепторными диагностикукмами О9, О12 и Vi. Антитела к О-антигенам выявляются начиная со 2-й недели от начала болезни, а к Vi-антигенам в более позднем периоде. Vi-антитела чаще обнаруживаются у бактерионосителей сальмонелл брюшного тифа.
Сальмонеллезы
Используется реакция агглютинации и РНГА, которые можно применять с первых дней заболевания с обязательным повторным исследованием через 7-10 дней для нарастания титра специфических антител. При проведении этих реакций применяются сальмонеллезные поливалентные и групповые (групп А, В, С, Д, Е) диагностикумы (корпускулярные или эритроцитарные). Диагностическое значение имеет повышение титра антител в 2-4 раза.
Наряду с бактериологическим и серологическим методами для диагностики брюшного тифа и дизентерии применяется аллергологический метод.
Для диагностики брюшного тифа применяется внутрикожная аллергическая проба с Vi-тифином брюшно-тифозных бактерий, которая становится положительной в периоде выздоровления и может быть использована для ретроспективной диагностики.
Для диагностики шегеллезов применяется внутрикожная аллергическая проба с дизентерином Цуверкалова, которая имеет вспомогательное значение. Она становится положительной у больных дизентерией с 4 дня болезни и позже. Результат учитывают через 24 часа по размерам образовавшейся папулы. При наличии отека и гиперемии кожи диаметром 35мм и более проба считается резко положительной, 20-34 мм умеренно-положительной, при гиперемии без папулы размером 10-15мм-сомнительной и гиперемии менее 10мм - отрицательной.
