2.2.2.2 Приготовление и исследование микропрепаратов из плодов и семян

При микроскопическом анализе цельных плодов и семян рассматривают микропрепараты кожуры или околоплодника с поверхности или делают поперечные срезы. Для приготовления препаратов кожуры 2-3 семени или плода кипятят в пробирке в растворе едкой щёлочи в течение 1-2 минут (при очень тёмнопигментированных покровах кипятят дольше – до просветления), затем помещают на предметное стекло, препаровальными иглами снимают отдельные её слои и рассматривают их в растворе глицерина или хлоральгидрата.

Для приготовления срезов сухие плоды и семена предварительно увлажняют, поместив их на сутки во влажную камеру (влажной камерой служит эксикатор, куда налита вода и несколько капель хлороформа), или размягчают в водяных парах, для чего в конической колбе кипятят небольшое количество воды, помещая над паром на стеклянной палочке семена или плоды в марле, но не погружая их в воду. Размягчение продолжают 15-30 минут или более, в зависимости от твёрдости плодов или семян. После этого приступают к приготовлению срезов.

Мелкие, плоские семена, которые трудно держать пальцами, режут в пробке, как при подготовке срезов из листьев и трав.

Мелкие, круглые или гладкие семена, не удерживающиеся в пробке, помещают в парафиновый блок размером 0,5×0,5×1,5 см. Парафин расплавляют с узкой стороны блока кончиком нагретой препаровальной иглы и в образовавшуюся ямку быстро помещают сухое семя. Допускается предварительно размягчить семя во влажной камере. Срезы делают бритвой через объекты с парафином, помещают на предметное стекло, удаляют парафин препаровальной иглой или отмывают бензином и рассматривают в растворе хлоральгидрата под микроскопом. При анализе порошка из плодов и семян проводят качественные реакции для выявления содержимого клеток и строения эндосперма, зародыша, кожуры или околоплодника.

Приготовление микропрепаратов из порошка плодов и семян аналогично приготовлению их из порошка листьев, цветков.

Для определения крахмала в порошке готовят два препарата. В растворе йода (раствор Люголя), от которого крахмал синеет, определяют его наличие, а в воде - форму, строение и величину зёрен крахмала.

Для определения наличия жирного и эфирного масел в порошке готовят препарат в растворе судана III. Для обнаружения масел препарат подогревают. Капли жирного и эфирного масла окрашиваются в оранжевый цвет.

Для определения наличия слизи в порошке препарат готовят в растворе чёрной туши и тотчас рассматривают под микроскопом при малом увеличении. Слизь заметна в виде бесцветных масс на чёрном фоне, которые при лёгком надавливании препаровальной иглой растекаются.

При исследовании строения клеток кожуры и околоплодника в порошке из плодов и семян, содержащих крахмал или незначительное количество жирного масла, препарат готовят в растворе хлоральгидрата при лёгком подогревании. При исследовании объектов, богатых жирными маслами, порошок обезжиривают и просветляют.

Для обезжиривания порошок сырья помещают в пробирку с притёртой пробкой и заливают 2-3 раза смесью спирта с эфиром (1:3) и после настаивания каждый раз в течение 20 минут растворитель сливают. Вместо смеси спирта с эфиром для обезжиривания можно использовать бензол, ксилол или эфир.

Для просветления насыпают 0,5-1 г порошка в фарфоровую чашку, прибавляют 5-10 мл разведённой азотной кислоты и кипятят в течение 1 минуты, затем жидкость процеживают через ткань и порошок промывают горячей водой. Остаток с ткани собирают лопаточкой обратно в фарфоровую чашку, обливают 5-10 мл раствора едкой щёлочи, кипятят в течение 1 минуты, снова процеживают и промывают горячей водой. После этого порошок рассматривают в растворе глицерина под микроскопом.