Выражение результатов определения активности ферментов

Единица активности (Е) фермента - количество фермента, которое катализирует превращение 1 мкмоль субстрата (или образование 1 мкмоль продукта реакции) за 1 мин при заданных условиях. При этом необходимо указывать температуру, при которой проводилась ферментативная реакция. Активность ферментов в сыворотке или плазме крови следует выражать в единицах на 1 л.

Возможно выражение результата в каталах (долях катала) на литр (1 мкат = 60 ЕД).

Лактатдегидрогеназа

ЛДГ— гликолитический фермент, обратимо катализирующий окисление лактата в пировиноградную кислоту.

L-лактат + НАД ↔ пируват + НАДН + Н⁺

Активность в тканях: практически во всех органах, нааибольшая активность в почках, сердечной мышце, скелетной мускулатуре и печени. Много в эритроцитах.

Требования к материалу: полное отсутствие гемолиза (ЛДГ в эритроцитах ↑ в 100 раз, чем в сыворотке).

Определяют спектрофотометрическими и колориметрическими методами.

Норма в сыворотке – до 195 МЕ (при 25⁰С).

Клиническое значение определения активности лдг сыворотки крови

Инфаркт миокарда. ↑ЛДГ спустя несколько часов после ИМ , max через 36_48 ч (в 10—15 раз по сравнению с нормой). У больных стенокардией не повышается. Диагностическая точность при трансмуральном инфаркте 97±1,7% .

Заболевания печени. ↑ЛДГ в сыворотке при поврежедении целостности гепатоцитов- паренхиматозная желтуха. При механической желтухе в начале заболевания активность ЛДГ в норме, а на более поздних стадиях ↑ ЛДГ.

Прогрессирующая мышечная дистрофия ↑ЛДГ

Активность ЛДГ возрастает также при хронических лимфогранулематозах, лейкозах, пернициозной анемии и других заболеваниях

Изоферменты лдг и их диагностическое значение

Активность изоферментов ЛДГ в сыворотке крови в порядке убывания: ЛДГ₂ > ЛДГ₁ > ЛДГ₃ > ЛДГ₄ > ЛДГ₅.

Изоферменты ЛДГ в лейкоцитах в норме: ЛДГ₃ > ЛДГ₂, > ЛДГ₄ > ЛДГ₁ > ЛДГ₅.

Инфаркт миокарда: ↑↑↑ ЛДГ₁, ↑ ЛДГ₂. ЛДГ₁/ЛДГ₂ > 1. Изменения в активности изоферментов сохраняются дольше, чем суммарной активности фермента. При неясной клинической картине и нормальной общей активности ЛДГ повышение активности ЛДГ₁ указывает на мелкие некротические очаги в миокарде, не регистрируемые другими способами.

Паренхиматозная желтуха: ↑↑↑ ЛДГ₅ и ЛДГ₄, ↓ЛДГ₁ и ЛДГ₂.

Мышечные дистрофии: в мышечной ткани ↓↓ЛДГ₄ и ЛДГ₅ (степень снижения коррелирует с тяжестью заболевания), ↑↑ ЛДГ₁, ЛДГ₂, и ЛДГ₃. В сыворотке крови ↑↑ ЛДГ₁, ЛДГ₂ и ЛДГ₃.

Диагностическое значение изоферментов лдг

Острый лейкоз: ↑↑↑ ЛДГ₂, ↑ЛДГ₃ . Прямо пропорциональная зависимость между увеличением ЛДГ₂ и количеством незрелых клеток.

Опухолевые заболевания: ↑↑ ЛДГ₃ ЛДГ₄ и ЛДГ₅ в опухолевой (приближение к эмбриональному типу). Различия между злокачественными и доброкачественными максимальны по ЛДГ₅. Степень изменения спектра изоферментов коррелирует с ростом опухоли.

Заболевания легких: ↑↑ ЛДГ₃ при пневмониях. При выраженной гипоксии ↑ЛДГ₄ и ЛДГ₅ (активация гликолиза в связи с перестройкой метаболизма на анаэробный тип).

Аминотрансферазы (трансаминазы) сыворотки.

АсАТ и АлАТ осуществляют межмолекулярный перенос аминогрупп между аминокислотами и кетокислотами. Отличаются по названиям аминокислоты, от которой отщепляется аминогруппа.

Содержание АсАТ в тканях (по убывающей) – сердечная мышца, печень, скелетная мускулатура, головной мозг, почки, семенники. Активность в сердечной мышце в 10000 раз выше, чем в сыворотке. В эритроцитах – в 10 раз больше, чем в сыворотке. Поэтому сыворотка не должна содержать даже следов гемолиза.

Содержание АлАТ в тканях (по убывающей)– печень, поджелудочная, сердце, скелетная мускулатура.

Методы определения: спектрофотометрические, колориметрические, хроматографические.

Норма в сыворотке: АсАТ — 10-30 МЕ/л при 30˚С; АлАТ — 7-40 МЕ/л при 30˚С.