Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
дипломная работа-чистовик.doc
Скачиваний:
2
Добавлен:
01.05.2025
Размер:
2 Мб
Скачать
☆

2 Этап - проведение пцр (амплификация):

- ПЦР-бокс с УФ-лампой;

- программируемый термостат амплификатор;

- микроцентрифуга-вортекс 1,5-3тыс.об/мин;

- пипетка-дозатор переменного объема 5 - 50 мкл для работы с биопробами;

- пипетки-дозаторы переменного объема ( 0,5 - 10; 5-50; 20-200; 100-1000 мкл) для приготовления рабочей смеси реагентов ;

- одноразовые полипропиленовые микропробирки 0,5 мл (или 0,2 мл) для амплификации;

- одноразовые наконечники до 200 мкл и до 1000 мкл для приготовления рабочей смеси реагентов ;

- одноразовые наконечники с фильтром (аэрозольным барьером) до 100 или до 200 мкл для биопроб;

- штатив для пробирок 0,5 мл (или 0,2 мл) «рабочее место»;

- штативы для наконечников 200 мкл;

- одноразовые перчатки;

- емкость для сброса использованных наконечников;

- холодильник с морозильной камерой для хранения исходных реагентов;

- комплект реагентов для проведения ПЦР (индивидуален для каждого возбудителя);

3 Этап - детекция продуктов амплификации:

- камера для горизонтального электрофореза;

- источник постоянного тока с напряжением не менее 150 В;

- УФ-трансиллюминатор;

- СВЧ-печь для плавления агарозы;

- технические весы для взвешивания агарозы;

- аквадистиллятор;

- видеосистема для документирования гель-электрофореграмм со светозащитным кабинетом или тубусом, подключенная к персональному компьютеру;

- пипетка-дозатор переменного объема 5 - 50 мкл для нанесения образцов на гель;

- пипетка-дозатор переменного объема 100-1000 мкл;

- одноразовые наконечники до 200 мкл для нанесения образцов;

- одноразовые наконечники до 1000 мкл;

- штатив для пробирок 0,5 мл (или 0,2 мл) «рабочее место»;

- агароза, раствор бромистого этидия, 50хТАЕ буфер для приготовления геля и проведения электрофореза (или готовый комплект реагентов для электрофоретической детекции);

- пластиковая емкость большого объема для дезактивации буфера и гелей;

СОСТАВ НАБОРОВ РЕАГЕНТОВ для ПЦР

В состав набора реагентов входят три комплекта :

1. Комплект для пробоподготовки (выделения днк)

« Набор для выделения ДНК из биоптата для ХЕЛИКОПОЛ» (кат № 020104 ) (на 50 образцов):

1. Лизирующий раствор..................................................... 5 мл

2. Раствор I 25 мл

3. Раствор II 10 мл

3. Раствор III 100 мл

4. Cорбент 1 мл

5. ТЕ буфер 2.5 мл

2. Комплекты для проведения пцр (амплификации)

Рассчитаны на проведение анализа 50 исследуемых образцов, 5 положительных

контрольных образцов и 5 отрицательных контрольных образцов.

ХЕЛИКОПОЛ (кат № 010111):

Реакционная смесь 150 мкл

Taq-полимераза (5 ед/мкл) 15 мкл

Разбавитель 1 мл

Минеральное масло 1 мл

ДНК контрольная H.pylori 25 мкл

3. Комплект для детекции продуктов амплификации

Для детекции продуктов амплификации можно использовать как готовые комплекты, так и отдельные реагенты.

Готовые комплекты:

Комплект №1 (кат №030106) (на 100 –150 образцов)

агароза-2х2г, 50хТАЕ буфер-25 мл, раствор бромистого этидия-30мкл

Комплект №2 (кат №030107) (на 120 образцов)

2% агарозный гель (40 лунок) –3шт, 50хТАЕ буфер-25 мл

Отдельные реагенты:

- Агароза (100г/уп; 2г/уп) (кат №030101)

- Раствор бромистого этидия (1мл/уп) (кат №030104)

- 50хТАЕ буфер (200 мл/уп; 120мл/уп) (кат №030102)

- 2% агарозный гель для электрофореза ( 40 лунок)(1шт/уп; 5шт/уп)(кат №030108)