Лабораторная работа №7 определение содержания крахмала (в зерне, муке, мучнистых материалах)
Методика основана на взаимодействии крахмала с йодом в присутствии йодида калия. Продукт адсорбции окрашен в интенсивно-синий цвет; оттенок окраски зависит от происхождения крахмала (картофельный, кукурузный, ячменный, пшеничный и т.д.). Длины волн, соответствующие максимуму светопоглощения, находятся в диапазоне 560-640 нм.
Реактивы: раствор йода в йодистом калии; стандартный раствор крахмала, образцы муки, речной песок.
Оборудование: пробирки, пипетки, фотоэлектроколориметр, кюветы, колбы, мерная колба на 500 мл, водяная баня, весы.
Порядок выполнения работы.
7. 1. Построение градуировочного графика
В 6 пробирок последовательно помещают 0, 2, 4, 6, 8, 10 мл стандартного раствора крахмала. Его объем в каждом стакане доводят до 10 мл (соответственно добавляют 10, 8, 6, 4, 2 и 0 мл) и перемешивают. Полученные растворы содержат в 10 мл соответственно 0; 1,0; 2,0; 3,0; 4,0; и 5,0 мг крахмала. К каждому раствору добавляют 1,0 мл раствора йода. На фотоэлектроколориметре в кюветах с длиной слоя 1 см измеряют оптическую плотность окрашенных в синий цвет растворов при длине волны от 400 до 650 нм через каждые 50 нм (для 2…3 растворов по заданию преподавателя). Контрольным является раствор, не содержащий крахмала. В каждой пробе проводят измерения 3 раза.
По полученным результатам (средние из трех параллельных измерений) строят график в координатах: оптическая плотность раствора – длина волны, нм. По графику определяют длину волны, при которой наблюдается максимум светопоглощения (максимальное значение оптической плотности). При этой длине измеряют оптическую плотность оставшихся растворов. По полученным данным строят калибровочный график при оптимальной длине волны в координатах: содержание крахмала, мг/10 мл – оптическая плотность.
7. 2. Ход определения содержания крахмала в пробе
Навеску муки, содержащей 100…500 мг крахмала (для зерна и муки 0,5 ± 0,0002 г), тщательно растирают в фарфоровой чашке. При необходимости добавляют 20 мл дистиллированной воды и примерно 10 г речного песка.
При анализе зерна измельченную навеску количественно переносят в колбу вместимостью 500 мл, добавляют примерно 300 мл теплой (50 0С) дистиллированной воды и нагревают на водяной бане до 95 0С. Струей водопроводной воды колбу охлаждают до комнатной температуры. Раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 500 мл, доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают.
Полученный раствор отфильтровывают через бумажный фильтр высокой плотности. К 10 мл прозрачного фильтрата добавляют 1 мл йода. Измеряют оптическую плотность окрашенного в синий цвет раствора в кюветах с толщиной слоя 1 см при оптимальной длине волны (определенной ранее). Для контроля используют раствор из 10 мл воды и 1 мл раствора йода. По градуировочному графику находят содержание содержание крахмала в анализируемом растворе, мг/10 мл.
Содержание крахмала в пробе Хкр в % масс. рассчитывают по формуле:
где g – найденное по градуировочному графику содержание крахмала, мг/10 мл;
V – общий объем раствора, мл;
m – масса анализируемой пробы, г.