Контрольні запитання і завдання

1. Назвіть|накликайте| органічні кислоти, які отримують|одержують| мікробіологічним синтезом.

2. Які мікроорганізми є|з'являються| продуцентами лимонної кислоти?

3. Які речовини, що входять до складу поживного|живлячого| середовища|середи|, є|з'являються| джерелами вуглецю, азоту, фосфору, макро– і мікроелементів?

4. Напишіть сумарне рівняння процесу утворення лимонної кислоти.

5. Які методи вивчення біохімічної активності культури застосовуються в цій роботі?

6. Назвіть|накликайте| основні технологічні стадії виробництва лимонної кислоти.

7. Як розрахувати вихід лимонної кислоти?

8. Що таке продукуюча здатність|здібність| культури?

9. Як відрізнятиметься величина продукуючої здатності плівок гриба Аspergillus niger однакової маси, використовуваних для біосинтезу лимонної кислоти, якщо на титрування однієї культуральної рідини пішло 10 мл 0,1 н розчину NaОН, а іншої – 2,5 мл?

10. Які методи використовують для виділення лимонної кислоти з|із| культуральної рідини?

11. Охарактеризуйте морфологічні особливості грибів роду Aspergillus.

12. Охарактеризуйте титрометричний метод визначення лимонної кислоти в культуральній рідині.

13. Охарактеризуйте фактори, що впливають на продуктивність штаму гриба–продуцента лимонної кислоти.

14. Визначте оптимальні умови культивування грибів роду Aspergillus для отримання лимонної кислоти.

15. Наведіть альтернативні субстрати для культивування продуцентів лимонної кислоти.

Література: [].

Лабораторна робота № 4.2

Виробництво та визначення лужних протеаз

Мета роботи – визначити концентрації лужних протеаз, отриманих шляхом мікробного синтезу.

Основні завдання роботи

Лабораторна робота проводиться на двох заняттях: на першому – готують модифіковане поживне середовище Чапека, встановлюють рН=8, стерилізують і засівають культурою гриба Aspergillus niger; на другому – проводять дослідження та визначають концентрацію лужних протеаз в мг/мл за допомогою калібрувального графіку.

Основні теоретичні відомості

Протеази використовуються при виробництві миючих засобів та молочних продуктів. Їх виробництво засноване на мікробному синтезі. Одним з критеріїв їх класифікації є значення рН. Розрізняють лужні, нейтральні та кислі протеази.

Найважливішими продуцентами лужних протеаз є Bacillus licheniformis, B. amiloliquifaciens, Streptomyces fradiae, S. grisens та мікроміцети Aspergillus niger, A. sojae, A. oryzae і A. flavus. Лужні фосфатази використовуються як компонент миючих засобів завдяки їх стабільності при високих температурах та в умовах лужного середовища (pH=9–11).

Обладнання, прилади, матеріали

Конічні колби, лійки, пробірки, піпетки, автоклав, казеїн, NaOH, Na₂CO_3, реактив Фоліна–Чокальте, трихлороцтова кислота, тирозин, KH₂PO₄, KCl, MgSO₄, FeSO₄.

Підготовчі роботи

10% трихлороцтова кислота. Зважити 10 г трихлооцтової кислоти, розчинити в 20 мл дистильованої води та довести до 100 мл.

1% казеїн. Розчинити 1 г казеїну в 100 мл дистильованої води, встановити рН = 7 додаванням 0,1 н NaOH та 20% Na₂CO_3.

Стандартний розчин тирозину. Розчинити 1 мг тирозину в 20 мл дистильованої води.

Модифіковане середовище Чапека: казеїн – 1 г, NaNO₃ – 2 г; KH₂PO₄ – 1 г; KCl – 500 мг; MgSO₄ – 500 мг; FeSO₄ – сліди; сахароза – 30 г; дистильована вода – 1000 ml.

Реактив Фоліна–Чокальте. Використовувати готовий розчин.