Контрольные вопросы
1. Каковы морфологические и культуральные особенности возбудителей туляремии?
2. Антигенная структура. С каким антигеном связана вирулентность и какая форма S или R является более вирулентной?
3. Какова устойчивость бактерий туляремии во внешней среде?
4. Какие животные восприимчивы к туляремии? Основные источники заражения.
5. Входные ворота инфекции. Патогенез. Основные формы заболевания.
6. Специфическая профилактика.
Микробиологическое исследование
Цель исследования: выявление возбудителя туляремии.
Сбор материала и исследование проводят в строго режимных условиях!
Материал для исследования
1. Содержимое бубона (бубонная, язвенно-бубонная и ангинозно-бубонная формы).
2. Отделяемое слизистой глаз (глазобубонная форма).
3. Мокрота (легочная форма).
4. Испражнения (абдоминальная форма).
5. Кровь (генерализованная форма).
В специальных лабораториях исследуются грызуны и их выделения, членистоногие (клещи, блохи, комары, слепни), вода, пищевые продукты и т. д.
Способы сбора материала
Способы
сбора материала
Основные методы исследования
1. Аллергический.
2. Серологический.
3. Биологический.
4. Люминесцентно-микроскопический.
5. Бактериологический (не нашел широкого применения, так как непосредственный посев исследуемого материала на искусственные питательные среды роста бактерий не дает).
Ход исследования
Ход
исследования
Контрольные вопросы
1. Перечислите, какой материал для исследования используют при разных клинических формах заболеваний туляремией.
2. Перечислите основные методы исследования.
3. Какие серологические методы применяют для диагностики туляремии?
4. На каких животных ставят биологическую пробу?
5. Почему бактериологический метод не нашел широкого применения?
Задание
Составьте таблицу морфологических, культуральных и ферментативных свойств бактерий туляремии.
Питательные среды
Желточная среда. Желтки свежих яиц смешивают с изотоническим раствором натрия хлорида в соотношении 3:2. Смесь разливают по 4-5 мл в пробирки и в скошенном положении стерилизуют при температуре 80° С в течение часа. Проверяют среду на стерильность (в термостате при 37° С) и сохраняют на холоде до 1 мес.
Глава 29. Возбудители бруцеллеза
В 1886 г. Д. Брюс в селезенке больного, погибшего от мальтийской лихорадки, обнаружил маленькую коккобактерию, которую выделил в чистой культуре и назвал Micrococcus.
В 1896 г. Б. Банг из околоплодной жидкости при аборте коров также выделил коккобактерии. В 1914 г. Ж. Траум выделил подобную палочку от больных свиней. А в 1916 г. Ивенс, изучив все выделенные микроорганизмы, определила их схожесть и в честь Брюса они были названы бруцеллами. В дальнейшем (1953, 1957, 1966) были открыты и другие виды бруцелл. Все они объединены в род Brucella.
В настоящее время бруцеллы подразделяют на виды по признаку их основного хозяина: В. melitensis - болеет мелкий рогатый скот (овцы, козы); В. abortus - болеет крупный рогатый скот; В. suis - болеют свиньи и т. д.
Каждый вид бруцелл подразделяют на биовары: В. melitensis включает 3 биовара; В. abortus - 9 биоваров; В. suis - 5 биоваров. Наиболее патогенным для человека является В. melitensis. B. abortus редко вызывают клиническое проявление заболевания у человека.
Морфология. Возбудители бруцеллеза мелкие 0,6-0,8 × 0,3-0,5 мкм бактерии палочковидной или овоидной формы. Неподвижны. Спор не имеют. Образуют нежную капсулу. Грамотрицательны. В мазке располагаются беспорядочно.
Культивирование. Бруцеллы - аэробы. Прихотливы к питательным средам. Характеризуются замедленным ростом (2-3 нед). Выращивают их на специальных питательных средах: сывороточно-декстрозном агаре, на агаре из картофельного настоя с сывороткой и кровяным агаром (5% овечьей крови), среде "Д", печеночном агаре МПА и МПБ. Растут они при температуре 37° С и рН 6,8-7,2. Некоторые штаммы требуют для роста 5-10% СО2, особенно при первоначальном выделении. На плотных питательных средах вырастают нежные, мелкие, бесцветные, выпуклые с перламутровым блеском колонии в S-форме. Под влиянием некоторых факторов они могут диссоциировать в R-форму. Под действием антибиотиков у них возникают L-формы. В жидких питательных средах бруцеллы дают равномерную муть. Бруцеллы можно культивировать в желточном мешке куриного эмбриона.
Дифференцируют виды бруцелл на основании их способности образовывать сероводород и расти на средах с красителями - основным фуксином и тионином (табл. 44).
Таблица
44. Биологические свойства бруцелл
Ферментативные свойства. Бруцеллы расщепляют D-рибозу, D-галактозу, аланин, аспарагин. Некоторые штаммы гидролизуют аминокислоты с образованием аммиака.
Бруцеллы образуют гиалуронидазу, каталазу, пероксидазу, липазу, фосфатазу и др. Бруцеллы обладают выраженными инвазивными и агрессивными свойствами.
Токсинообразование. Патогенное действие бруцелл определяется, по-видимому, наличием эндотоксина. Кроме того, они обладают аллергенными свойствами.
Антигенная структура. Бруцеллы содержат два соматических антигена А и М. Эти антигены являются видоспецифичными. Они всегда входят в состав микробной клетки, но в разных соотношениях. У В. melitensis преобладает антиген М, у В. abortus и В. suis - антиген А. Кроме того, у них выявлен термолабильный Vi-антиген.
Устойчивость к факторам окружающей среды. При 100° С бруцеллы погибают мгновенно. При температуре 80-85° С - через 5 мин, при 60° С - через 30 мин. К низким температурам они очень устойчивы. Прямые солнечные лучи действуют на них губительно. Во влажной среде бруцеллы сохраняются длительно - 3-4 мес. В молочных продуктах - до 40-45 дней, замороженном мясе - до 5 мес, почве и воде - до 3-5 мес.
Восприимчивость животных. Бруцеллезом болеют в основном сельскохозяйственные животные: мелкий и крупный рогатый скот, свиньи, олени и др. Каждый вид бруцелл поражает определенный вид животного. Но бруцеллы могут мигрировать, т. е. переходить от одного вида животного другому. Например, В. abortus могут поражать мелкий рогатый скот.
Основными признаками заболевания являются: у самок - аборты, у самцов - орхиты. Кроме того, у них бывает поражение суставов, похудание, выпадение шерсти и т. д. Но бруцеллез у животных может протекать в скрытой форме, что способствует распространению инфекции.
Из экспериментальных животных к бруцеллам чувствительны белые мыши и морские свинки. После заражения они абортируют, резко худеют, у них выпадает шерсть. У мышей иногда развивается септицемия.
Источники инфекции. Основным источником заболевания бруцеллезом людей являются мелкий и крупный рогатый скот. Роль человека в передаче бруцеллезной инфекции эпидемиологического значения не имеет.
Пути передачи. Пищевой, контактно-бытовой, воздушно-капельный.
Контактный путь - при работе с животными: в процессе ухода за животными, на предприятиях, перерабатывающих сырье и продукты животного происхождения; при соприкосновении с выделениями больных животных, плодом, в процессе убоя, разделки туши и т. д.
Аэрогенным путем бруцеллы проникают в кожу и неповрежденные слизистые оболочки.
Пищевой путь - употребление зараженных пищевых продуктов. Наиболее опасны молочные продукты - молоко, брынза и т. д.
Патогенез. Попав в организм, бруцеллы по лимфатическим путям проникают в лимфатические узлы, кровь, костный мозг, паренхиматозные органы и локализуются внутри клеток. При обострении процесса бруцеллы из клеток вновь попадают в кровь и возникает рецидив. Заболевание характеризуется воспалением суставов, невралгией и естественными абортами.
Иммунитет - обусловливается клеточными (фагоцитоз) и гуморальными факторами - агглютининами, комплементсвязывающими антителами и др. Иммунитет сочетается с состоянием аллергии. В опытах на морских свинках было показано, что устойчивость к повторному заражению у них сочеталась с положительной реакцией к бруцеллину.
Профилактика. Плановые обследования в животноводческих хозяйствах, на пастбищах, в убойных пунктах, на мясных и молочных комбинатах.
Специфическая профилактика. Вакцинация живой вакциной В. abortus (штамм 19-ВА). Прививки проводят накожным методом однократно, ревакцинируют через 8-12 мес.
Лечение. Антибиотики: левомицетин, эритромицин. Для предупреждения рецидивов используют также бруцеллезный иммуноглобулин.