- •Введение - л. Б. Богоявленская
- •Краткий очерк истории микробиологии - л. Б. Богоявленская
- •Часть I. Общая микробиология Глава 1. Микробиологическая лаборатория - л. Б. Богоявленская
- •Правила поведения и работы в микробиологической лаборатории
- •Методы микробиологического исследования
- •Контрольные вопросы
- •Глава 2. Микроскоп и микроскопические методы исследования - м. Я. Корн
- •Фазово-контрастная микроскопия
- •Люминесцентная (флюоресцентная) микроскопия
- •Темнопольная микроскопия
- •Электронная микроскопия
- •Контрольные вопросы
- •Глава 3. Основы классификации и морфология микроорганизмов - о. Б. Орлеанская
- •Бактерии
- •Строение бактериальной клетки
- •Микоплазмы
- •Спирохеты
- •Риккетсии
- •Контрольные вопросы
- •Изучение морфологии микроорганизмов
- •Техника приготовления мазка
- •Высушивание мазка
- •Фиксация мазка
- •Окраска препаратов
- •Рецепты красителей
- •Простой метод окраски
- •Сложные методы окраски
- •Прижизненная окраска микроорганизмов
- •Изучение подвижности микроорганизмов
- •Контрольные вопросы
- •Задание
- •Глава 4. Физиология микроорганизмов
- •Химический состав бактерий
- •Питание бактерий
- •Ферменты и их роль в обмене веществ
- •Дыхание бактерий
- •Пигменты микроорганизмов
- •Светящиеся и ароматообразующие микроорганизмы
- •Рост и размножение бактерий
- •Контрольные вопросы
- •Глава 5. Влияние факторов окружающей среды на микроорганизмы - н. А. Бельская
- •Физические факторы
- •Химические факторы
- •Биологические факторы
- •Контрольные вопросы
- •Стерилизация
- •Физические способы
- •Сухожаровая стерилизация
- •Контрольные вопросы
- •Задание
- •Стерилизация кипячением
- •Контрольные вопросы
- •Задание
- •Контрольные вопросы
- •Химические способы
- •Биологическая стерилизация
- •Контрольные вопросы
- •Дезинфекция
- •Контрольные вопросы
- •Задание
- •Глава 6. Распространение микроорганизмов в природе - л. Б. Богоявленская
- •Микрофлора почвы
- •Микрофлора воды
- •Микрофлора воздуха
- •Микрофлора организма человека
- •Контрольные вопросы
- •Глава 7. Питательные среды и микробиологическое исследование - г. И. Кац
- •Питательные среды
- •Требования, предъявляемые к средам
- •Классификация сред
- •Контрольные вопросы
- •Задание
- •Приготовление сред
- •Рецепты приготовления простых (основных) сред и изотонического раствора натрия хлорида
- •Рецепты приготовления сложных сред
- •Сухие среды
- •Контрольные вопросы
- •Задание
- •Методы посевов
- •Контрольные вопросы
- •Методы культивирования
- •Методы выделения чистых культур микроорганизмов
- •Изучение выделенных культур
- •Культуральные свойства
- •Морфологические свойства
- •Ферментативная активность
- •Сохранение культур
- •Контрольные вопросы
- •Задание
- •Глава 8. Фаги - г. И. Кац
- •Свойства фагов
- •Контрольные вопросы
- •Методы изучения вирулентных фагов Подготовка материала
- •Качественные методы
- •Количественные методы
- •Методы выделения фагов
- •Практическое применение фагов
- •Препараты фагов
- •Чувствительность микроорганизмов к антибиотикам - н. А. Бельская
- •Методы определения
- •Контрольные вопросы
- •Методика работы с оптическим стандартом мутности
- •Контрольные вопросы
- •Задание
- •Химиопрофилактика и химиотерапия
- •Глава 10. Генетика микроорганизмов - ф. К. Черкес
- •Фенотипическая изменчивость (модификация)
- •Генотипическая (наследуемая) изменчивость
- •Плазмиды
- •Практическое значение изменчивости
- •Контрольные вопросы
- •Глава 11. Учение об инфекции - ф. К. Черкес
- •Патогенность и вирулентность микроорганизмов
- •Роль макроорганизма в инфекционном процессе
- •Влияние окружающей среды на возникновение и развитие инфекционного процесса
- •Механизм передачи инфекции
- •Формы инфекционного процесса
- •Динамика развития инфекционного заболевания
- •Контрольные вопросы
- •Биологические методы исследования
- •Виды лабораторных животных
- •Содержание лабораторных животных
- •Отбор животных и подготовка их к опыту
- •Экспериментальное заражение животных
- •Контрольные вопросы
- •Задание
- •Способы заражения
- •Контрольные вопросы
- •Задание
- •Вскрытие и микробиологическое исследование погибших животных
- •Контрольные вопросы
- •Техника взятия крови у животных
- •Обработка и выделение составных частей крови
- •Контрольные вопросы
- •Задание
- •Глава 12. Учение об иммунитете. Реакции иммунитета. Иммунопрофилактика и иммунотерапия инфекционных болезней - л. Б. Богоявленская, г. И. Кац
- •Наследственный (видовой) иммунитет
- •Приобретенный иммунитет
- •Неспецифические факторы защиты организма
- •Клеточные факторы неспецифической защиты Фагоцитоз
- •Клеточная реактивность
- •Контрольные вопросы
- •Гуморальные факторы неспецифической защиты
- •Контрольные вопросы
- •Специфические факторы защиты организма (иммунитет)
- •Антигены
- •Контрольные вопросы
- •Антитела
- •Контрольные вопросы
- •Клеточные механизмы иммунного ответа
- •Контрольные вопросы
- •Серологические реакции
- •Реакция агглютинации
- •Контрольные вопросы
- •Задание
- •Реакция гемагглютинации
- •Реакция торможения гемагглютинации
- •Реакция непрямой гемагглютинации
- •Контрольные вопросы
- •Задание
- •Реакция преципитации
- •Контрольные вопросы
- •Задание
- •Реакция лизиса (иммунный цитолиз)
- •Контрольные вопросы
- •Задание
- •Реакция связывания комплемента
- •Подготовка ингредиентов
- •Проведение основного опыта
- •Контрольные вопросы
- •Задание
- •Peaкция иммунофлюоресценции
- •Опсонофагоцитарная реакция
- •Контрольные вопросы
- •Задание
- •Реакции иммунитета in vivo (кожаные пробы)
- •Контрольные вопросы
- •Иммунопрофилактика и иммунотерапия инфекционных болезней
- •Контрольные вопросы
- •Глава 13. Аллергия - л. Б. Богоявленская
- •Реакции гиперчувствительности немедленного типа
- •Реакции гиперчувствительности замедленного типа
- •Контрольные вопросы
- •Часть II. Частная микробиология Патогенные кокки - ф. К. Черкес
- •Глава 14. Стафилококки
- •Контрольные вопросы
- •Микробиологическое исследование
- •Контрольные вопросы
- •Задание
- •Питательные среды
- •Глава 15. Стрептококки
- •Streptococcus pyogenes (гемолитический)
- •Микробиологическое исследование
- •Питательные среды
- •Streptococcus pneumoniae (пневмококк)
- •Контрольные вопросы
- •Микробиологическое исследование
- •Контрольные вопросы
- •Задание
- •Питательные среды
- •Глава 16. Менингококки
- •Контрольные вопросы
- •Микробиологическое исследование
- •Питательные среды
- •Глава 17. Гонококки
- •Контрольные вопросы
- •Микробиологическое исследование
- •Серологическая диагностика
- •Питательные среды
- •Семейство кишечных бактерий
- •Глава 18. Эшерихии - л. Б. Богоявленская, ф. К. Черкес
- •Контрольные вопросы
- •Микробиологическое исследование
- •Питательные среды
- •Глава 19. Сальмонеллы - л. Б. Богоявленская, ф. К. Черкес
- •Брюшной тиф, паратифы а и в
- •Пищевые токсикоинфекции
- •Внутрибольничная сальмонеллезная инфекция
- •Контрольные вопросы
- •Микробиологическое исследование
- •Серологическая диагностика брюшного тифа и паратифов
- •Питательные среды
- •Глава 20. Шигеллы - ф. К. Черкес
- •Контрольные вопросы
- •Микробиологическое исследование
- •Серологическая идентификация
- •Питательные среды
- •Условно-патогенные бактерии - л. Б. Богоявленская
- •Глава 21. Клебсиеллы
- •Микробиологическое исследование
- •Серологическая диагностика
- •Контрольные вопросы
- •Глава 22. Протей
- •Микробиологическое исследование
- •Контрольные вопросы
- •Глава 23. Иерсинии энтероколитика
- •Микробиологическое исследование
- •Контрольные вопросы
- •Глава 24. Синегнойная палочка
- •Микробиологическое исследование
- •Контрольные вопросы
- •Возбудители особо опасных инфекций - ф. К. Черкес
- •Глава 25. Возбудители холеры
- •Контрольные вопросы
- •Микробиологическое исследование
- •Материал для исследования
- •Способы сбора материала
- •Основные методы исследования
- •Ход исследования
- •Идентификация культуры
- •Ускоренные методы исследования
- •Питательные среды
- •Глава 26. Возбудитель чумы
- •Контрольные вопросы
- •Микробиологическое исследование
- •Контрольные вопросы
- •Глава 27. Возбудитель псевдотуберкулеза
- •Микробиологическое исследование
- •Глава 28. Возбудитель туляремии
- •Контрольные вопросы
- •Микробиологическое исследование
- •Питательные среды
- •Глава 29. Возбудители бруцеллеза
- •Контрольные вопросы
- •Микробиологическое исследование
- •Глава 30. Возбудитель сибирской язвы
- •Контрольные вопросы
- •Микробиологическое исследование
- •Аллергическая проба
- •Реакция Асколи
- •Питательные среды
- •Контрольные вопросы
- •Микробиологическое исследование
- •Ускоренная диагностика
- •Питательные среды
- •Патогенные коринебактерии - ф. К. Черкес Глава 32. Возбудитель дифтерии
- •Контрольные вопросы
- •Микробиологическое исследование
- •Материал для исследования
- •Способы сбора материала
- •Основные методы исследования
- •Ход исследования
- •Питательные среды
- •Патогенные микобактерии - ф. К. Черкес Глава 33. Возбудители туберкулеза
- •Контрольные вопросы
- •Микробиологическое исследование
- •Патогенные анаэробы - ф. К. Черкес
- •Методы культивирования
- •Питательные среды
- •Устойчивость к факторам окружающей среды
- •Контрольные вопросы
- •Глава 34. Возбудитель столбняка
- •Микробиологическое исследование
- •Контрольные вопросы
- •Глава 35. Возбудители газовой гангрены
- •Микробиологическое исследование
- •Контрольные вопросы
- •Глава 36. Возбудитель ботулизма
- •Микробиологическое исследование
- •Контрольные вопросы
- •Патогенные спирохеты - ф. К. Черкес
- •Глава 37. Возбудитель сифилиса
- •Контрольные вопросы
- •Микробиологическое исследование
- •Контрольные вопросы
- •Глава 38. Возбудители возвратного тифа
- •Эпидемический возвратный тиф
- •Контрольные вопросы
- •Эндемический возвратный тиф
- •Материал для исследования
- •Способы сбора материала
- •Ход исследования
- •Глава 40. Возбудители лептоспирозов
- •Контрольные вопросы
- •Микробиологическое исследование
- •Риккетсии - ф. К. Черкес
- •Глава 41. Возбудители сыпного тифа Сыпной тиф
- •Болезнь Брилла
- •Контрольные вопросы
- •Эндемический блошиный тиф
- •Контрольные вопросы
- •Микробиологическое исследование
- •Контрольные вопросы
- •Глава 42. Возбудитель Ку-лихорадки
- •Глава 43. Возбудители гриппа
- •Вирусологическая диагностика
- •Контрольные вопросы
- •Глава 44. Возбудитель бешенства
- •Вирусологическая диагностика
- •Контрольные вопросы
- •Глава 45. Возбудители полиомиелита
- •Вирусы полиомиелита
- •Вирусологическая диагностика
- •Вирусы Коксаки
- •Вирусологическая диагностика
- •Вирусы echo
- •Вирусологическая диагностика
- •Контрольные вопросы
- •Глава 46. Возбудитель натуральной оспы
- •Вирусологическая диагностика
- •Материал для исследования
- •Способы сбора материала
- •Основные методы исследования
- •Контрольные вопросы
- •Неклассифицируемые вирусы Глава 47. Возбудители гепатита
- •Вирус гепатита а
- •Вирус гепатита в
- •Вирусологическая диагностика
- •Контрольные вопросы
- •Онкогенные вирусы
- •Часть III. Санитарная микробиология
- •Санитарно-бактериологическое исследование воды - ф. К. Черкес
- •Определение общего числа бактерий
- •Определение бгкп
- •Титрационный метод
- •Метод мембранных фильтров
- •Выявление свежего фекального загрязнения
- •Питательные среды
- •Санитарно-бактериологическое исследование почвы - н. А. Бельская
- •Титрационный метод
- •Метод мембранных фильтров
- •Определение титра c. Perfrinrens
- •Питательные среды
- •Контрольные вопросы
- •Задания
- •Санитарно-бактериологическое исследование воздуха - ф. К. Черкес
- •Методы отбора проб воздуха
- •Седиментационный метод
- •Определение общего числа бактерий
- •Определение бгкп
- •Бродильный метод
- •Питательные среды
- •Санитарно-бактериологическое исследование крема и изделий из крема - ф. К. Черкес
- •Определение титра кишечной палочки
- •Выявление коагулазоположительных стафилококков
- •Контрольные вопросы
- •Санитарно-бактериологическое исследование колбасных и мясных продуктов промышленного производства - ф. К. Черкес
- •Определение количества микробов в 1 г продукта
- •Определение бгкп в 1 г продукта
- •Выявление сальмонелл
- •Определение протея
- •Питательные среды
- •Санитарно-бактериологическое исследование баночных консервов - ф. К. Черкес
- •Питательные среды
- •Контрольные вопросы
- •Санитарно-бактериологическое исследование смывов - ф. К. Черкес
- •Исследование на бгкп
- •Выявление s. Aureus
- •Определение общего числа бактерий
- •Контрольные вопросы
- •Задания
- •Санитарно-бактериологическое исследование перевязочного и хирургического материала на стерильность - ф. К. Черкес
- •Контрольные вопросы
- •Санитарно-бактериологическое исследование безалкогольных напитков - ф. К. Черкес
- •Краткий словарь микробиологических терминов - г. И. Кац
- •Микробиология
Питательные среды
Среда Кесслер. См. с. 484.
Среда Козера. К 1 л дистиллированной воды добавляют 1,0 г фосфата однозамещенного калия, 0,2 г сульфата магния, 2,5-3,0 г цитрата натрия. Раствор стерилизуют в автоклаве при 1 атм в течение 15 мин, добавляют 10 мл 0,5% спиртового раствора бромтимолового синего и разливают в стерильные пробирки.
Среда глюкозой. См. главу 7.
Желточно-солевая среда. См. главу 14.
Санитарно-бактериологическое исследование крема и изделий из крема - ф. К. Черкес
Санитарно-бактериологическое исследование крема проводят соответственно методическим указаниям № 1351-75, утвержденным Министерством здравоохранения СССР, которые предусматривают:
1. Определение титра кишечной палочки.
2. Определение плазмокоагулирующих стафилококков в 1 г изделий.
Отбор проб. Пробы крема берут с поверхности и из прослойки. Пробу снимают стерильной ложкой в количестве 50 г и помещают в стерильную стеклянную посуду.
Определение титра кишечной палочки
Первый день исследования
Собранный материал ставят в термостат или водяную баню при температуре не выше 43-45° С. Для исследования используют нижнюю часть растопленного крема.
Из исследуемого материала делают 3 десятикратных разведения: 1:10, 1:100, 1:1000.
10 мл разведения 1:10 засевают в колбу с 50 мл среды Кесслер. Остальные разведения (1:100 и 1:1000) засевают по 1 мл в 5 мл среды Кесслер в пробирках. Посевы ставят в термостат при температуре 43° С на 24 ч.
Второй день исследования
Из всех посевов со средой Кесслер производят высев на сектора чашки Петри со средой Эндо и ставят в термостат при температуре 37° С на 24 ч.
Третий день исследования
При отсутствии подозрительных колоний дают отрицательный ответ.
Из колоний, подозрительных в отношении кишечной палочки, делают мазки, окрашивают по Граму. При наличии грамотрицательных палочек вычисляют коли-титр. Титр БГКП должен быть не ниже 0,3 г.
Выявление коагулазоположительных стафилококков
Первый день исследования
0,1 г растопленного крема засевают на молочно-солевой агар и ставят в термостат при температуре 37° С на 24 ч. Параллельно по 0,5 мл засевают в 2 пробирки с 5 мл 6,5-10% солевого бульона (среда накопления) с последующим пересевом на желточно-солевой агар.
Второй день исследования
Просматривают посевы. При наличии роста чашки с посевами оставляют при комнатной температуре на 24 ч для выявления пигмента. Со среды накопления производят посев на желточно-солевой агар. Инкубируют при 37° С 18-24 ч.
Третий день исследования
Изучают выросшие на чашках колонии. Подозрительные в отношении стафилококков колонии изучают: определяют фермент коагулазу (см. главу 14).
Коагулазоположительных стафилококков не должно быть более 500 в 1 г/мл.
Контрольные вопросы
1. Что определяют в креме и кремовых изделиях?
2. Как определяют титр плазмокоагулирующего стафилококка?
Санитарно-бактериологическое исследование колбасных и мясных продуктов промышленного производства - ф. К. Черкес
Мясо и мясные продукты могут быть обсеменены различными микроорганизмами. Пути инфицирования мяса:
1) обсеменение мяса бывает первичным (прижизненно) в результате ослабления организма животного (голод, травма), т. е. при состоянии, когда нарушаются барьерные функции кишечника, и микробы из него попадают в органы и кровь;
2) микробы могут обсеменять мясо, распространяясь по организму, при заболеваниях животных, например сальмонеллезом;
3) микроорганизмы могут попасть в мясо при забое животных и разделке туш (наиболее частый случай).
Мясные продукты инфицируются при недостаточно строгом соблюдении технологического режима изготовления, нарушения режима хранения и пр.
Колбасные изделия и продукты из мяса промышленного производства исследуют в соответствии с ГОСТом 9958-74, который регламентирует определение:
1) общего числа бактерий в 1 г продукта;
2) присутствия бактерий группы кишечной палочки в 1 г;
3) сальмонелл в 5 г продукта, а также протеев и клостридий.
Отбор проб. От каждой партии колбасных изделий отбирают не менее двух проб из разных мест. Из них составляют общую пробу, которую исследуют. Из сосисок, сарделек составляют общую пробу из нескольких экземпляров. Из таких продуктов как холодец, паштет и других продуктов без оболочки пробы берут из 2-3 мест в количестве 200-250 г каждая.
Общие пробы каждого продукта упаковывают отдельно в стерильный пергамент. Все взятые пробы пломбируют, этикетируют. В этикетке пишут:
1. Название продукта.
2. Время взятия (дата, час).
3. Место взятия.
4. Цель исследования.
5. Куда направлен материал.
6. Подпись лица, взявшего пробу.
Внимание! Транспортировать продукты следует при температуре не выше 6-8° С, а исследование производить не позднее чем через 4 ч с момента отбора пробы.
Подготовка проб к исследованию. Поверхность твердых продуктов (батона) протирают тампоном, смоченным спиртом, и обжигают. Батон разрезают и стерильным ножом отбирают пробу из разных мест. Из копченостей и других мясных изделий вырезают участки предпочтительно ближе к кости.
Из изделий без оболочки сначала берут смывы с поверхности увлажненным тампоном и засевают их на среду "ХБ", Хейфеца или Кесслер. Затем обжигают смоченную спиртом поверхность, срезают ее и вырезают щупом кусочки массой 20 г. Навеску помещают в стерильную фарфоровую ступку и растирают со стерильным кварцевым песком, добавляя небольшими дозами изотонический раствор натрия хлорида (в общей сложности добавляют 80 мл).
