Определение общего числа бактерий

Первый день исследования

К 2 мл взятых смывов прибавляют 8 мл изотонического раствора натрия хлорида. Получается разведение 1:5. Тампоны тщательно отмывают встряхиванием. 1 мл засевают в чашку Петри и заливают 12 мл расплавленного и остуженного до 45° С агара. Чашки инкубируют в термостате при 37° С 24 ч.

Второй день исследования

Посевы вынимают из термостата, подсчитывают количество выросших колоний и делают пересчет на 1 см² исследуемой поверхности.

Выявление синегнойной палочки (см. главу 24).

Выявление протея (см. главу 32).

Внимание! Выявление в смывах патогенной флоры производят только по эпидпоказаниям.

Контрольные вопросы

1. С какой целью проводят исследование смывов с рук и предметов обихода?

2. Какие основные исследования проводят?

3. Как определяют общее количество бактерий?

4. На какую среду засевают смывы для:

а) выделения БГКП?

б) выделения S. aureus?

Задания

1. Приготовьте тампоны.

2. Сделайте смывы с рук друг у друга и посейте на среду Эндо (смывы произвести до мытья рук и после мытья).

3. На второй день учтите результаты посевов.

Санитарно-бактериологическое исследование перевязочного и хирургического материала на стерильность - ф. К. Черкес

Посевы исследуемого материала производят в боксе, соблюдая правила асептики. Выявляют аэробную и анаэробную микрофлору.

Для проведения посевов необходимы:

1) набор стерильных инструментов (ножницы, корнцанги, анатомические пинцеты);

2) стерильный 10% раствор гипосульфита;

3) стерильная дистиллированная вода;

4) питательные среды: сахарный бульон Хоттингера, среда Сабуро и тиогликолевая среда.

Материал для исследования направляют в день его стерилизации в закрытых и опечатанных биксах.

Исследованию подлежат: бинты, тампоны, ватные шарики, марлевые салфетки и шовный материал (кетгут и шелк).

Материал, подлежащий исследованию, достают из бикса стерильным пинцетом, над пламенем горелки вырезают из разных участков кусочки, помещают их в стерильные чашки Петри и производят посев каждого образца в 2 пробирки сахарного бульона и среду Сабуро.

Шовный материал. Кетгут сохраняют в спиртовом растворе йода. Для нейтрализации йода кетгут помещают на 24 ч в баночку с 10% раствором гипосульфита и на 24 ч в стерильную дистиллированную воду. Шелк сохраняют в спирте, а перед посевом моток шелка выдерживают 24 ч в стерильной дистиллированной воде.

Подготовленный таким образом шовный материал стерильным пинцетом извлекают из дистиллированной воды, кладут в чашку Петри, стерильными ножницами разрезают на куски длиной 2-5 см. Отдельные кусочки засевают на 2 пробирки каждой из вышеуказанных сред.

Посевы ставят в термостат при температуре 37° С, инкубируют 12-14 дней, просматривая их каждый день (посевы на среде Сабуро инкубируют при 20-22° С). При наличии роста в пробирках материал признается нестерильным.

Контрольные вопросы

1. Какой материал проверяют на стерильность?

2. Какие используют среды?

3. В каких условиях и как производят посев?

Санитарно-бактериологическое исследование безалкогольных напитков - ф. К. Черкес

Методы исследования безалкогольных напитков регламентирует ГОСТ 13273-75.

Для исследования напитки доставляют в лабораторию в фабричной упаковке, запечатанные пробками.

Перед исследованием горлышко и пробку протирают стерильным тампоном, обжигают, вынимают пробку и закрывают бутылку стерильной ватно-марлевой пробкой.

Для удаления газа бутылку выдерживают при 43° С 1 ч.

Напитки с кислой реакцией перед посевом нейтрализуют стерильным 10% раствором бикарбоната натрия.

Исследование и оценку напитков проводят так же, как исследование и оценку питьевой воды. Напитки, получаемые путем брожения, не проверяют на общую бактериальную обсемененность, поскольку в них содержится большое количество дрожжей и специфической микрофлоры.

Для определения коли-титра напитки засевают на среду Кесслер или ГПС в 2 объемах по 100 мл и 10 объемов по 10 мл. Сиропы предварительно разводят в 10 раз. Квас и пиво как более загрязненные для определения коли-титра засевают в объемах по 10; 1; 0,1 и 0 01 мл Посев производят на среду Кесслер. Дальнейший ход исследования аналогичен исследованию воды.

Титр кишечной палочки газированных безалкогольных напитков должен быть не менее 300, негазированных - не менее 100, хлебного кваса - не менее 10.

Для выявления ослизняющих бактерий (лейконостока), вызывающих порчу продуктов, засевают 1 мл сахаросодержащего напитка в дрожжевую воду с 10% сахарозы и мелом. Посевы выращивают при 22-30° С 48 ч. Наличие ослизняющих бактерий определяют морфологически (грамположительные кокки, часто располагающиеся попарно). На среде с сахарозой они образуют большие слизистые капсулы. На питательных средах вырастают слизистые колонии.