- •Диагностика сифилиса
- •Методика постановки микрореакции
- •Техника постановки реакции связывания комплемента (реакции Вассермана)
- •Методика постановки реакции Вассермана со спиномозговой жидкостью
- •1) Неразведенную; 2) разведенную изотоническим раствором натрия хлорида 1:2; 3) разведенную изотоническим раствором натрия хлорида 1:5.
- •Реакция иммунофлюоресценции - риф-абс и риф-200
- •Техника постановки риф-абс
- •Методика постановки риф-абс с капиллярной кровью
- •Техника постановки риф-ц
- •Методика постановки риф-ц
- •Методика постановки рибт для ликвородиагностики сифилиса
- •Твердофазный иммуноферментный анализ (ифа)
- •Методика постановки ифа для ликвородиагностики сифилиса
Методика постановки реакции Вассермана со спиномозговой жидкостью
В спинномозговой жидкости больного сифилисом могут находиться противотрепонемные антитела и реагины, способные вступать в реакцию связывания комплемента с соответствующими антигенами. Реакцию ставят с непрогретой спинномозговой жидкостью, ввиду отсутствия в ней комплемента. Мутную или с примесью крови жидкость центрифугируют и отсасывают надосадочную жидкость.
Спинномозговую жидкость параллельно исследуют в трех дозах:
1) Неразведенную; 2) разведенную изотоническим раствором натрия хлорида 1:2; 3) разведенную изотоническим раствором натрия хлорида 1:5.
Реакцию производят с двумя антигенами параллельно - трепонемным и кардиолипиновым - с каждым разведением спинномозговой жидкости по схеме (таблица N 2).
Ввиду отсутствия антикомплементарных свойств спинномозговой жидкости для ее исследования комплемент в реакцию вводят по титру (первая растворяющая доза без обычной надбавки). Для повышения качества ликвородиагностики сифилиса реакцию связывания комплемента рекомендуется заменять РИФ-ц или новой модификацией РИТ, методика постановки которой изложена ниже.
Результаты реакции учитывают отдельно для каждой антигена и разведения спинномозговой жидкости. Для обозначения позитивности реакции Вассермана со спинномозговой жидкостью пользуются системой четырех плюсов, описанной выше.
Таблица N 2
Методика постановки реакции Вассермана со спиномозговой жидкостью
Ингредиенты (в мл) |
NN пробирок |
||||||
(общий объем-1,25 мл) |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
(контроль) |
|||||||
Спинномозговая жидкость |
0,05 |
0,05 |
0,13 |
0,13 |
0,25 |
0,25 |
0,25 |
Изотонический раствор натрия 5 хлорида |
0,2 |
0,2 |
0,12 |
0,12 |
|
|
0,25 |
Антиген трепонемный, разведенный по титру |
0,25 |
|
0,25 |
|
0,25 |
|
|
Антиген кардиолипиновый разведенный по титру |
|
0,25 |
|
0,25 |
|
0,25 |
|
Комплемент, разведенный по титру |
0,25 |
0,25 |
0,25 |
0,25 |
0,25 |
0,25 |
0,25 |
Встряхнуть, поместить в термостат при 37 град. С на 45 минут
Гемолитическая система |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
Встряхнуть, поместить в термостат при 37 град. С на 45-60 минут до наступления гемолиза в контрольной пробирке |
|
|
|
|
|
|
|