3. Основные морфологические, тинкториальные, культуральные и биохимические особенности микроорганизма
3.1 Морфология и тинкториальные свойства
Кампилобактерии - грамотрицательные, тонкие, спирально изогнутые палочки, длиной 3-7 мкм, шириной 0,2-0,5 мкм (рис.1). Они могут образовывать один полный (или чуть больше) виток спирали, могут быть С- или S-образной формы или напоминать крылья чайки при соединении двух клеток в короткую цепочку. В старых культурах клетки могут иметь кокковидную или гиперспирализованную форму. Спор и капсул не образуют, имеют 1 или 2 (иногда до 5) полярно расположенных жгутика, обеспечивающих им высокую подвижность со стремительным штопорообразным или винтообразным поступательным движением. Жгутики могут быть в 2-3 раза длиннее клетки (рис.2).
Кампилобактерии
Рис.1. Мазок из чистой культуры С. jejuni. Окраска по Граму.
Жгутик
Рис.2. Типичная форма кампилобактеров: S-образная (а) и спиралевидная (б)
Хорошо красится анилиновыми красками, особенно карболовым фуксином; при окраске по Романовскому-Гимзе в теле клетки обнаруживают зернистость.
3.2Культуральные свойства
Бактерии относятся к микроаэрофилам, хотя отдельные штаммы могут расти и в анаэробных условиях. Оптимальные условия роста: наличие газовой смеси, состоящей из 5-6% О2, 10% СО2 и 85% N2; температура 42-43оС и pH среды 7,2-7,3. Для получения культур возбудителя кампилобактериоза используют полужидкий 0,15-0,2%-й МППА, приготовленные на основе экстракта мышц сердца КРС ЖЭКА, СЖН, готовую сухую среду – кампилобакагар. К стерильным средам добавляют 2% дефибринированной лизированной крови барана, КРС и лошади.
На ПЖА через 2-7 суток появляется рост в пробирке около самой поверхности среды в виде серовато-голубоватого диска толщиной 1-4 мм; на плотной среде кампилобактеры образуют нежный мелкоросинчатый, приобретающий затем серовато-белый цвет налет или отдельные серо-голубоватые колонии; на СЖН при росте чистой культуры розовый цвет среды не изменяется, при смешанном росте или размножении только других видов микробов среда становится ярко-желтой (рис.3).
Рис.3. Рост кампилобактерий на твердой питательной среде
Для создания микроаэрофильных условий посевы ставят в гермитичный сосуд, из которого вытесняют О2. На дно микроанаэростата или эксикатора помещают зажженную свечу и плотно закрывают сосуд крышкой. Через некоторое время концентрация О2 в сосуде уменьшается и свеча гаснет. В ряде случаев можно использовать газогенераторные пакеты, действие которых основано на каталитическом поглощении О2 в замкнутом пространстве до концентрации 5-7% и генерации СО2 химическим способом.
3.3 Биохимические свойства кампилобактерий
Кампилобактеры не ферментируют углеводы и мочевину, дезаминируют глутаминовую и аспарагиновую кислоты, оксидазоположительны, индол не выделяют. Образуют сероводород, за исключением подвида C.fetus venerialis. Желатин не разжижают, молоко не свертывают, не вызывают гемолиза на средах с кровью. Реакции с метиловым красным и Фогеса-Проскауэра отрицательны. Подвиды C.fetus синтезируют каталазу и не редуцируют нитраты.