2 Будова мікроскопа, правила мікроскопування. Дослідження препаратів. Дослідження препаратів. Визначення морфології бактерій. Дослідження під мікроскопом нативного та забарвленого препаратів.

Будова мікроскопа:

1 череви; 2 коробка мікромеханізму, 3 мікрогвинт; 4 тубосотримач; 5 механізм для грубої подачі тубуса; 6 макрогвинт; 7 головка з гніздом; 8 револьєрна система; 9 тубус; 10 предметний столик; 11 гвинт; 12- клема; 13 оправа конденсора; 14 кронштейн; 15 гвинт; 16 вилка дзеркала; 17 дзеркало; 18 конденсор; 19 об’єктив; 20 окуляр.

Правила роботи з мікроскопом

Спочатку мікроскопують забарвлений препарат за загальними правилами з об’єктивом малого збільшення (до *10)

Потім макрогвинтом слід слід підняти тубус, повертаючи його на себе.

Повертаючи ре вольєр встановлюючи на імерсійний об’єктив (*90)

На препарат слід нанести піпеткою або скляною паличкою краплю імерсійного масла

Дивлячись збоку, макрогвинтом опускають тубус так, що об’єктив занурився в краплю масла.

Дивлячись в окуляр, користуються спочатку макрогвинтом (злегка піднімаючи тубус), а потім мікрогвинтом, добиваючись чіткого зображення.

Дослідження препаратів

Етапи приготування препаратів:

1. Техніка нанесення мазка;

2. Вишування

3. Фіксація

4. Забарвлення

Приготування препаратів із бульйоної культури бактерій:

1. Обеззаразити предметне скло в сумші Нікіфорва або натріть його милом очистіть

2. Пропалть скло в полум’ї спиртівки

3. Краплю культури із пробірки нанесіть на охолоджене скло стерильною піпеткою

4. Бактеріологічну петлю прожарить в полум’ї спиртівки

5. Розітріть петлю до розмру 2 копіок

6. Мазок залиште для вишушування

Мазок з мікробної культури яка виросла на щільному живильному середовищі:

1. На охолоджене предметне скельце нанесіть краплю ізотонічного розчину натрію хлориду (посередині скла) стерильною піпіткою або петлею.

2. Поряд з краплею нанесіть матеріал взятий з агарової кулькури розітріть поряд з краплею а потім поступово емульгуйте цим розчином;

3. Петлю прожарте і поставте на місце

3 Забарвлення фіксованого мазка за Грамом, дослідження під мікроскопом. Визначення форм бактерії і тинкторіальних властивостей.

Приготуйте препарат зубного нальоту за Грамом Синьовим

1. На підготовлене скельце нанесіть мазок зубного нальоту

2. Висушіть на повітрі

3. Зафіксуйте над полум’ям спиртівки

4. Покладіть пінцетом на мазок папірець за Синьовим

5. Зволожте водою весь папірець і питисніть до мазка

6. Зачекайте одну хв. і зніміть пінцетем з мазка папірець за Синьовим нанесіть на мазок кілька крапель розчину Люголя на 1 хв (до повного почорніння мазка)

7. Помістіть скло з мазком в хімічний стаканчик зі спиртом на 1 хв (до відходження фіолетових струменів)

8. Промийте мазок водою

9. Нанесіть на нього фуксин Пфейфера на 5 хв

10. Промийте водою і підсушіть на повітрі

4 Приготуйте фіксований мазок за методом Ціля-Нільсона

Приготуйте мазок зубного нальту забарвте за Цілем- Нільсена

1. На зафіксований мазок покладіть шматок фільтрувального паперу і налийте розчин фуксину Цілля

2. Препарат нагрійте над полум’ям спиртівки до появи парів, остудіть додайте знову фуксин Цілля і знову нагрійте (і так три рази);

3. Дайте охолонути зніміть фільтрувальний папір і налийте соляний спирт для обезбарвлення на 1 хв;

4. Промийте водою;

5. Нанесіть метиленовий синій (0,5% водний розчин) на 3-5 хв;

6. Промийте водою і висушіть на повітрі.

Увага! На блакитному фоні кисло чутливі мікроорганізми та червоні кислотостійки мікроорганізми.