Метод определение бактерий группы кишечных палочек (бгкп).

Основным микробиологическим показателем качества сметаны и сырков глазированных является наличие бактерий группы кишечной палочки.

Определение бродильного титра. Метод основан на способности БГКП сбраживать в питательной среде лактозу с образованием кислоты и газа при 37±1 °С в течение 24 ч. В молочной промышленности для определения бродильного титра используют среду Кесслера, в которую в качестве углевода вносят лактозу; в качестве вещества, ингибирующего рост других групп бактерий, - бычью желчь, в качестве индикатора - генцианвиолет. Среду разливают в пробирки с поплавками для обнаружения газообразования.[3] Для этого сметана и творог сеются на 3 разведения: 0,1; 0,01; 0,001 см3.

Посевы производят в боксе. Бокс комплектуется из двух отделений, собственно бокса и предбоксника. Предбоксник служит для одевания специальной санитарной одежды (халаты, колпаки или косынки) и вспомогательных работ. Бокс должен быть оборудован бактерицидными лампами (БуВ-30 и др.), количество которых определяют из расчета мощности облучения 2,5 Вт на куб. м. Выключатель к бактерицидным лампам устанавливается на наружной поверхности бокса. Бактерицидные лампы включаются по окончании работы и уборки помещения, в отсутствие персонала, на 30 - 60 мин.

Ежедневно после окончания работ помещение боксов моют горячей водой с мылом или порошком и протирают досуха.[4]

Берем шпатель, обжигаем. Открываем упаковку продукта, берем оттуда шпателем 10 г. продукта и кидаем в физраствор 90 мл., тщательно перемешиваем и добавляем раскислитель( на 100 мл раствора 1 мл раскислителя).

Взяли 1 мл раствора и добавили в пробирку со средой Кесслер (на 0.1 грамм продукта), и еще 1 мл в физраствор (первое разведение).

Берем теперь 1 мл раствора, полученного в первом разведении, и добавляем в пробирку со средой Кесслер ( на 0.01 грамм продукта), еще 1 мл добавляем в физрасствор ( второе разведение).

Берем теперь 1 мл раствора, полученного во втором разведении, и добавляем в пробирку со средой Кесслер ( на 0.001 грамм продукта) (Третье разведение)

Затем, путем встряхивания пробирки, хорошо перемешивают среду с внесенным посевным материалом, дают ей застыть, после чего пробирки помещают в термостат или водяную баню с температурой 37-40 °С на 18-24 часа.

По окончании инкубации пробирки просматривают. При отсутствии газообразования во всех пробирках с засеянными разведениями дают заключение об отсутствии в продукте БГКП. При наличии же газообразования считают, что БГКП обнаружены в исследуемом объеме.

В образце сырка № 2 у нас вздутие в пробирках и в 0,1 и в 0,01 и в 0,001 г, что говорит о наличии БГКП.

Пересев БГКП на среду Эндо. Для подтверждения принадлежности бактерий, вызвавших брожение в среде Кесслера, материал из забродивших пробирок пересевают на среду Эндо. С этой целью дно чашки Петри с застывшей средой Эндо делили карандашом по стеклу на 3 сектора. Из забродивших пробирок со средой Кесслера берут петлей немного жидкости и проводят ею расширяющимся зигзагом штрих по поверхности агара, начиная от центра сектора к краю чашки. Для получения изолированных колоний петлю не отрывают от поверхности агара. Чашки Петри переворачивают вверх дном и ставят в термостат при 37±1 °С. После 24 ч инкубации определяют характер выросших колоний[4].

Пересев на среду Эндо показал что в образце сырка № 2 рост блестящих красных или розовые колонии с металлическим блеском, золотистые колонии - это кишечная палочка.(См. Приложение).