- •Содержание
- •Культивирование клеток
- •Культивирование клеток микроорганизмов
- •Классификация процессов культивирования
- •Получение накопительных и чистых культур
- •Методы культивирования на твердых средах
- •Процессы суспензионного или глубинного культивирования
- •Периодическое культивирование
- •Продленное периодическое культивирование
- •Глубинное периодическое культивирование
- •Многоциклическое культивирование
- •Полунепрерывное культивирование
- •Непрерывное культивирование
- •1 ™ Такому принципу ведут стадию бро- х° жения при производстве пива в ба
- •Синхронно делящиеся культуры микроорганизмов
- •Регенерация клеточной стенки и реверсия к клеточным формам
- •Культивирование растительных клеток
- •Методы создания клеточных культур растений
- •Протопласты растительных клеток
- •1.3. Культивирование животных клеток
- •Культуральные системы животных клеток
- •Типы культуральных систем
- •Монослойные культуры
- •Суспензионные культуры
- •Субстраты для культивирования биообъектов Принципы составления питательных сред
- •Оборудование для очистки воды
- •Приборы и аппараты для мытья и стерилизации посуды
- •Приборы для дозирования, разведения и пробоотбора
- •Устройства для приготовления питательных сред
- •Помещения для работы с культурами клеток
- •Культуральная посуда
- •Методы общей бактериологии. М.: Мир, 1983. Т. 1, ч. 2. С. 163-512.
- •Культивирование клеток
- •220050, Минск, проспект Франциска Скорины, 4.
- •220030, Минск, ул. Красноармейская, 6.
Культуральная посуда
Основная часть ассортимента специальной культуральной посуды предназначена для роста клеток в монослое, что определяет особые требования к свойствам поверхности и материала изделий как из стекла, так и из пластика. Для культивирования клеток обычно используют флаконы, колбы, матрасы, чашки Петри, платы, роллерные сосуды, пробирки, пипетки и т. д.
Посуда из стекла
Хотя в последние годы широко применяется пластиковая посуда одноразового использования, посуда из стекла не утратила своего значения благодаря ряду бесспорных преимуществ: хорошие адгезионные свойства поверхности, способствующие прикреплению клеток; многократность использования; биологическая инертность стекла ряда составов; термостойкость и другие. Кроме того, в экспериментах с контролируемым уровнем кислорода необходимо пользоваться именно стеклянной посудой, т. к. в пластике кислород может растворяться. Помимо этого из пластика могут экстрагироваться водорастворимые органические соединения.
Для стеклянной лабораторной и культуральной посуды на практике в основном применяются два типа составов - многощелочное и малощелочное боросиликатное стекло типа «Пирекс». Щелочесодержащие силикатные стекла имеют недостаточную термостойкость и химическую устойчивость к воде, кислотам и щелочам. Алюмоборосиликатные малощелочные стекла типа «Пирекс» характеризуются высокой устойчивостью к воде, устойчивостью к щелочным растворам и ко всем кислотам, за исключением плавиковой (фтористоводородной) и горячей фосфорной. Кроме того, стекла типа «Пирекс» обладают хорошими оптическими свойствами.
Существует также группа макропористых стекол, которые не используются для изготовления посуды, но применяются при культивировании клеток в качестве микроносителей.
Однако успех в эксперименте обеспечивается не только качеством стекла, но и степенью подготовки лабораторной посуды. Посуда для культивирования должна быть чистой физически, химически и бактериологически
.Пластиковая посуда
Начиная с 1965 г. все большее применение в лабораторной практике находит пластиковая посуда одноразового использования. При работе с культурами клеток пластиковая посуда в отдельных случаях более пригодна из-за характерных особенностей некоторых клеточных линий. Такая посуда проста в использовании, т. к. выпускается в стерильном, готовом к работе виде. Стерилизация производится в процессе изготовления физическими (облучение УФ светом или гамма-лучами) или химическими (газы - окись этилена, жидкости - этиловый спирт, раствор пергидроля) способами. Пластиковая посуда производится в двух модификациях: для культивирования микроорганизмов и для культивирования клеток. Такое разделение вызвано тем, что культивируемые клетки (речь идет о монослойном культивировании) в отличие от бактериальных клеток находятся в непосредственном контакте с поверхностью сосуда, которая является для них субстратом. Клетки оседают на этой поверхности, прикрепляются и распластываются. Для улучшения адгезионных свойств поверхности из полистирола ее подвергают специальной обработке, в то время как биологическая посуда не обрабатывается.
Таким образом, одним из первых условий успешного культивирования клеток является хороший субстрат, т. е. посуда, обеспечивающая максимальную адгезию, распластывание и, следовательно, рост.ЛИТЕРАТУРА
