- •Введение
- •Раздел 1. Анализ состояния проблемы
- •Функциональные продукты в современной структуре питания
- •Пищевые волокна
- •1.2. Основные направления в развитии технологии производства функциональных продуктов питания
- •Микроорганизмы, используемые при производстве кисломолочных продуктов для функционального питания
- •Пути повышения метаболической активности молочнокислых и пропионовокислых бактерий и критерии их подбора
- •1.5. Особенности использования лактитола в качестве пребиотика
- •1.6. Заключение по обзору литературы
- •Раздел 2. Разработка биотехнологии
- •2.2. Изучение сочетаемости ассоциатов и выбор оптимальных условий их культивирования
- •2.3. Выбор оптимального соотношения ассоциатов для получения микробного консорциума
- •2.4. Изучение основных биотехнологических свойств ассоциатов молочнокислых и пропионовокислых бактерий и их микробного консорциума
- •2.5. Исследование антагонистической активности микроорганизмов ассоциатов и их консорциума к тест-культурам патогенных и условно-патогенных микроорганизмов
- •1:2 1:4 1:128 1:64 1:32 1:8 1:16 Тест - культуры эффект
- •1:128 1:64 1:32 1:16 1:8 1:4 1:2 Тест - культуры
- •1:128 1:64 1:32 1:16 1:8 1:4 1:2 Тест - культуры
- •2.6. Исследование резистентности микроорганизмов ассоциатов и их консорциума к фенолу, желчи, NaCl и щелочной реакции среды
- •2.7. Исследование резистентности микроорганизмов ассоциатов и их консорциума к антибиотикам
- •2.8. Исследование морфологических особенностей колоний микроорганизмов в ассоциатах и микробном консорциуме
- •2.9. Разработка биотехнологии производства биопродукта с широким спектром антимикробной активности
- •Раздел 3. Разработка биотехнологии производства биопродукта - синбиотика для функционального питания
- •Обоснование выбора лактитола для обогащения биопродукта
- •3.2. Изучение влияния лактитола на качественные показатели биопродукта
- •Разработка биотехнологии производства биопродукта – синбиотика
- •Раздел 4. Изучение качественных показателей биопродуктов для функционального питания
- •4.1. Изучение органолептических, физико-химических, микробиологических показателей биопродуктов
- •4.2. Изучение реологических показателей биопродуктов
- •Изучение энергетической, биологической и пищевой ценности биопродуктов
- •Оценка экономической эффективности и социальной значимости разработанных биотехнологий производства биопродуктов
- •Заключение
- •Библиографический список
- •Содержание
Раздел 1. Анализ состояния проблемы
Функциональные продукты в современной структуре питания
Последние десятилетия прошлого века характеризовались интенсивным развитием науки о питании. Это связано с совершенствованием методологии эпидемиологических исследований, достижениями протеомики и геномики, совершенствованием аналитической базы для изучения химического состава пищевых продуктов, разработкой и широким внедрением в производство новых видов пищевых продуктов с заданным химическим составом и функциональными свойствами и др. [119].
В результате появились концепции в области питания, направленные па улучшение здоровья путем создания новых пищевых продуктов, благоприятно воздействующих на функции организма. Этому способствует и накопление научных знаний о взаимосвязи между пищевыми продуктами и здоровьем [126]. Современной медицинской наукой в настоящий момент принята концепция оптимального питания. Это означает, что осуществлен переход от концепции адекватного питания, когда в основном регламентировались и нормировались макронутриенты - источники жира, источники энергии, пластического материала, к концепции оптимального питания, когда спектр эссенциальных и других минорных компонентов, на которые раньше не обращали внимания, значительно расширен [70, 106]. В рамках развития концепции оптимального питания сформировалось новое направление науки о питании - концепция функционального питания, которая включает разработку теоретических основ, производства, реализации и потребления функциональных продуктов [105].
Понятие «функциональное питание» берет начало на Востоке. Концепция позитивного (функционального) питания впервые сформулирована в Японии в начале 80-х годов прошлого столетия. Японские исследователи определяют три основных качества функциональных продуктов: необходимая пищевая ценность, приятный вкус, положительное физиологическое воздействие. Продукты здорового питания не являются лекарствами и не могут излечивать, но помогают предупредить болезни и старение организма в сложившейся экологической обстановке [48, 64, 70].
В современной структуре питания функциональные пищевые продукты занимают промежуточное место между продуктами массового потребления и диетическими продуктами, в частности, продуктами, предусмотренными для специальных медицинских целей [131, 137].
Согласно ГОСТ Р 52349 [39] под функциональным продуктом питания понимают пищевой продукт, предназначенный для систематического употребления в составе пищевых рационов всеми возрастными группами здорового населения, снижающий риск развития заболеваний, связанных с питанием, сохраняющий и улучшающий здоровье за счет наличия в его составе физиологически активных функциональных ингредиентов.
Данная группа объединяет входящие в составы пищевых продуктов вещества (и их комплексы) животного, растительного и минерального происхождения, а также живые микроорганизмы, обладающие способностью оказывать благоприятное влияние на одну и/или несколько метаболических реакций организма человека при систематическом употреблении в количествах, сопоставимых с суточной физиологической потребностью в них [39, 82, 124].
Как часть ежедневной диеты, функциональные продукты питания могут принимать участие в регулировании или улучшении защитных биологических механизмов, помогать в предупреждении конкретных заболеваний либо просто замедлять физически процесс старения, повышать выносливость и улучшать душевное состояние человека [33, 107].
К категориям функционального питания относят пробиотики, пищевые волокна, олигосахариды, витамины, минеральные вещества, полиненасыщенные жирные кислоты, сахароспирты, холины, аминокислоты, протеины, пептиды, спирты, органические кислоты, изопреноиды, антиоксиданты [65].
По международной классификации, в зависимости от способа восстановления микрофлоры хозяина, принято различать функциональные продукты пробиотической, пребиотической, синбиотической направленности [94, 165].
Пробиотические продукты занимают особое место в разработке продуктов лечебно-профилактического питания, так как содержат в своем составе живые микроорганизмы, пищевые добавки микробного происхождения, проявляющие свои позитивные эффекты на организм через регуляцию кишечной микрофлоры (путем проявления антагонистической активности по отношению к патогенной и нежелательной микрофлоре кишечника человека) [24, 84, 142].
Термин «пробиотики», что означает «для жизни», был предложен в 1974г. Р. Паркером [117].
Согласно ГОСТ Р 52349 пробиотик – это физиологически функциональный пищевой ингредиент в виде полезных для человека (непатогенных и нетоксичных) живых микроорганизмов, обеспечивающих при систематическом употреблении человеком в пищу непосредственно в виде препаратов или биологически активных добавок к пище, либо в составе пищевых продуктов благоприятное воздействие на организм в результате нормализации состава и / или повышения биологической активности нормальной микрофлоры кишечника [39].
В целом, к микроорганизмам, используемым для приготовления пробиотиков, относят: Bacillus subtilis; Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium longum; Lactobacillus acidophilus, L.casei, Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgariсus, L.helveticus, L.fermentum, L.lactis, L.rhamnosus, L.plantarum; Propionibacterium; Saccharomyces boulardii: S.cremoris, S.lactis, Streptococcus salivarius subsp. thermophilus и др. [124, 157].
Пробиотики, приготовленные на основе вышеуказанных микроорганизмов, могут содержать как представителей только одного вида бактерий - монопробиотики, так и ассоциацию штаммов нескольких видов микроорганизмов (от 2 до 30) – ассоциированные пробиотики [49, 124].
Пробиотики могут назначаться широкому кругу живых организмов, вне зависимости от видовой принадлежности хозяина, от которого первоначально были выделены штаммы пробиотических бактерий (гетеропробиотики). Более часто пробиотики используются с вышеуказанной целью представителями того вида животных или человека, из биоматериала которых были выделены соответствующие штаммы (гомопробиотики). В последние годы в практику начинают внедряться аутопробиотики, действующим началом которых являются штаммы нормальной микрофлоры, изолированные от конкретного индивидуума и предназначенные для коррекции его микроэкологии [48, 127].
Микроорганизмы - пробионты осуществляют синтез аминокислот, ферментов, участвуют в общем метаболизме, восполняют дефицит белков животного происхождения, ускоряют процессы переваривания и усвоения пищи [130, 153].
В настоящее время, микроорганизмы, используемые как пробиотики, классифицируют на 4 основные группы:
Бактерии, продуцирующие молочную и пропионовую кислоты (роды Lactobacterium, Bifidobacterium, Propionibacterium, Enterococcus);
Спорообразующие аэробы рода Bacillus;
Дрожжи, которые чаще используют в качестве сырья при изготовлении пробиотиков (роды Saccharomyces, Candida);
Комбинации перечисленных организмов [125].
На схеме 1 представлены основные требования, предъявляемые к микроорганизмам – пробиотикам [127].
Рис. 1. Основные требования, предъявляемые
к микроорганизмам – пробиотикам
Пробиотики на основе компонентов микробных клеток реализуют свое положительное влияние на физиологические функции и биохимические реакции организма либо непосредственно, вмешиваясь в метаболическую активность клеток соответствующих органов и тканей, либо опосредованно, через регуляцию функционирования биопленок на слизистых микроорганизма [20, 87].
Помимо восстановления микроэкологического статуса, связанного с ним повышения колонизационной резистентности и предотвращения транслокации потенциально патогенных микроорганизмов через слизистые, многие пробиотики могут оказывать положительный эффект на организм хозяина в результате модуляции аутоиммунных реакций, изменения функций макрофагов, активации иммунной системы [71, 116, 143].
Таким образом, позитивный эффект пробиотиков и продуктов функционального питания на основе живых микроорганизмов на человека реализуется через нормализацию его кишечной микрофлоры, модуляцию биохимических реакций и физиологических функций клеток, а также опосредованного воздействия на иммунно–эндокринно–нервную системы регуляции механизмов поддержания гомеостаза [124, 143].
В РФ ассортимент кисломолочных продуктов пробиотического характера постоянно расширяется за счет разработки и внедрения новых технологий [23, 31, 85 88-91]. В качестве примера можно рассмотреть кисломолочные напитки с разным видовым составом пробиотической микрофлоры: «Био-простокваша», «Снежок», «Целебный», «Тонус».
«Био-простокваша» - это пробиотический кисломолочный напиток, содержащий бифидобактерии. Это продукт однородной, сметанообразной консистенции с чистым кисломолочным вкусом и запахом, белого цвета с кремовым оттенком; количество жизнеспособных клеток молочнокислых бактерий — не менее 107 КОЕ/см3, бифидобактерий - не менее 106 КОЕ/см3. Особую ценность продукт представляет для людей старшего возраста (геродиетическое питание), а также для детей старше года [67, 120].
«Снежок» - кисломолочный напиток, вырабатываемый из пастеризованного молока, сквашенного чистыми культурами термофильного стрептококка и болгарской палочки, с добавлением сахара, плодово-ягодных сиропов или пюре. Напиток характеризуется приятными органолептическими и выраженными пробиотическими свойствами [117].
Кисломолочный напиток «Тонус» - уникальный высокотехнологический кисломолочный напиток, получаемый путем сквашивания молока закваской, состоящей из пропионовокислых, уксуснокислых бактерий и молочнокислых мезофильных ароматобразующих стрептококков. Синтезируемые пропионовокислыми бактериями натуральные антиоксиданты позволяют сохранять биологическую активность продукта без каких-либо химических добавок. «Тонус» рекомендуется женщинам в дородовой и послеродовой периоды, детям с трех лет и людям, живущим и работающим в экологически неблагоприятных условиях города [42].
Кисломолочный напиток «Целебный» - это пробиотический продукт, выработанный с использованием сухой закваски, в состав которой входят пропионовокислые бактерии. В основу разработки технологии данного продукта лег процесс раздельного культивирования пропионовокислых бактерий и молочнокислых стрептококков. Напиток характеризуется хорошими органолептическими, физико-химическими и санитарно-гигиеническими показателями. Имеет приятный специфический кисломолочный вкус, содержит высокое количество клеток пропионовокислых бактерий и витамина В12 [88, 111].
Недавно за рубежом на рынок вышли генномодифицированные пробиотики на основе Lactococcus lactis, в геном которых искусственно введены структурные гены эукариотических клеток, детерминирующие продукцию функциональных цитокинов (IL-10) и других регуляторных протеинов (TFF- фактор) [120, 124]. В экспериментах на животных и в клинических наблюдениях показана высокая эффективность подобного пробиотика в лечении болезни Крона и язвенного колита [83, 118].
Ряд зарубежных и отечественных авторов позволяют сделать заключение о необходимости введения веществ - пребиотиков, благотворно влияющих на здоровье и одновременно стимулирующих развитие полезной аутофлоры человека, а также повышающих лечебно-профилактические свойства препаратов пробиотической направленности [2, 72, 163].
Пребиотики - функциональные пищевые ингредиенты в виде вещества или комплекса веществ, обеспечивающие при систематическом употреблении оптимизацию микроэкологического статуса организма человека за счет избирательной стимуляции роста и (или) биологической активности нормальной микрофлоры пищеварительного тракта [39, 93].
К ним относятся волокна полисахаридной природы (инулин, гуммиарабик) и олигосахариды (олигофруктоза, лактулоза), которые способствуют росту и развитию нормальной кишечной микрофлоры человека [92, 103, 164].
В таблице 1 представлены основные виды пребиотических соединений.
Таблица 1
Основные виды пребиотических соединений
Группа |
Стимулирующее рост вещество |
Моносахариды, спирты |
Ксилит, мелибиоза, ксилобиоза, раффиноза, сорбит |
Олигосахариды |
Лактулоза, лацитол, соевый олигосахарид, фруктоолигосахарид, галактоолигосахарид, изомальтоолигосахарид, диксилоолигосахарид. |
Полисахариды |
Пектины, пуллулан, декстрин, инулин, хитозан |
Ферменты |
β- микробные галактозидазы, протеазы сахаромицетов |
Пептиды |
Соевые, молочные и т.д. |
Аминокислоты |
Валин, аргинин, глутаминовая кислота |
Антиоксиданты |
Витамины А, С, Е, α-, β –каротины, глутатион, убихинол, соли селена |
Ненасыщенные жирные кислоты |
Эйкозопентаеновая кислота |
Органичекие кислоты |
Пропионовая, уксусная, лимонная |
Растительные и микробные экстракты |
Морковный, картофельный, рисовый, тыквенный, чесночный, дрожжевой и т.д. |
Другие |
Лецитин, лизоцим, крахмальная патока, лактоферрин, глюкомовая кислота |
Среди известных сегодня бифидогенных факторов наибольшую долю составляют ферментируемые бактериями углеводы, специально синтезированные или выделенные из природных источников (топинамбура, цикория и др.) [46, 92].
В настоящее время наибольшее коммерческое значение имеют олигосахариды и растворимые пищевые волокна (ПВ) [69, 160].
По составу ПВ (рис.2)следует отнести в основном к некрахмальным полисахаридам, за исключением лигнина, который обычно рассматривают как отдельный вид ПВ [78, 129].
Их использование с пищей не увеличивает содержание глюкозы в крови и не стимулирует образование инсулина.
