Принципы рациональной химиотерапии. Определение чувствительности бактерий к антибиотикам.
Химиотерапия должна назначаться строго по показаниям, т.е. только в тех случаях, когда без нее нельзя обойтись, с учетом противопоказаний, например, повышенной чувствительности или аллергической реакции к препаратам той или иной группы.
При этиологически расшифрованных заболеваниях выбор препарата должен определяться с учетом чувствительности возбудителя (антибиотикограмма), выделенного от данного конкретного больного в результате бактериологического исследования. Лечение должно проводиться строго по схеме, рекомендованной для выбранного химиопрепарата (способ и кратность введения препаратов, длительность лечения), с учетом коэффициента увеличения концентрации препарата в целях создания эффективных концентраций препарата непосредственно в органах и тканях (примерно 4 МПК – минимальная подавляющая концентрация, определенная, по возможности, методом серийных разведений). Длительность приема химиопрепаратов должна составлять как минимум 2-3 дня в целях профилактики формирования устойчивых к данному препарату штаммов возбудителей, а также формирования бактерионосительства.
Химиотерапию желательно дополнить применением средств, способствующих повышению активности защитных механизмов макроорганизма (принцип иммунохимиотерапии).
Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам делятся на 2 группы: диффузионные и методы разведения.
Определение чувствительности бактерий к антибиотикам:
диффузионные методы
с использованием дисков с антибиотиками
с помощью Е-тестов
методы разведения
разведение в жидкой питательной среде (бульоне)
разведение в агаре
При
определении чувствительности
диско-диффузионным методом на поверхность
агара в чашке Петри наносят бактериальную
суспензию определенной плотности
(обычно эквивалентную стандарту мутности
0,5 по McFarland) и затем помещают диски,
содержащие определенное количество
антибиотика. Диффузия антибиотика в
агар приводит к формированию зоны
подавления роста микроорганизмов вокруг
дисков. После инкубации чашек в термостате
при температуре 35о-37оС в течение ночи
учитывают результат путем измерения
диаметра зоны вокруг диска в миллиметрах
(рис. 1).
Методы разведения основаны на использовании двойных последовательных разведений концентраций антибиотика от максимальной к минимальной (например от 128 мкг/мл, 64 мкг/мл, и т.д. до 0,5 мкг/мл, 0,25 мкг/мл и 0,125 мкг/мл). При этом антибиотик в различных концентрациях вносят в жидкую питательную среду (бульон) или в агар. Затем бактериальную суспензию определенной плотности, соответствующую стандарту мутности 0,5 по MсFarland, помещают в бульон с антибиотиком или на поверхность агара в чашке. После инкубации в течение ночи при температуре 35о-37оС проводят учет полученных результатов. Наличие роста микроорганизма в бульоне (помутнение бульона) или на поверхности агара свидетельствует о том, что данная концентрация антибиотика недостаточна, чтобы подавить его жизнеспособность. По мере увеличения концентрации антибиотика рост микроорганизма ухудшается. Первую наименьшую концентрацию антибиотика (из серии последовательных разведений), где визуально не определяется бактериальный рост принято считать минимальной подавляющей концентрацией (МПК). Измеряется МПК в мг/л или мкг/мл (рис. 3).
Минимальная подавляющая концентрация (МПК) - наименьшая концентрация антибиотика (мг/л или мкг/мл), которая in vitro полностью подавляет видимый рост бактерий
На основании получаемых количественных данных (диаметра зоны подавления роста антибиотика или значения МПК) микроорганизмы подразделяют на чувствительные, умеренно резистентные и резистентные.